目的:肝脏缺血再灌注(I/R)损伤是肝切Colonic Microbiota除术和肝移植的主要并发症。铁死亡是一种程序性死亡,其特点是脂质过氧化造成的细胞膜损伤,参与了肝脏I/R损伤的发生发展。跨膜成员16A(TMEM16A),也称为Anoctamin 1,是一种钙离子激活的氯离子通道,参与多种肝脏疾病的发生发展。多项研究表明,TMEM16A会导致ROS蓄积,从而造成脂质过氧化引起细胞损伤。然而,TMEM16A是否通过调控铁死亡影响肝脏I/R损伤的发生发展有待明确。方法:为了系统的研究TMEM16A在肝细胞中的功能,我们对肝细胞特异性TMEM16A敲除小鼠、AAV介导的TMEM16A肝细胞特异性过表达小鼠及其相应的同窝对照小鼠进行70%的肝脏缺血90 min,再灌注0-24 h,以检测TMEM16selleck合成A对肝I/R损伤的影响。为了进一步研究TMEM16A影响肝I/R损伤的机制,我们在293T细胞系和LO2细胞系中转染相应质粒并通过CO-IP实验观察TMEM16A与谷胱甘肽过氧化酶4BAY 73-4506分子量(GPX4)的蛋白互作情况。随后,我们构建了截短TMEM16A与GPX4结合部分的AAV-TM-M,以观察TMEM16A和GPX4的结合对于肝I/R损伤是否至关重要。结果:(1)在I/R损伤小鼠的肝脏样本中,TMEM16A表达增加,并与肝损伤的进展呈正相关。(2)TMEM16A缺陷小鼠在肝脏I/R损伤后,与Flox小鼠相比,肝脏损伤减轻,表现为肝细胞炎症反应减轻、细胞铁死亡减少;而TMEM16A过表达小鼠则相反。(3)CO-IP实验证明TMEM16A与GPX4相互作用并诱导其泛素化和降解,从而加剧肝细胞铁死亡。(4)截短TMEM16A与GPX4的结合部分逆转了TMEM16A在肝脏I/R损伤中的恶化作用。结论:我们的研究结果表明,TMEM16A是肝脏I/R损伤的关键介导因子,通过促进GPX4依赖的铁死亡加剧肝脏I/R损伤。因此,TMEM16A-GPX4相互作用和GPX4泛素化在TMEM16A调控的肝I/R损伤中是必不可少的,这表明阻断TMEM16A-GPX4相互作用或抑制肝细胞中的TMEM16A可能是治疗急性肝损伤的有前途的治疗策略。