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完整的血管内皮细胞对血管的正常功能至关重要。由于化学暴露或物理损伤(如血管成形术或支架植入)会导致血管损伤,原有内皮细胞的迁移和增殖是损伤修复的必要条件。在应激刺激或细胞受损后HMGB1会被释放到细胞外,作为损伤相关分子模式,参与炎症反应,迁移,增殖以及组织再生。HMGB1可以BAY 73-4506分子量作为促血管生成因子,通过刺激血管内皮细胞的萌发和迁移来促进血管生成进而促进损伤的修复。VEGFA以及FGF-2可以参与血管内皮的增殖,迁移以及血管化。本文针对HMGB1在血管内皮修复中对细胞迁移作用进行实验研究,主要研究内容和结论如下:(1)从脐静脉中分离HUVECs。采用胶原酶灌注消化法进行HUVECs的分离,通过细胞形态观察、细胞增殖活性检测、细胞成管能力检测以及细胞特异性children with medical complexity蛋白检测等手段对实验细胞进行鉴定。本研究成功从脐静脉中分离提取出原代细胞,细胞由起始的梭形或多边形增长为融合的卵石样;生长曲线呈“S”曲线生长,表明细胞具有良好的活性;在基质胶上细胞融合60%-80%时,形成管腔结构,具有形成血管的能力。吞噬荧光标记的乙酰低密度脂蛋白、胞内内皮细胞特征蛋白VWF以及CD31KD025使用方法,鉴定提取的细胞呈阳性,表明本研究方法提取的细胞为人脐静脉内皮细胞。(2)研究不同浓度HMGB1对HUVECs增殖以及迁移的影响。体外构建HMGB1浓度梯度,CCK-8法测定HUVECs的增殖能力、划痕创面愈合实验以及Transwell迁移小室实验测定HUVECs的迁移能力。细胞增殖实验结果显示不同浓度HMGB1对HUVECs的增殖影响差异较小。细胞划痕结果显示,创面愈合率和细胞迁移率随着HMGB1浓度的增加而逐渐增加,且Transwell小室实验显示穿过小室的细胞数量随HMGB1浓度的增加而增多。(3)研究不同浓度HMGB1对HUVECs的VEGFA和FGF-2分泌、基因以及蛋白的影响。体外构建HMGB1浓度梯度,RT-q PCR、Western Blot以及ELISA测定HUVECs中VEGFA和FGF-2的基因、蛋白以及分泌表达的影响。HUVECs胞外蛋白分泌检测结果显示,培养液中VEGFA的含量各组间变化较小,差异无统计学意义。长时间高浓度作用HUVECs时,细胞内的VEGFA基因与蛋白表达与对照组比较降低,差异具有统计学意义。各浓度HMGB1作用HUVECs均可引起细胞内FGF-2基因与蛋白表达的升高,差异有统计学意义。同一浓度HMGB1作用下48 h与12 h以及24 h相比,细胞内FGF-2基因与蛋白表达稍有降低。仅两组高浓度的HMGB1作用时,胞外FGF-2的水平会升高。本研究通过优化的酶灌注消化法,可成功提取HUVECs。HMGB1对HUVECs的增殖影响较小,不同浓度HMGB1对HUVECs的迁移能力均有促进作用,且呈浓度和时间依赖性,为寻找血管损伤后具有促进修复作用的新治疗靶点提供实验依据。

目的:探究结肠息肉内镜下切除术后迟发性出血患者内镜下的止血效果，并分析止血失败的危险因素。方法:回顾性分析南京医科大学附属江苏盛泽医院2013年1月至2021年4月收治的121例结肠息肉内镜下切除术后迟发性出血患者的临床病历资料，收集并整理患Protein Expression者的临床基数资料；患者均予以内镜下热活检钳电凝联合钛夹止血，根据患者止血术后1周大便潜血试验结局，将其分为止血成功组和止血失败组。以Logistic多因素回归分析探讨结肠息肉内镜下切除术后迟发性出血患者止血失败的危险因素。结果:121例结肠息肉https://www.selleck.cn/products/pf-03084014-pf-3084014.html内镜下切除术后迟发性出血患者中，11例(9.09%)术后再发出血，110例(9Y-27632核磁0.91%)正常止血；止血失败组合并高血脂、高血压以及凝血酶原时间延长、结肠息肉直径>1.0 cm所占比例均高于止血成功组(P均<0.05)。Logistic多因素回归分析结果显示，高血脂、高血压、凝血酶原时间延长、结肠息肉直径>1.0 cm均为结肠息肉内镜下切除术后迟发性出血患者止血失败的危险因素(P均<0.001)。结论:结肠息肉内镜下切除术后迟发性出血止血效果佳，但仍存在部分患者术后出血，其中，高血脂、高血压、凝血酶原时间延长、结肠息肉直径>1.0 cm均为止血失败的危险因素。

