Author: admin

目的:本研究以糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)临床患者、糖尿病肾病模型小鼠和人肾小管细胞等为研究对象,探讨发育及DNA损伤反应调节基因1(regulated in development and DNA damage responses1,REDD1)在糖尿病肾病中的作用及可能机制,并通过敲低REDD1改善糖尿病肾病肾小管细胞凋亡、转分化及脂质沉积的情况,为进一步阐明糖尿病肾病的发病机制和探索糖尿病肾病潜在的治疗靶点提供实验依据。方法:1.观察REDD1在糖尿病肾病患者和小鼠肾组织的表达情况及意义。(1)REDD1在糖尿病肾病患者肾组织的表达情况及意义。收集2017年1月～2019年10月在河北医科大学第二医院肾内科住院,经病史采集、临床化验室检查及肾穿刺活检病理学诊断为糖尿病肾病患者40例。血糖正常的肾脏肿瘤患者10例作为对照组。收集所有患者的详细临床资料,包括年龄、性别、身高、体重、病程、血压、服药史,同时留取血标本检测患者临床指标。所有的肾组织标本经过脱水,石蜡包埋,切片后进行常规病理染色,以及免疫组织化学检测REDD1的表达情况。油红O染色观察糖尿病肾病患者肾组织内脂滴沉积情况。TUNEL染色观察糖尿病肾病患者肾组织内细胞凋亡情况。分析糖尿病肾病患者肾组织内REDD1表达情况与细胞凋亡和脂质沉积的关系。(2)REDD1在糖尿病肾病小鼠肾组织的表达情况及意义。利用16周C57BL/ks背景的db/db小鼠和同样背景的同窝对照db/m小鼠。采用免疫组织化学的方法检测REDD1在各组小鼠肾组织的表达情况。油红O染色观察小鼠肾组织内脂滴沉积情况。TUNEL染色观察小鼠肾组织内细胞凋亡情况。分析小鼠肾组织内REDD1表达情况与细胞凋亡和脂质沉积的关系2.采用注射腺病毒的技术将C57BL/ks小鼠REDD1基因敲低。实验分组为:db/m小鼠8只、db/db小鼠24只随机分为三组:db/db组、db/db+空载病毒对照组(db/db+B)、db/db+REDD1sh RNA腺病毒AAV9注射组(db/db+AV)。Western blot检测凋亡相关的蛋白(Bax、Bcl-2和Cleaved-Caspase 3)、氧化应激水平(Nox4)、脂肪酸合成相关蛋白(SREBP-1、ACC和FASN)、脂肪酸β氧化的相关蛋ICI 46474化学结构白(PPARα、ACOX1和CPT1)、上皮细胞转分化相关蛋白(α-SMA和E-cadherin)的表达水平。免疫组化检测各组小鼠肾脏Bax、Bcl-2、Cleaved-Caspase 3、SREBP-1、FASN、ACC、PPARα、ACOX1、CPT1的定位和表达。油红O染色方法检测各组小鼠脂质沉积情况。3.HK-2细胞为实验对象,高浓度葡萄糖孵育HK-2细胞6、12、24、48和72小时。细胞分三组:正常浓度葡萄糖组(NG)、高渗透压组(M)和高浓度葡萄糖组(HG)。Western blot、RT-q PCR和细胞免疫荧光检测REDD1在HK-2细胞内蛋白和m RNA的表达水平及定位。转染REDD1si RNA且高浓度葡萄糖刺激HK-2细胞48小时后开展实验。实验分组为:正常浓度葡萄糖组(NG)、高浓度葡萄糖组(HG)、高浓度葡萄糖+空载质粒对照组(HG+C)和高浓度葡萄糖+REDD1 si RNA转染组(HG+si REDD1)。TUNEL检测各组细胞凋亡情况。DCFH-DA和Mito SOX染色通过激光共聚焦显微镜和流式细胞仪检测ROS的水平。油红O检测细胞内脂质沉积情况。Western blot检测细胞凋亡相关蛋白(Bax、Bcl-2、Cleaved-Caspase 3)、氧化应激水平(Nox4)、脂肪酸合成相关蛋白(SREBP-1、ACC和FASN)、脂肪酸β氧化的相关蛋白(PPARα、ACOX1和CPT1)、上皮细胞转分化相关蛋白(α-SMA和E-cadherin)的表达。