PDK1信号通路

目的 探讨骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)来源外泌体对大鼠心肌细胞系H9c2缺氧/复氧(A/R)损伤的保护作用及其分子机制。方法 构建H9c2细胞A/R损伤模型；采用电镜、Western blot鉴定BM-MSCs来源外泌体(BM-MSCs-exos);PHK26红色荧光标记外泌体并观察H9c2细胞内吞现象；采用CCK-8法检测细胞活力，EdU细胞增殖实验检测细胞增殖活性；铁死亡相关检测试剂盒测定Fe~Serine Protease抑制剂(2IACS-10759体内实验剂量+)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)含量，流式细胞测量术检测活性氧自由基(ROS)水平。结果 成功鉴定BM-MSCs-exo并观察到H9c2细胞内吞外泌体；与A/R组比较，A/R+BM-MSCs-exo组细胞活力与增殖能力得到明显改善(P<0.05);铁死亡标志蛋白GPX4、SLC7A11升高，转铁蛋白受体1(TFR1)表达降低(P<0.05); Fe~(2+)离子、MDA、ROS水平降低，GSH水平升高(P<0.05)。铁死亡诱导剂Erastin处理ephrin biology后，发现BM-MSCs-exo对H9c2细胞A/R损伤的保护作用显著降低(P<0.05)。结论 BM-MSCs-exos可减轻A/R诱导的心肌细胞系损伤，其机制可能是通过抑制心肌细胞铁死亡介导的BM-MSCs-exos。

背景:乳腺癌作为全球女性中发病率最高的癌症,严重威胁着女性的健康。而铜死亡(Cuproptosis)是一种新发现的调节性细胞死亡形式,其机制是铜离子在细胞内通过与三羧酸(Tricarboxylic Acid,TCA)循环中的脂酰化成分直接结合,导致脂酰化蛋白质聚集和铁硫簇蛋白质丢失,从而引发蛋白质毒性应激并最终导致细胞死亡。MYC是常见的致癌转录因子,与多种肿瘤密切相关,目前已经有研究表明MYC通路与铜死亡存在联系。然而联合铜死亡和MYC在乳腺癌中的预后作用仍然缺少研究。本研究通过使用生物信息学方法研究乳腺癌中与铜死亡和MYC相关的基因,构建预后模型和列线图,为乳腺癌预后预测和药物治疗提供参考。方法:基于癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库中乳腺癌表达数据,在乳腺癌样本和正常组织样本中使用DESeq2进行差异基因分析,寻找差异基因。使用单样本基因集富集分析(single-sample Gene Set Enrichment Analysis,ss GSEA)对铜死亡及MYC进行评分。使用加权基因共表达网络(Weighted Gene Co-expression Network Analysis,WGCNA)筛选出与铜死亡和MYC评分相关的基因,然后与差异基因取交集。对交集基因进行Classical chinese medicine基因本体(Gene Ontology,GAlpelisib溶解度O)富集分析和KEGG(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes)富集分析,然后使用单因素cox回归、lasso回归、多因素cox回归构建预后模型,使用外部数据(GSE20685)进行验证,生存曲线(Kaplan-Meier,KM)、受试者工作特征曲线(Receiver Operating Characteristic,ROC)评估预后模型的有效性、准确性。将预后模型与临床病理因素联合绘制列线图以评估其临床价值。随后研究了预后模型与免疫细胞浸润、免疫检查点、肿瘤免疫功能障碍与排斥(Tumor Immune Dysfunction and Exclusion,TIDE)、肿瘤突变负荷(Tumor Mutational Burden,TMB)、药物敏感性之间的关系。结果:通过WGCNA找到了595个与铜死亡和MYC评分相关的基因,随后与差异基因取交集共获得214个交集基因,经过基因富集分析,这些交集基因主要富集在细胞分裂、染色体分离、有丝分裂、细胞周期过程中。随后在TCGA训练组中进行了单因素cox回归,lasso回归、多因素cox回归,最后构建了基于4个基因(FABP6、GABRQ、NTRK2、SLC1A1)的乳腺癌预后模型,根据预后模型风险评分中值,将样本划分为高风险组和低风险组,K-M生存曲线结果提示TCGA训练组中高风险组的总体生存率较差,在TCGA验证组和外部验证组(GSE20685)中也呈现出高风险组总体生存较差。ROC曲线表明,在TCGA训练组中1年、3年、5年、10年曲线下面积(Area Under the Curve,AUC)分别为0.710、0.622、0.640和0.677,并且在TCGA验证组和GEO外部验证组中也呈现出类似的结果,这表明预后模型具有良好的准确性。本研究结合临床病理数据绘制的列线图,其1年、3年、5年、10年的ROC曲线下面积分别是0.836、0.754、0.746及0.696,说明模型有较高的临床价值。此外,研究表明高低风险组在免疫微环境、TIDE、TMB、抗癌化学药物治疗敏感性表现出差异。结论:本研究建立了一个基于4个基因(FABP6、GABRQ、NTRK2、SLC1ATalazoparib体内实验剂量1)的乳腺癌预后模型,并构建了一个可以准确预测乳腺癌预后的列线图,揭示了高低风险组的免疫微环境和药物敏感性的差异。这些结果可能有助于乳腺癌患者的预后预测和治疗,为后续研究提供新的思路。

