补骨脂是一味传统中药,其药用历史悠久,具有温肾助阳,温脾止泻等功效;现代研究表明补骨脂也具有缓解骨关节疾病等药理作SCH772984生产商用。然而,过量使用补骨脂可能会导致多器官损伤。目的本研究旨在初步分析补骨脂常用饮片-盐补骨脂的乙醇提取物(ethanol extract of salt-processed Psoraleae Fructus,EEPF)的主要成分,并评估其急性经口毒性,探究其急性肝损伤机制。材料和方法本研究首先采用UHPLC-HRMS对EEPF进行成分分析。其次,在昆明小鼠中进行急性经口毒性试验。通过主要器官脏器指数、形态学与组织病理学;肝、肾生化指标与氧化应激状态评价其急性毒性;并通过肝组织TUNEL染色以及对焦亡信号通路的mRNAICI 46474采购和蛋白表达的PacBio and ONT检测,探究EEPF诱导的急性肝损伤潜在机制。结果通过UHPLC-HRMS分析,结合数据库匹配,发现EEPF中含有补骨脂素和异补骨脂素等107种化合物。进一步的EEPF急性经口毒性试验结果表明,EEPF对昆明小鼠的LD50为15.95 g/kg。虽然各试验组小鼠心、肝、脾、肺、肾等脏器指数与对照组相比无显著差异,但通过形态学和组织病理学观察发现过量给药EEPF的小鼠出现肝、肾损伤,且肝、肾损伤生化指标显著升高。此外,过量给药EEPF小鼠肝、肾的氧化应激标志物如MDA含量显著增加,而SOD、CAT、GSH-Px (仅肝脏)和GSH水平显著降低。同时,过量给药EEPF还增加了肝脏TUNEL阳性细胞数以及NLRP3、caspase-1、ASC和GSDMD的mRNA和蛋白表达,并增加了IL-1β和IL-18的蛋白表达。结论上述结果表明过量给药EEPF会引起小鼠急性肝、肾损伤。针对过量给药EEPF引起的急性肝损伤,其可能机制为氧化应激损伤以及NLRP3/ASC/Caspase-1/GSDMD信号通路所介导的肝细胞焦亡。