免疫荧光检测REDD1、SREBP-1、CPT1、α-SMA和E-cadherin的表达水平。RT-q PCR检测REDD1、Bax、Bcl-2、Cleaved-Caspase 3、α-SMA和E-cadherin m RNA的表达水平。在倒置显微镜下观察各组HK-2细胞的形态。结果:1.REDD1在糖尿病肾病患者、小鼠和HK-2细胞的表达及意义(1)免疫组化显示:REDD1在糖尿病肾病患者和db/db小鼠肾小管细胞中表达均增多。Western blot及RT-q PCR结果显示,高糖可以刺激REDD1表达增多,并且表现为时间依赖性。(2)REDD1的表达增多与糖尿病肾病患者和db/db小鼠血Scr、TC和TG均呈正相关。REDD1的表达增多与糖尿病肾病患者血β2MG和cystatin-C呈正相关。(3)medial rotating kneeREDD1的表达增多与糖尿病肾病患者和db/db小鼠肾组织凋亡、纤维化和脂质沉积有相关性。REDD1的表达增多与HK-2细胞凋亡、转分化和脂质沉积有相关性。2.敲低REDD1对糖尿病肾病小鼠和高浓度葡萄糖诱导HK-2细胞凋亡及转分化的影响及作用机制(1)免疫组化及Western blot结果显示敲低REDD1可以下调糖尿病肾病小鼠Bax和Cleaved-Caspase 3的表达,而Bcl-2的表达上调。高浓度葡萄糖刺激的HK-2细胞,转染REDD1 si RNA可以减少细胞的凋亡数目,并且减少Bax/Bcl-2蛋白比例和下调Cleaved-Caspase 3的表达水平。(2)Western blot及免疫组化结果显示:与db/db小鼠相比,REDD1敲低糖尿病肾病小鼠α-SMA的表达下降,E-cadherin的表达升高。HK-2细胞的实验结果与糖尿病肾病小鼠的结果相一致。(3)REDD1si RNA显著降低高浓度葡萄糖刺激下HK-2细胞Nox4的表达和ROS的产生。(4)抗氧化药物(NAC或Tempol)可以改善高浓度葡萄糖诱导的HK-2细胞REDD1表达增加。3.REDD1在糖尿病肾病肾脏细胞脂质代谢紊乱中的作用及机制(1)在REDD1敲低的糖尿病肾病小鼠肾脏内脂滴蓄积减少且SREBP-1、ACC和FASN表达减少。(2)PPARα、ACOX1和CPT1的表达在REDD1敲低的糖尿病肾病小鼠肾脏中升高。(3)REDD1 si RNA可以减少高浓度葡萄糖刺激的HK-2细胞内脂滴聚集,并下调SREBP-1、ACC和FASN的水平。(4)REDD1 si RNA可以增加高浓度葡萄糖刺激的HK-2细胞内PPARα、ACOX获悉更多1和CPT1水平。(5)REDD1基因敲低影响糖尿病肾病小鼠内MAMs和线粒体内ATP的生成,此外高浓度葡萄糖诱导的HK-2细胞转染REDD1 si RNA后线粒体功能受损得到改善。(6)REDD1si RNA可以抑制足细胞内ChREBP表达。敲低足细胞ChREBP基因可以下调ACC和FASN的水平;增加PPARα、ACOX1和CPT1水平。结论:1.在糖尿病肾病患者和小鼠的肾组织中均发现REDD1在肾小管细胞表达增加,同时高糖培养的HK-2细胞中REDD1明显升高,提示REDD1可能参与了糖尿病肾病肾小管上皮细胞损伤过程。2.敲低REDD1可缓解糖尿病肾病肾小管细胞凋亡和转分化。这一过程可能是REDD1通过与TXNIP结合形成复合体引起氧化应激激活导致的。3.REDD1可能通过改变MAMs和线粒体功能,及调节ChREBP引起糖尿病肾病肾脏细胞脂质沉积。