目的 验证跨理论模型与社会支持理论相结合在社区医生干预2型糖尿病患者饮食行为中的应用效果。方法 本研究为整群社区干预试验，对照组进行常规管理；直接支持组由社区医生对患者进行医生主导的饮食干预；间接支持组则进行医患协商的饮食干预；同时为两干预组发放了控量餐具和食物图卡。根据跨理论模型selleck LY294002自行设计调查问卷，在基线、3个月更多、6个月时进行调查。结果 在3个月和6个月时，直接支持组和间接支持组整体对糖尿病饮食益处的认知和饮食相关自我效能水平呈上升趋势，而感知到实施糖尿病饮食的障碍呈下降趋势，但只有3个月时，两干预组[直接支持组得分(13.72±2.04)分；间接支持组得分13.88±1Hepatocellular adenoma.85]与对照组[得分(12.92±2.30)分]在益处认知水平上的差异有统计学意义(P<0.001)。广义估计方程结果显示，女性、文化程度较高、知觉饮食障碍较低、饮食自我效能较高、直接支持组在6个月时，所处行为阶段更高。结论社区医生基于跨理论模型来对患者的饮食行为进行的干预，可以促进患者的决策平衡发生积极变化，并可促进患者饮食行为阶段前进，直接支持可能对患者的饮食改变帮助更大。

目的 验证跨理论模型与社会支持理论相结合在社区医生干预2型糖尿病患者饮食行为中的应用效果。方法 本研究为整群社区干预试验，对照组进行常规管理；直接支持组由社区医生对患者进行医生主导的饮食干预；间接支持组则进行医患协商的饮食干预；同时为两干预组发放了控量餐具和食物图卡。根据跨理论模型selleck LY294002自行设计调查问卷，在基线、3个月更多、6个月时进行调查。结果 在3个月和6个月时，直接支持组和间接支持组整体对糖尿病饮食益处的认知和饮食相关自我效能水平呈上升趋势，而感知到实施糖尿病饮食的障碍呈下降趋势，但只有3个月时，两干预组[直接支持组得分(13.72±2.04)分；间接支持组得分13.88±1Hepatocellular adenoma.85]与对照组[得分(12.92±2.30)分]在益处认知水平上的差异有统计学意义(P<0.001)。广义估计方程结果显示，女性、文化程度较高、知觉饮食障碍较低、饮食自我效能较高、直接支持组在6个月时，所处行为阶段更高。结论社区医生基于跨理论模型来对患者的饮食行为进行的干预，可以促进患者的决策平衡发生积极变化，并可促进患者饮食行为阶段前进，直接支持可能对患者的饮食改变帮助更大。

非洲猪瘟（ASF）是由非洲猪瘟病毒（ASFV）感染家猪或野猪而引起的一种高度接触性传染病。ASFV编码超过150种蛋白，其中大多数蛋白的功能有待鉴定。本研究旨在表达ASFV p34蛋白，并制备其单克隆抗体，为p34蛋白的功能研究提供材料。首先构建了重组原核表达质粒pET-21a-p34，将质粒转化大肠杆菌BL21（DE3）感受态细胞，经IAlpelisib IC50PTG诱导后，通过SDS-PAGE以及Western blot鉴定，结果显示，得到了可溶性表达的His-p34重组蛋白。将纯化的蛋白免疫小鼠，然后通过细胞融合以及ELISA筛选，获得了一株能够稳定分泌p34蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株。经Western blot鉴定，该抗体能够特异性识别通过转染质粒过表达的外源p34蛋白以及ASFV感染猪肺泡巨噬细胞（PAMs）表达的内源p34蛋白；免疫荧光试验表明，外源转染以及内源表达的p34蛋白均能被特异bioactive dyes性标记；免疫沉淀（IP）试验结果显示，该单克隆抗体能够特异性的结合HEK293T细胞中外源表达Dorsomorphin纯度的p34蛋白以及ASFV感染PAMs中内源表达的p34蛋白。综上所述，本研究成功制备了p34蛋白的单克隆抗体，该抗体可以用于内源性p34蛋白的鉴定，为该蛋白的功能研究奠定了基础。

