目的:实验观察IgAN小鼠相较正常小鼠肾间质内TCs数量及形态结构变化;初步探讨以“补肾荣络、消瘀通络”为组方原理的强肾合剂对IgAN小鼠的疗效评价以及对肾间质中TCs的保护修复作用。材料与方法:1.观察IgAN小鼠肾间质内TCs变化情况6周龄清洁级别BALB/c小鼠24只,雌雄各半,随机分为2组:空白组(共12只),模型组(共12只),以BSA+LPS+CCL_4的方式建立IgAN小鼠模型,造模持续8周并于第9周留取尿液、血液和肾脏标本。CBB法检测各组小鼠尿蛋白浓度;HE染色法在光镜观察各组小鼠肾小球系膜细胞及基质变化;IF法观察各组小鼠系膜区IgA沉积情况以及各组小鼠肾间质TCs数量的变化;TEM法对比观察各组IgAN小鼠肾间质TCs与TPs超微结构的变化。2.探究强肾合剂对IgAN小鼠肾间质TCs保护修复作用6周龄清洁级别BALB/c小鼠48只,雌雄各半,随机分为4组:空白组、模型组、中药组、对照组,每组12只。造模8周后空白组及模型组予以生理盐水灌胃;中药组予以强肾合剂灌胃;对照组予以替米沙坦水溶液灌胃。灌胃8周并于第9周留取尿液、血液和肾脏标本,HE染色观察各组小鼠肾小球系膜细胞及基质变化;ELISA法用以检测各组小鼠ACR、SCr及BUN;IF法检测各组小鼠肾间质TCs数量;TEM法观察各组小鼠肾间质TCs超微结构改变;WB检测用药前后各组小鼠肾脏CD34、CD117、Col4表达水平的变化。结果:1.IgAN小鼠造模结果:造模结束后,免疫荧光实验下可见模型组小鼠系膜区出现IgA沉积,尿蛋白定量结果显示模型组尿蛋白水平较空白组明显升高(P<0.01),HE染色后电镜观察下可见小鼠肾小球系膜细胞增殖以及系膜基质增多,综上结果提示造模成功。2.HE染色实验结果:HE染色可见模型组小鼠相较空白组小鼠肾小球系膜细胞增殖和系膜基质增多,肾小管扩张及不同程度的淋巴细胞浸润,部分可见肾小管萎缩或肾小球节段硬化。而药物干预后中药组及对照组相较于模型组系膜细胞和基质增生减少,间质病变减轻,无明显的炎性改变,中药组与对照组间对比观察无显著性差异。3.IF实验结果:与空白组相比,模型组小鼠肾间质CD34/CD117免疫荧光染色阳性的TCs数量明显减少(P<0.01);经药物干预后,与模型组相比,中药组及对照组小鼠肾间质TCs数量增加(P<0.01),其中中药组相较于对照组TCs数量增加更为显著(P<0.05)。4.TEM实验结果:各组小鼠肾间质TCs具有较小的胞体及较大的胞核,细胞核周围的细胞质较少,细胞质内含有较为丰富的线粒体、内质网等细胞器,TPs呈现念珠状结构,与邻近的组织沟通连接,周围可见细胞外囊泡。相较于空白组,模型组小鼠肾间质TCs及TPs数量及细胞层数减少,TCs胞内囊泡变多,胞质内细胞器变少。经药hepatic sinusoidal obstruction syndrome物干预后,与模型组相比,中药组及对照组小鼠肾间质TCs及TPs细胞层数、胞外囊泡、细胞器数量增加,胞内囊泡数量减少,中药组与对照组间观察对比无显著性差异。5.ELQ-VD-Oph IC50ISA结果:与空白组相比,模型组ACR、SCr、BUN水平明显增高(P<0.01)。经过药物干预后,与模型组比,中药组及对照组ACR、SCr、BUN水平明显下降(P<0.01),其中中药组相较于对照组降低更为明显(P<0.05)。6.WB实验结果:相较于空白组,模型组小鼠肾间质CD117、CD34表达水平明显降低(P<0.01),Col4表达水平明显升高(P<0.01)。药物干预下相较于模型组,中药组、对照组小鼠肾间质CD117、CD34表达水平增加(P<0.01),其中中药组增加更为明显(P<0.05);Col4表达水平降低且与CD117、CD34互为负相关,其中中药组下降更为显著selleck BMS-907351(P<0.05)。结论:1.IgAN小鼠肾间质存在TCs数量减少及形态结构损伤。2.强肾合剂可以改善IgAN小鼠肾脏的结构和功能,增加IgAN小鼠肾间质TCs数量,修复IgAN小鼠肾间质TCs形态结构损伤。