乳腺丝氨酸蛋白酶抑制剂基因在胶质瘤细胞株U87、U251中表达沉默的表观遗传学机制

目的探讨乳腺丝氨酸蛋白酶抑制剂基因(maspin)在人胶质瘤细胞株U87、U251中沉默与表观遗传学关系。方法运用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blot检测maspin基因在U87、U251的表达。甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)测定maspin基因启动子区区域甲基化状态。同时运用亚硫酸氢盐测序法(BSP)检测maspin基因启动子区甲基化CpG位点。RT-PCR检测12μmol/L 5-氮杂-2′-脱氧胞苷(5-Aza-DC)和/或500 nmol/L曲古霉素(TCeralasertib纯度SA)、15μmol/L 5-Aza-DC/或500 nmol/L TSA分别处理U87、U251后,maspin基因mRNA表达水平。结果在胶质瘤细胞株U87、U251中maspin基因表达沉默。maspin基因启动子CpG位点处于甲基化状态。RT-PCR结果显不,未处理组、5-Aza-DC、TSA、5-Aza-insects infection modelDC和TSA分别处理U87后,maspin mRNA相对表达量分别为:0.001 2±0.0001、0.030 3±0.000 6、0.0196±0.001 6、0.052 6±0.003 4;未处理组和5-Aza-DC、TSA、5-Aza-DC和TSA分别处理U251后,maspin mRNA相对表达量分别为:0.002 2±0.003 0、0.012 2±0.000 8、0.024 9±0.001 2、0.038 4±0.003 1。表明5-Aza-DC和/或TSA能恢复U87、U251中maspin基因表达(P<0.01)。结论 maspin在胶质瘤中的表达Adavosertib半抑制浓度抑制与其启动子CpG岛甲基化及组蛋白去乙酰化相关,5-Aza-DC和/或TSA能恢复maspin在胶质瘤细株U87、U251中的转录。