【目的】检测大疱性类天疱疮(BP)患者血清中与过度免Persian medicine疫活化密切相关的34种细胞因子,研究分析BP患者血清中这34种细胞因子与正常对照组间是否存在显著差异;解析BP患者过度免疫活化相关细胞因子与BP患者的病情严重程度、临床此网站特征和实验室检查结果的相关性。【方法】收集34例BP患者治疗前(未使用激素和免疫抑制剂)和34例正常对照的临床资料和血样;采用luminex多因子免疫检测方法检测患者治疗前及健康对照血清中MIP-1α、SDF-1α、IL-27、IL-1β、IL-2、IL-4、IL-5、IP-10、IL-6、IL-7、IL-8、IL-10、Eotaxin(人嗜酸性粒细胞趋化因子)、IL-12p70、IL-13、IL-17A、IL-31、IL-1RA、RANTES、IFN-γ、GM-CSF、TNF-α、MIP-1β、IFN-α、MCP-1、IL-9、TNF-β、GRO-α、IL-1α、IL-23、IL-15、IL-18、IL-21、IL-22水平,应用统计学比较分析BP患者治疗前与健康对照之间血清中上述细胞因子水平是否存在差异;上述细胞因子水平、BP面积指数评分(bullous pemphigoid disease area index,BPDAI)、BP180、嗜酸性粒细胞、中性粒细胞之间是否存在相关性。【结果】1.BP患者组治疗前和对照组血清MIP-1α、SDF-1α、IL-27、IL-1β、IL-2、IL-4、IL-5、IP-10、IL-6、IL-7、IL-8、IL-10、Eotaxin、IL-12p70、IL-13、IL-17A、IL-31、IL-1RA、RANTES、IFN-γ、GM-CSF、TNF-α、MIP-1β、IFN-α、MCP-1、IL-9、TNF-β、GRO-α、IL-1α、IL-23、IL-15、IL-18、IL-21、IL-22水平,经统计学比较发现,BP患者组治疗前和健康对照组血清中SDF-1α、IL-27、IL-1β、IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、IL-10、IL-12p70、IL-13、IL-17A、IL-1RA、RANTES、IFN-γ、GM-CSF、TNF-α、MIP-1β、IFNCompound 3体内-α、IL-9、GRO-α、IL-1α、IL-23、IL-15、IL-18、IL-21的平均水平之间的差异具有统计学意义。其中患者组IL-27、IL-1β、IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、IL-10、IL-12p70、IL-13、IL-17A、IL-1RA、IFN-γ、GM-CSF、TNF-α、IFN-α、IL-9、IL-1α、IL-23、IL-15、IL-18、IL-21水平显著高于健康对照组水平;患者组SDF-α、RANTES、MIP-β、GRO-α显著低于健康对照组水平。P值均<0.05。2.对BP组显著性有差异的25种细胞因子进行相关性分析IL-1RA水平与BPDAI总分之间存在正向弱相关(r=0.350,P=0.042);患者血清中IL-13、IL-9水平与患者红斑丘疹程度间存在负向弱相关(r=-0.372,P=0.030;r=-0.352,P=0.041);IL-17A与嗜酸性粒细胞水平间存在负向弱相关(r=-0.397,P=0.020);中性粒细胞水平与水疱糜烂及BPDAI评分间存在正相关(r=0.520,P=0.002;r=0.370,P=0.031)。与BP180水平做相关性分析,未发现存在有明显的相关性。【结论】1、BP患者外周血清中IL-27、IL-1β、IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、IL-10、IL-12p70、IL-13、IL-17A、IL-1RA、IFN-γ、GM-CSF、TNF-α、IFN-α、IL-9、IL-1α、IL-23、IL-15、IL-18、IL-21水平显著升高。2、BP患者外周血清中IL-1RA与疾病严重程度呈正相关,IL-13、IL-9与红斑丘疹评分呈负相关,中性粒细胞与水疱糜烂、BPDAI总分呈正相关。3、Th1、Th2、Th17、Th9相关细胞因子在BP起病中均起作用,特别是IL-1、IL-13、IL-9、IL-17A发挥重要作用。