目的：观察丹参素钠（SAAS）预处理selleck化学对大鼠急性心肌缺血再灌注模型的预防性治疗作用。方法：Langendorff离体心脏灌流建立缺血再灌注损伤模型，分别检测大鼠心肌组织和冠状动脉流出液中丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）的含量；急性分离心室肌细胞，分别用钙荧光探针Fluo-4 AM和活性氧（ROS）荧光探针DCFDA孵育细胞immediate body surfaces，激光共聚焦显微镜观察缺血再灌注心室肌细胞内游离钙和ROS水平。结果：心selleckchem肌缺血再灌注后，心肌组织和冠状动脉流出液中SOD活性降低和MDA含量增加（P<0.05），心室肌细胞内游离钙和ROS增多（P<0.01）;SAAS预处理后可以增加SOD活性并降低MDA含量（P<0.05），减轻心室肌细胞钙超载和ROS的生成（P<0.01,P<0.05）。结论：SAAS可通过对抗氧化应激，减轻心肌缺血再灌注损伤，发挥保护心肌的作用。

目的 探讨不同口腔黏膜脱落细胞数量对预测口腔癌风险指数准确性的影响，为口腔黏膜脱落细胞检查刷取样本的标准提供依据。方法 纳入口腔白斑患者、口腔癌患者各12例，正常对照组12例，刷取病损或正常部位口腔黏膜脱落细胞，Feulgen染色，获取DNA指数，随机抽取500、1000、2000、4000、6000、8000、10000个细胞，每例样MK-1775分子量本重复随机抽取7次，分别计算口腔癌风险指数。结果 正常对照组中，各组口腔癌风险指数均在0.1附近，无统计学差异。口腔白斑组中，有8例样本细胞数量对口腔癌风险指数结果没有影响，4例样本EPZ-6438出现轻度影响。12例样本中500～8000个细胞数各组的口腔癌风险指数与10000个细胞数组比较，均无统计学差异。在口腔癌组中，细Protein Analysis胞数量对口腔癌风险指数影响较大，具有显著统计学差异（P <0.01），其中4000、6000及8000个细胞数组口腔癌风险指数与变异系数10000个细胞数组比较没有统计学差异。结论 口腔白斑伴异常增生样本，脱落细胞数量对口腔癌风险指数有一定影响。对于口腔癌样本，至少需要刷取4000个脱落细胞才能获得准确的口腔癌风险指数。

为了探讨5-甲基胞嘧啶（5-methylcytosine,m5C）相关基因在三阴性乳腺癌（triple negative breast cancer,TNBC）患者治疗及预后中的潜在价值，构建了基于m5C相关基因的预后预测模型，用于评估TNBC患者的预后和生存状况。从基因表达总库（gene expression omnibus,GEO）数据库和癌症基因组图谱（the cancer genome atlas,TCGA）数据库中下载TNBC基因表达谱和相应的临床数据。通过Pearson分析确定了99个m5C相关基因，进一步采用单因素Cox分析鉴定出5个与预后有关的m5C相关基因（SLC6A14、BCL11A、UGT8、LMO4AZD2281说明书、PSAT1）并构建了风险评分(risk score)预测模型，根据风险评分中位值将患者划分为高风险组和低风险组。使用Kaplan-Meier(K-M）生存分析、受试者工作特征（receiver operating characteristic,ROC）曲线、多变量Cox回归分析、构建列线图和校准曲线评估了模型的预测效能。训练集和验证集的K-M生存Dorsomorphin MW曲线、受试者工作特征曲线下面积（area under the curve,AUC）分析均验证了模型具有良好的预测能力。多变量Cox回归分析显示，风险评分可作为独立的预后生物标志物。使用ssGSEA、免疫评分分析和化疗药物对高低风险组患者的半最大抑制浓度（half maximal inhibitory concentration,IC_(50)）值差异分析显示，免疫细胞和免疫检查点基因以及大多数化疗药物的IC_(50)值在不同风险组之间的表达存在显著差异。研究结果构建了基于5个m5C相关基因的风险评分预后预测模型，这将有助于阐明TNBC中m5C相关基因的作用机制，进而提供更有价值的预后及诊断的生物标志物和潜connected medical technology在的治疗靶点，为TNBC患者临床个性化治疗提供理论指导。

