斑蝥素对肝癌荷瘤鼠PD-1/PD-L1表达的影响及机制研究

目的 探讨阿拉嘎-斑布有效提取物斑蝥素(Cantharidin,CTD)对H22肝癌荷瘤鼠的抑瘤作用和对程序性死亡因子受体-1(programmeddeathreceptor1,PD-1)及其配体PEG3001(programmeddeath-ligand1,PD-L1)表达的影响及可能的机制。方法 采用细胞株培养移植法建立H22肝癌荷瘤小鼠模型,建模成功后随机分为模型组、5-氟尿嘧啶(5-Fluorouracil,5-Fu)阳性对照组和CTD高、中、低剂量组,每组8只。CTD各剂量组每日分别按1 mg/kg、0.5 mg/kg、0.25mg/kg剂量腹腔注射给药,5-Fu组按25 mg/kg每2天注射给药,模型组每日注射生理盐水;给药周期15天;期间每间隔2天称量各组荷瘤鼠体重,记录体重变化;测量各组荷瘤鼠肿瘤体积,绘制肿瘤生长曲线;取材后称取肿瘤质量,计算抑瘤率;肿瘤组织经HE染色后观察形态学变化;通过荧光定量PCR检测荷瘤鼠脾脏组织PD-1selleck合成和肿瘤组织PD-L1mRNA的表达情况;利用WesternBlot检测荷瘤鼠脾脏中PD-1和肿瘤组织PD-L1、HIF-1α、PI3K/AKT蛋白的表达情况。结果 与模型组比较,CTD高剂量组能够抑制肝癌小鼠肿瘤的生长,抑瘤率为38.96%,与5-Fu组相当;CTD中、低组抑制效果不显著;HE染色结果显示模型组肿瘤细胞数量多,排列不规则,细胞核呈多形性且蓝染较深;5-Fu组和CTD高剂量组肿瘤细胞的密度有所减小,出现不同程度的坏死和凋亡,空泡数量增多;CTD高剂量组和5-Fu组均能降低脾脏组织PD-1和肿瘤组织中PD-L1mRNA和蛋白质的表达水平(P<0.05),且能下调肿瘤组织中PI3K/AKT、HIF1α蛋白的表达水平(P<0.05)。结论 斑蝥素通过下调HIF-1α表达降低肝癌荷瘤鼠中PD-1/PD-L1水平,进而影响PI3K/Translational ResearchAKT的表达,从而抑制荷瘤鼠肿瘤的生长。