背景:急性病毒性心肌炎(acute viral myocarditis,AVMC)目前缺乏具有高特异度及敏感度的血清检测方法,另外,AVMC的分子调控机制尚未完全阐明。近些年,多项研究证明了外泌体及微RNA(micro RNA,miRNA)与多种心血管疾病的发生发展密切相关,但鲜有研究报道外泌体miRNA在AVMC中的诊断价值及生物功能。目MLN4924浓度的:通过检测血浆外泌体miRNA在AVMC患者与健康对照(Healthy Control,HC)之间的差异性表达并进行功能分析,初步探讨外泌体miRNA在AVMC中的诊断价值及潜在的分子生物学功能。方法:1、收集9例于2021年7月-2023年3月就诊于青岛大学附属医院的AVMC患者的病历资料及外周血标本,另外采集9例HC外周血标本,AVMC诊断标准参考我国1999年急性病毒性心肌炎诊断标准(沿用至今)。2、外周血离心分离血浆后,超速离心分离血浆外泌体,提取外泌体中miRNA。3、根据测序要求挑选临床症状典型的4例实验组及4例对照组,利用RNA高通量测序技术检测血浆外泌体中miRNA在AVMC患者及HC的表达情况,应用R语言的limma包对外泌体miRNA的表达情况进行分析,以P值<0.05,log_2(Fold Change)绝对值>2为截断值筛选具有差异性表达的miRNA,绘制火山图、热图。4、通过GO、KEGG功能分析预测外泌体中差异性表达的miRNA的潜在分子、生物功能及相关信号通路。利用Target Scan、miRTar Base、miRWalk、miRDB等基因数据库对外泌体中差异性表达miRNA的靶基因进行预测并绘制miRNA-靶基因共表达网络。5、关键miRNA的验证,选取外泌体中表达上调及下调的miRNA各3个,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative ML intermediatereal-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)方法对9例AVMC及HC的血浆外泌体miRNA表达量进行检测从而验证测序结果。结果:1、转录分析结果表明AVMC患者与HC相比较,血浆外泌体中具有28种差异性表达的miRNA,其中14种上调,14种下调。2、GO分析提示外泌体中差异性表达的miRNA可能与β-连环蛋白结合、DNA转录活动、RNAPS-341浓度聚合酶、泛素连接酶、组蛋白结合、细胞连接等分子、生物功能相关,KEGG分析结果表明差异性表达的miRNA可能与PI3K-Akt、Fox O、P53、MAPK、Wnt等信号通路相关。3、根据多种基因数据库对miRNA的靶基因进行了预测,METTL7A、NRIP1、CACNB2、RAB5C、SUGT1、UTP18是多种miRNA的共同靶点。4、qRT-PCR验证结果示hsa-miR-548a-3p表达上调,而hsa-miR-500b-5p表达下调,与测序结果一致。结论:1、血浆外泌体hsa-miR-548a-3p、hsa-miR-500b-5p可能是诊断AVMC的潜在生物标志物。2、外泌体miRNA可能通过与靶基因结合从而影响基因表达,直接或间接影响到β-连环蛋白、DNA转录活动、泛素连接酶、表观遗传、PI3K-Akt、Fox O、P53、MAPK、Wnt等生功能及信号通路从而参与AVMC的发病机制。