目的 探讨重症肌无力患者的服药信念现状并分析其影响因素，为医护人员制订针对性的干预措施提供参考。方法 选取2021年7月至2022年3月广州中医药大学第一附属医院就诊的重症肌无力患者145例，采用服药信念量表(BMQ)进行调查，运用多元线性回归分析相关影响因素。结果 145例患者服药信念得分为(4.17±1.23)分，必要性信念得分为(19.52±3.45)分，顾虑信念得分为(18.29±4.26)分。必要性信念得分与顾虑信念得分比较差异有统计学意义(P<0.05);文化程度、经济负担、病程、服药时长、复发住院次数、用药不当诱发加重对重症肌无力患者服药信念得分有影响(P<0.05);病程、服药时长、复发住院次数对重症肌无力患者的服药必要性信念得分有影响(P<0.05);经济负selleck NMR担对重症肌无力患者的服药顾虑信念得分有影响(P<0.05)。结论 重症肌无力患者服药信念处于较低水平，复发住院次数、selleckchem经济负担是影响重症肌无力患者服药信念得分的独立危险因素；复发住院次数是服药必要性信念得分的独立危险因Drug incubation infectivity test素。

目的探讨胆汁中代谢产物吲哚-3-乙酸(Indole-3-acetic acid,IAA)对胆管癌的辅助诊断价值。方法通过收集2020年12月-2022年12月在我院就诊的51例患者的临床资料,其中胆管癌患者34例,胆道结石患者17例。收集这51名患者的胆汁和血清,其中胆汁样本通过术前行经皮经肝胆道引流(percutaneous transhepatic biliary drainage,PTBD)或术中抽取胆汁获取,利用LC-MS代谢组学技术对胆汁中代谢产物进行分析,测定胆汁中差异代谢物IAA与胆汁和血清中碳水化合物抗原19-9(Carbohydrate Spatiotemporal biomechanicsantigen,CA19-9)水平,利用统计学分析推断其FUT-175抑制剂对胆管癌的辅助诊断价值。结果1.胆汁中CA19-9及代谢物IAA的表达水平可显著区分胆管癌与胆道结石疾病患者,对于胆管癌的诊断价值明显高于胆道结石疾病患者,差异有统计学意义(P<0.05)。2.胆管癌组CA19-9在胆汁中的水平显著高出血清,并且二者不同具有统计含义(P<0.05)。3.胆汁中CA19-9、代谢物IAA测定的灵敏度为64.70%、94.10%,特异度为88.20%、94.10%,均明显高于血清中检测的灵敏度(68.1%)和特异度(70.获悉更多6%),差异有统计学意义(P均<0.05)。结论1.CA19-9在胆汁和血清中表达水平可以高效地辅助确诊胆管癌和胆道结石疾病,而且在这两种情况下,CA19-9在胆汁中的表达水平更有利于确诊胆管癌。2.代谢产物IAA在胆汁中表达水平对比CA19-9在胆汁和血清中表达水平更有利于确诊胆管癌3.胆汁中CA19-9和IAA的表达水平显著优于血清中CA19-9,这有助于进一步提高胆管癌的诊断准确性。

目的 基点击此处于网络药理学方法探讨运脾药对“苍术-薏苡仁”治疗儿童腺样体肥大(adenoidal hypertrophy, AH)的药理机制。方法 筛选“苍术-薏苡仁”的活性成分及相关靶点，构建“药物-成分-靶点”可视化网络图；检索儿童AH疾病相关靶点，构建“药物-疾病”交集靶点PPI网络；对核心靶点进行富集分析，并构建“靶点-通路”网络；Western blot法检测不同组别小鼠脾组织中目标靶点蛋白表达，验证苍术酮通过HIF-1α-sumoylation调节炎症因子的表达。