纤维化疾病、肿瘤及糖尿病肾病等多种疾病在世界范围内困扰着患者，严重影响了患者的生活质量，造成了极大的经济负担。转化生长因子-β(TGF-β)/Smads信号通路在这些疾病中起着关键性的作用，TGF-β控制许多细胞功能，包括增殖、凋亡GSK J4临床试验、分化、ABT-263 IC50上皮-间充质转化(EMT)和迁移，在胚胎发生和成体组织稳态中发挥关键作用。在纤维化疾病中，TGF-β/Smads信号通路的激活使得成纤维细胞增殖分化为肌成纤维细胞，合成大量胶原蛋白，致使细胞外基质(ECM)过度沉积，导致纤维化疾病的regenerative medicine发生。在肿瘤的发生发展中，TGF-β/Smads信号通路激活后，TGF-β1高表达，诱导EMT,导致癌相关成纤维细胞(CAFs)形成，加速了肿瘤微环境(TME)的构建，促进了肿瘤的侵袭。在糖尿病肾病中，糖尿病环境增强氧化应激，诱导TGF-β1的表达，激活TGF-β/Smads信号通路，促进系膜细胞肥大和ECM积聚，降低肾小球滤过率，导致肾间质纤维化和肾小球硬化，最终发展为慢性肾功能衰竭。本文就近年来TGF-β/Smads信号通路在多种疾病中的作用机制进行了综述。

目的探讨胰蛋白酶在脓毒症大鼠血清和组织中的表达及意义。方法采用随机数字表法将雄性Wistar大鼠随机分为空白对照组、脓毒症模型组、乌司他丁干预组,每组6只。脓毒症模型组大鼠尾静脉推注脂多糖复制脓毒症模型,乌司他丁干预组大鼠复制脓毒症模型1 h后缓慢静脉推注乌司他丁50 000 U/kg。免疫印迹法检测3组大鼠空肠组织中胰蛋白酶、黏蛋白2和E-钙黏蛋白表达。检测3组大鼠血清和selleck BLZ945组织中胰蛋白酶水平、肿瘤坏死因子α(TNFα)、白细胞介素-6(IL-6)、中性粒细胞弹性蛋白酶(NE),并行相关性分析。结果脓毒症模型组大鼠血清[(73.71±9.14)ng/ml比(12.12±2.36)ng/ml]、心组织[(51.60±15.06)ng/ml比(6.39±3.53)ng/ml]、肺组织[(54.73±5.57)ng/ml比(5.24±3.08)ng/ml]、空肠组织(1.19±0.48比0.40±0.12)胰蛋白酶水平较空白对照组显著增高(P值均<0.05);脓毒症模型组的血清胰蛋白酶水平与其空肠组织的黏蛋白2、E-钙黏蛋白水平呈负相关(r值分别为-0.926、-0.954,P值均<0.05),与其血清TNFα、IL-6、NE呈正相关(r值分别为0.936、0.835、0.784,P值均<0.05)。与脓毒症模型组比,乌https://www.selleck.cn/products/MG132.html司他丁干预组胰蛋白酶[血清:(65.79±4.88)ng/ml;心组织:(26.33±12.03)ng/ml;肺组织:(28.73+14.46)ng/ml;空肠组织:0.80±0.20]、血清TNFα[(247.34±16.97)ng/L比(178.78±40.81)ng/L]、血清IL-6[(37.60±6.2organismal biology4)pg/ml比(23.30±1.55)pg/ml]水平显著下降(P值均<0.05),空肠组织黏蛋白2(0.58±0.14比0.89±0.17)、E-钙黏蛋白(0.11±0.04比0.23±0.06)表达显著增加(P值均<0.05)。结论胰蛋白酶在脓毒症大鼠血清及组织中表达明显增加,使用蛋白酶抑制剂乌司他丁可能起到肠道保护及减轻全身炎症的作用。

