甘草水提物促进Erastin诱导CRC细胞株发生铁死亡

目的:研究甘草水提物能否促进Erastin诱导结直肠癌(CRC)细胞株发生铁死亡。方法:2种CRC细胞(Caco-2、SW837)分别分为5组:空白对照组、甘草水提物低浓度(50μg/mL)组、甘草水提物高浓度(100μg/mL)组、甘草水提寻找更多物高浓度(100μg/mL)+铁死亡诱导剂Erastin(30μmol/L)组、甘草水提物高浓度(100μg/mL)+铁死亡诱导剂Erastin(30μmol/L)+Fer-1(30 nmol/L)组。MTT检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡、死亡情况及细胞ROS生成量、线粒体膜电位变化,CCK-8实验验证细胞死亡方式,并检测Fe~(2+)、MDA、GSH水平和SLC7A11、DPP4、NOX1、GPX4蛋白表达。结果:与空白对照组比较,程序性坏死性凋亡抑制剂Necrostatin-1、凋亡抑制剂Z-VAD-FMK、自噬抑制剂3-MA均不能阻断甘草水提物联合Erastin处理导致的细胞死亡,而铁死亡抑制剂Fer-1能抑制甘草水提物联合Erastin处理导致的细胞死亡,说明细胞死亡为铁死亡。甘草水提物100μg/mL组和甘草水提物100μg/mL+Erastin组Caco-2、SW837细胞中ROS生成量、MDA含量、Fe~(2+)含量及DPP4蛋白表达显著升高,线粒体膜电位、GSH水平及SLC7A11、NOX1、GPX4蛋白表达显著降低(P<0.05或P<0.01)。与甘草水提物100μg/mL+Erastin组比较,Fer-1的加入使得Caco-2、SW837细胞中ROS生成量、MDA含量、Fe~(2+)含量及DPP4蛋白biocontrol agent表达显著降低,线粒体膜电位、GSH水平及SLC7A11、NOX1、GPX4蛋白表达显著升高(P<0.05www.selleck.cn/products/abt-199或P<0.01)。结论:甘草水提物能诱导CRC细胞株发生铁死亡。