背景血清游离轻链(FLCs)的分析对克隆增殖性疾病的诊断和治疗具有重要临床意义。单克隆免疫球蛋白(M蛋白)的定量是通过划定血清蛋白电泳(SPE)区域常规进行的。然而,β迁移的M蛋白的定量受到非免疫球蛋白重叠的干扰。毛细管电泳上的免疫抑制(ISUB)是目前用于定性减去(从而突出)血清中免疫球蛋白同型的方法,从而减Q-VD-Oph生产商少正常血清蛋白的干扰。IgG3是增生性肾小球肾炎患者中最常见的单克隆免疫球蛋白沉积类型,其表达水平可能会显著增加,从而导致病情加重。目的本研究比较临床样本中单克隆和多克隆FLCκ和λ检测的性能差异,并开发了一种定量的免疫吸附(qIS)方法,对传统的ISUB进行了方法学扩展。同时本文还描述了一个仅有单克隆免疫球蛋白轻链沉积selleck合成的PGNMID系列(PGNMID-轻链)。材料和方法(1)选取2021年3月-10月期间在我院住院的患者3213例作为疾病组(血清总蛋白>85g/L或血清白蛋白/球蛋白(A/G)比例倒置或血清球蛋白>40g/L);另选择血液内科明确诊断的24例多发性骨髓瘤患者作为阳性对照组;随机收集60岁及以上参加健康体检样本200例作为正常对照组,其中160例为参考区间建立队列,40例为参考区间验证队列。使用BN ProSpec系统(西门子)上的Freelite和N Latex测定受试者血清FLC,并进行分析;FLC结果与蛋白电泳、免疫固定、C反应蛋白和估算肾小球滤过率(eGFR)的数据相结合,以评估性能。(2)从3213例疾病组中选取3个有β区M蛋白的患者的样本进行稀释,对每个稀释后的样本进行SPE和ISUB。将ISUB电泳痕迹和所涉及的ISUB同型减压痕迹之间的差异可视化,以区分M蛋白和本底多克隆免疫球蛋白。计算M蛋白对β区的贡献,并应用于β区蛋白浓度,产生定量的M蛋白浓度,同时尽量减少非免疫球蛋白或多克隆免疫球蛋白的污染。(3)分析患者的临床数据、查阅病历、跟踪患者诊疗情况,从3213例疾病组中选取15例PGNMID-LC病例,并通过光学显微镜、荧光染色、电镜等确定PGNMID-LC的临床、免疫病理特征和结果。结果(1)观察到Freelite和N Latex测定FLC两种检测方法之间的一致性较差,包括恒定偏差和比例偏差以及相关性差。与Freelite测定的FLC κ/λ比值结果不同,N Laautoimmune cystitistex测定不受eGFR估计的肾功能损害的影响。用Freelite测定法,98.0%没有单克隆免疫球蛋白血症的对照组显示κ/λ比值高于标准诊断范围或肾脏诊断范围的中位数。(2)以25%的误差为质量目标,确定可测量范围跨越了测试的8.3 g/L(最大浓度)到0.4 g/L。qIS和预期的M-蛋白之间的Passing-Bablok回归产生了 1.05的斜率(95%CI,0.93-1.10),r2=0.99。(3)15名患者表现为肾炎或肾病综合征,其基础血液病是单克隆基因组病(n=10)或多发性骨髓瘤(n=5)。通过血清和尿液免疫固定电泳,分别有73.3%和73.0%的患者发现了单克隆免疫球蛋白,82.0%的患者血清游离轻链异常,86.7%的患者可检测到骨髓浆细胞克隆。肾脏活检显示大多数病人表现为膜性增生的模式。经过免疫荧光,发现沉积物主要存在于肾小球,其结构组成以局限性轻链和C3为主,在电子显微镜下可见颗粒状,并可以在内皮、系膜和上皮观察到。通过随访观察,我们发现,在接受血浆细胞定向化疗的九名患者中,五名患者出现肾功能不全。结论(1)与Freelite测定不同,用N Latex测定分析的κ/λ比值不受肾衰竭的影响。两种方法都显示出可接受的性能,但它们的相关性较低。(2)qIS有望在比传统SPE方法低一个数量级的浓度下对β迁移的M-蛋白进行定量,从而可以更早地检测到M蛋白的增加或减少。(3)PGNMID-轻链与PGNMID-IgG的区别在于可检测到的致病性浆细胞克隆的频率更高。