结果 得到“苍术-薏苡仁”药物靶点71个，儿童AHMedical organization疾病相关靶点337个，“药物-疾病”交集靶点30个；“苍术-薏苡仁”主要活性成分为豆甾醇、苍术酮等，其参与的生物学过程有管形态形成、对激素的反应等，涉及的细胞成分有膜筏、转录调节因子复合物等，相关靶点功能主要富集于转录因子结合、蛋白质结构域特异性结合等，其涉及的主要信号通路有HIF-1信号通路、VEGF信号通路等；动物实验结果显示苍术酮治疗组SUMO-1、HIselleckchem DorsomorphinF-1α、VEGF及VEGF-R蛋白表达量均较模型组下调(P<0.05)。结论 “运脾法”治疗儿童AH是通过多成分、多靶点、多通路实现的，主要从抗炎、免疫调节、抗氧化等方面发挥其治疗儿童AH的作用。

目的 采用网络药理学探究芍药甘草汤治疗慢性萎缩性胃炎（CAG）的作用机制。方法 利用中药系统药理学数据库与分析平台（TCMSP）数据库、文献挖掘整理芍药甘草汤化学成分；利用GeneCards、OMIM、DrugBank、TTD数据库收集CAG的相关靶点；利用Venn图筛选交集靶点，由Cytoscape软件构建“活性成分-疾病靶点”网络，由String数据库和Cytoscape软件构建蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）网络；利用Metascape数据库进行GO功能富集分析和KEGG通路富集分析；利用AutoDock软件进行分子对接。结果 筛选出芍药甘草汤有效活性成分103个，selleckchem与CAG相关靶点76个，重要活性成分包括槲皮素、山奈酚、柚皮素、甘草查尔酮A，核心靶点包括丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1(AKT1)、肿瘤抑制因子p53(TP53)、肿瘤坏死因子（TNF）等，KEGG通路主要富集于白细Roxadustat作用胞介素-17(IL-17)、TNF、缺氧诱导因子1(HIF-1)等通路。分子对pathologic Q wave接结果显示化合物与关键靶点有较好的结合能力。结论 芍药甘草汤可通过多成分、多靶点、多通路发挥对CAG的治疗作用。

<正>阿尔茨海默病（AD）是FUT-175分子量最常见的痴呆形式，也是最常见的神经退行性疾病。肠肠道菌群的变化能够引起多种症状和疾病，除了常见的各种肠道疾病外，甚至还能对中枢神经系统产生影响。近person-centred medicine年来，科学家提出了脑-肠道-肠道微生物轴（脑肠轴）的概念，目前这一概念的研究仍处在比较初级的阶段，但至少包括神经、免疫、内分泌和代谢等多条途径。本文旨在总结和讨论当前发现，以阐明肠道微生物群在AD发展中的作用。阿尔茨海默病（AD）是最常见的神经退行性疾病Microbiology抑制剂，也是老年人痴呆的最常见原因。我国65岁以上老年人群中，阿尔茨海默病的患病率达5.9%，目前患者约1 250万人，占世界患病人群的25%。随着我国人口老龄化的加重，这一疾病的患病人数将在可见的未来急剧增加，严重危害着我国人民的身心健康，为家庭和社会带来巨大的负担。

细菌和病毒的传染对人类的生存环境造成了巨大的威胁,同时传统的石油基材料对环境污染巨大,发展绿色安全的生物基材料的呼声越来越高。纤维素是在自然界中广泛分布,储量巨大的多糖,从很早之前就被人们广泛使用。但纤维素材料本身的多糖结构容易沾染细菌,成为病毒滋生的温床,变成疾病传播的载体,因此许多行业对纤维素材料的抗菌性能提出了更高的要求。本论文以制备的有机抗菌剂赖氨酸接枝N-卤胺和大麻纤维为原料,通过简单温和的席夫碱反应制备了新型大麻纤维材料。该大麻纤维材料结合了大麻纤维、氨基酸型希夫碱和N-卤胺等多种灭菌方法,不同灭菌方法之间的协同作用大大提高了材料的selleck抗菌性medically ill能,降低了可能出现的细菌耐药性。基于卤胺席夫碱型大麻纤维材料及其薄膜复合材料的制备和性能研究开展了以下两方面工作:(1)赖氨酸接枝N-卤胺席夫碱型大麻纤维材料的制备和性能的研究。