背景与意义:啤酒花(Humulus lGW4869分子量upulus L.)为桑科葎草属的多年生草本植物,其雌株花序赋予啤酒独特的风味和香气,近年也作为药食两用植物备受关注。黄腐酚(Xanthohumol,XN)为啤酒花所含主要的异戊二烯黄酮类化合物,具有抗肿瘤、抗炎、抗菌等多种生理活性。神经母细胞瘤(Neuroblastoma,NB)是儿童常见高发肿瘤,异质性强,高危恶性神经母细胞瘤易转移,尚未有理想干预策略。本研究采用体外培养的人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞,考察了XN的体外抗肿瘤活性,并从氧化还原稳态和铁死亡角度探究了XN杀伤SK-N-SH细胞的分子机制,以期为XN的抗肿瘤应用提供科学依据。方法:(1)应用荧光显微镜观察XN对SK-N-SH细胞形态的影响。(2)采用SRB方法和台盼蓝拒染法检测XN对细胞活力的影响。(3)比色法检测细胞释放乳酸脱氢酶(LDH)水平表征细胞膜受损程度。(4)采用荧光探针DCFH-DA、BODIPY~(TM)581/591 C11、Ferro Orange染色,荧光显微镜观察或流式细胞术检测细胞总活性氧和脂质过氧化水平,采用荧光显微镜结合荧光酶标仪检测细胞内游离Fe~(2+)水平。(5)比色法检测脂质过氧化产物(MDA)、葡萄糖六磷酸脱氢酶(G6PDH)、还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)和还原性谷胱甘肽(GSH)水平。(6)应用Western blot技术检测铁死亡相关蛋白(GPX4、FTH1)表达。结果:(1)XN呈时间(24、48、96 h)和浓度(0～80μmol/L)依赖性抑制SK-N-SH细胞增殖并诱导细胞死亡;(2)10、20μmol/L XN处理24 h后,细胞膜损伤,细胞活性氧及脂质过氧化应激水平显著升高;(3)20μmol/L XN处理24 h后G6PDH活力显Library Construction著降低,NADPH及GSH水平也降低,GPX4蛋白表达显著下降,表明细胞抗氧化防御能力减弱,细胞内氧化还原稳态失调;(4)10、20μmol/L XN处理24 h后细胞内Fe~(2+)超载,FTH1蛋白表达降低,提示有铁死亡的发生;(5)铁死亡特异性抑制剂(Fer-1)对XN导致的细胞增殖抑制及损伤具有保护作用,且显著减弱XN所致的氧化应激水平及Fe~(2+)超载。结论:XN可通过触发氧化还原稳态失调和Fe~(2+)超载来诱导人CX-5461说明书神经母细胞瘤(SK-N-SH)发生铁死亡。