目的探讨精浆弹性蛋白酶(PMNE)与精液质量在男性不育中的临床意义。方法选取2017年6月至2018年12月在大连市妇女儿童医疗中心就诊的941例患者精液标本。根据世界卫生组织(WHO)第五版标准:白细胞≥ 1 × 109/L为阳性组, 白细胞 1 × 109/L为阴性组, 分析PMNE含量与白细胞的关系;将PMNE含量以600 μg/L为分界点分为炎性反应组及非炎性反应组, 分析PMNE含量与精液常规及支原体阳性率的关系;根据WHO标准将标TB and HIV co-infection本分为不育组及正常组, 分析两组间精液常selleckchem CCRG 81045规参数、PMNE含量及支原体的关系。结果阳性组PMNE显著高于阴性组[(1 823.29 ± 557.64) × 109/L比(480.60 ± 195.36) × 109/L], PMNE与白细胞呈正相关(P 0.05), 炎性反应组的精液质量降低, 支原体阳性率比非炎性反应组高[(23.7%(71/299)比11.5%(74/642)](P 0.05), 不育组的精液质量降低, PMNE和支原体阳性率均比正常组高[(1 230.89 ± 489.09) × 109/L比(596.78 ± 159.25) × 109/L、34.7%(90/259)比8.1%(55/682)](P 0.05)。结论精浆PMNE含量与白细胞有很好的相关性, 可作为评价男性生殖系统感染的指标Tofacitinib试剂;精浆PMNE含量与精液质量关系密切, 在诊断男性不育中有临床价值。

目的 通过网络药理学和生物信息学方法探究西黄丸治疗肝癌的潜在作用机制。方法 利用TCMSP、化学专业数据库和SwissADME数据库筛选西黄丸活性成分，通过SwissTargetPrediction数据库预测活性成分对应靶点，GEPIA数据库分CP-690550试剂析靶点基因在肝癌组织与正常组织的表达差异，通过DAVID数据库对差异表达基因进行GO功能和KEGG通路富集分析，借助STRING和Cytoscape3.9.0软件构建靶点蛋白相互作用网络，并筛选核心靶点；采用Kaplan-Meier Plotter数据库分析核心基因与肝癌患者预后的相关性，运用CB-Dock工具进行分子对接验证。结果 共筛选得到194个活性成分，147个差异表达靶点基因（上调靶点基因89个、下调靶点基因58个）。GO功能分析得到生物过程19个、细胞组分13个、分子功能16个。KEGG通路富集得到9条信号通路，主要涉及调控细胞周期、孕酮介导的卵母细胞成熟、细胞色素P450对外源性药物代谢、视黄醇代谢等。靶点蛋白相互作用网络及生存分析得到MAPK3、CDGenomic and biochemical potentialK1、PLK1等8个与肝癌患者预后密切相关的核心靶点基因。分子对接结果显示，洋椿苦素、桑色素、辛酸丁酯等活性成分与8个预后相关核心靶点具有较强的结合力Baf-A1生产商。结论 西黄丸中的活性成分可通过作用于MAPK3、CDK1、PLK1等肝癌预后相关靶点调节多条信号通路，发挥治疗肝癌及延长肝癌患者生存期的作用。

目的：基于网络药理学探讨补中益气汤治疗桥本甲状腺炎的作用机制。方法：以TCMSP数据库为基础，根据ADME筛选补中益气汤中黄芪、白术、人参、当归、陈皮、柴胡、升麻、甘草8味中药的主要活性成分，并以SwissTargetPrediction数据库作为补充预测相关作用靶点，通过Geimmune sensornecards、DiGSeE、DisGeNET、CTD、NCBI和MalaCards数据库获取桥本甲状腺炎相关靶点，通过Cytoscape3.selleckchem9.0软件构建“中药-成分-靶点网络”网络，并利用cytoHubba插件得到核心靶点；应https://www.selleck.cn/products/gsk126.html用STRING数据库进行蛋白质相互作用分析；依托Metascape平台进行KEGG信号通路和GO生物富集分析；最后利用CB-DOCK对成分及核心靶点进行分子对接验证。结果：补中益气汤治疗桥本甲状腺炎的核心活性成分164个，包括槲皮素、山奈酚、豆甾醇和β‐谷甾醇等；核心靶点177个，包括JUN、MAPK1、MAPK14、AKT1、STAT3和IL6等；共涉及2281个生物学过程、117个细胞组成和196个分子功能；富集通路196条，包括PI3K-Akt、MAPK、FoxO、HIF-1和TNF等信号通路；分子对接显示成分与靶点蛋白均展现了良好结合性能。结论：补中益气汤通过多种成分参与、多个靶点交互、多条通路作用治疗桥本甲状腺炎，其机制可能涉及免疫炎症反应、氧化应激、细胞凋亡等方面。