为了制备出抗菌手段多样,绿色环保的纤维素抗菌材料,本章以赖氨酸和3-氨基乙基-5,5-二甲基海因(ADMH)制备了赖氨酸接枝N-卤胺(Ly-ADMH)。以双醛大麻纤维(DAH)和Ly-ADMH为基础,通过希夫碱反应制备了赖氨酸接枝N-卤胺席夫碱型大麻纤维(DAH-Ly-ADMH),氯化后得到了大麻纤维抗菌材料(DAH-LyADMH-Cl)。利用FT-IR,TG,XPS,SEM,XRD等方法对材料的的结构与形貌进行了表征,同时抗菌实验表明,该材料在5 min内MLN4924浓度可完全灭活金黄色葡萄球菌和大肠杆菌,通过设计赖氨酸接枝N-卤胺与大麻之间形成的席夫碱的结构设计,使材料结合了多种原料的杀菌手段,具有高杀菌效果、优异的低毒性和生物相容性的材料有效解决了纤维素材料缺乏抗菌能力的问题。(2)改性双醛纤维素薄膜复合材料的制备和性能的研究纤维素在自然界中储量巨大,绿色环保,因此被广泛应用在食品包装,医疗卫生等行业。但纤维素难以溶解于一般的有机溶剂,大多数纤维素薄膜因此成型困难,成本高,产率低。本章节通过氧化作用制备高醛基含量的双醛纤维素,溶解在热水中后通过简单的共混加入DAH-Ly-ADMH,获得了具备良好抗菌性能的纤维素复合薄膜。通过紫外光谱,万能试验机,DMA,红外光谱等研究了他的物理和化学性能,抗菌实验表明薄膜能在5min内杀灭99%的细菌并且具有良好的储存稳定性与再生性能,为绿色抗菌薄膜的制备提供了一种有效可行的方法,在食品包装,医疗卫生方向具有广阔的应用潜力。

血脑屏障(blood-braSBE-β-CD MWin baMalaria immunityrrier, BBB)由脑微血管内皮细胞及包绕内皮细胞的基膜、周细胞和星形胶质细胞的足突构成，它将血液与脑组织分隔开来，从而维持神经功能包括神经环路、突触连接和重塑等微环境的稳定。BBB稳态失衡与包括神经退行性疾病在内的许多中枢神经系统疾病有关，但目前BBB稳态维持与失衡的机制尚不清楚。Axl抑制剂星形胶质细胞作为BBB的组成成分，也是神经血管单元中联系神经元与脑微血管的枢纽，在BBB发育特别是BBB稳态维持中起重要作用。本文在简要介绍BBB的发育过程之后，综述了星形胶质细胞诱导BBB发育、成熟及其在BBB稳态维持中的作用和机制的研究进展，并指出了与BBB稳态失衡有关的A1型星形胶质细胞异质性的概念，以期为深入研究BBB稳态维持机制及加深理解BBB稳态失衡诱发神经退行性疾病提供新启示。

目的:探究2型糖尿病肾病(DN)患者外周血白细胞介素-4(IL-4)、γ-干扰素(INF-γ)、纤溶抑制物(TAFI)表达及其与肾小球滤过功能的相关性。方法:比较分析糖尿病肾病组(n=102)与健康组(n=54)的IL-4、INF-γ及TAFI表达水平；将糖尿病肾病组分为3组，比较分析3组患者的IL-4、INF-γ及TAFI表达水平；采用Spearman分析IL-4、INF-γ及TAFI表达水平与2型DN患者肾小球滤过功能的相关性。结果:糖尿病肾病组IL-4、INF-γ及TAFI水平高于健康组(P<0.05);不同肾功能损伤程度患者IL-4、INF-γMS-275体内及TAFI比较，差异有统计学意义(P<0.05);Spearman相关性分析结果显示，IL-4与24 h UmAlb负相关(Phttps://www.selleck.cn/products/pexidartinib-plx3397.html<0.05),与eGFR、Scr无相关性(P>0.05);INF-γ与eGFR负相关，与Scr、24 h UmAlb正相关(P<0.05);TAFI与eGFR负相关，与Scr、24 h UmAlb正相关(P<0.05)。结论:2型DN患者外周血IL-4、INF-γ及TAFI表达Immediate implant水平与患者的肾小球滤过功能存在相关性，可通过检测外周血IL-4、INF-γ及TAFI的表达水平为2型DN患者肾小球滤过功能的评估和临床治疗提供参考。