【目的】宣威肺癌表现出明显的性别和地域差异,女性发病率更高,病理分型以腺癌为主,但其病因和机制却知之甚少。本研究拟从多组学层面揭示宣威女性肺腺癌特异性的分子特征,为临床上宣威女性肺腺癌的诊疗提供科学依据和潜在的治疗靶点。【方法】(1)本研究前瞻性地收集了169例宣威地区女性肺腺癌患者的肿瘤组织及邻近正常组织样本。这169例女性患者均从不吸烟(一生中吸烟少于100支),未经任何治疗且首次确诊为原发性肺腺癌。(2)使用全外显子组测序、转录组测序、蛋白质非标记定量和磷酸化蛋白质非标记定量技术分别检测了135、136、102和102个肿瘤样本和135、36、20、20个配对的正常组织样本,进行多组学分析。(3)组学分析筛选出DHX9可能是p53突变型肺癌患者潜在的治疗靶点。选取p53野生型肺癌细胞系A549和p53缺失肺癌细胞系Calu-1,构建p53野生型和突变型慢病毒载体,DHX9干扰与过表达慢病毒载体,慢病毒包装细胞系包装,感染A549和Calu-1细胞并使用嘌呤霉素进行筛选。(4)使用q RT-PCR和western blot检测相关基因在m RNA和蛋白层面上的表达水平。(5)使用CCK-8方法检测肺癌细胞的增殖能力;划痕愈合实验检测肺癌细胞的迁移能力;Transwell检测肺癌细胞的侵袭转移能力;流式细胞术检测肺癌细胞周期和凋亡。(6)使用回复实验分析p53突变通过DHX9/PCNA/CDK2调控肺癌发展。(7)使用裸鼠皮下成瘤实验在体内研究DHX9在p53突变型肺癌中的生长促进作用。(8)使用免疫组化和western blot检测裸鼠肿瘤中相关蛋白的表达。(9)使用TUNEL染色检测裸鼠肿瘤中细胞的凋亡情况。【结果】(1)全外显子组分析鉴定出了37149个体细胞突变,包括1797个插入缺失突变、32972个错义突变、2345个无义突变和35个不间断突变;拷贝数分析揭示了40个染色体区段上存在140396个基因水平的扩增和67605个缺失;使用m RNA-seq检测出了19182个基因的转录谱;蛋白质与磷酸化蛋白质组分析检测出了1795种蛋白质和476种磷酸化蛋白质在肿瘤样品中表达上调。(2)在蛋白水平上,RNA代谢、翻译、细胞内蛋白质转运等寻找更多生物学过程发生上调,而在蛋白质磷酸化水平上,染色质组织结构、RNA代谢、DNA代谢等生物学过程出现上调。p53突变型样本中,DHX9、SF的蛋白水平及SF1＿S82的磷酸化水平显著上调,且与较差的预后相关。DHX9和SF1可能是p53突变型肺癌患者潜在的治疗靶点。(3)与EGFR单突变样immune-epithelial interactions本相比,在TP53/EGFR双突变样本中,Notch信号传导通路受到显著干扰,且下调的Notch信号通路可能会减弱效应型单核细胞的杀伤能力。相比于TP53/EGFR双突变样本,TP53单突变样本中存在广泛的代谢重编程,包括柠檬酸循环和呼吸电子传递、氨基酸及其衍生物的代谢、脂类和嘧啶代谢https://www.selleck.cn/products/AZD1152-HQPA.html、t RNA氨酰化等代谢过程显著上调。(4)在EGFR/RTK-RAS通路中,EGFR和RTK-RAS通路基因的双突变赋予了癌细胞更强的糖酵解能力,糖酵解通路和相关酶显著上调。(5)通过构建受驱动突变干扰的PPI网络,进行蛋白质-蛋白质相互作用组分析,发现了多个受到突变影响的蛋白相互作用,如MAD1-MAD2、TPRN-PPP1CA等;富集分析显示有丝分裂细胞周期调控、RTK信号转导、DNA损伤刺激反应等生物学过程显著富集。MAD1 p.Arg558His突变极大程度地削弱了MAD1-MAD2的相互作用,并可能通过抑制姐妹染色单体在细胞分裂中期-后期转变时的分离,最终导致肺癌的发生;TPRN p.His550Gln突变也在极大程度上削弱了TPRN-PPP1CA的相互作用,可能导致丝氨酸/苏氨酸特异性蛋白磷酸酶的功能失调,引起去磷酸化的阻滞,最终导致肺癌的进展。(6)在冷肿瘤亚型中,甘露糖基化、细胞氨基酸生物合成过程、硫化物氧化、谷氨酰胺家族氨基酸生物合成等是冷肿瘤样本中最重要的生物学途径。(7)使用p53野生型和突变型慢病毒载体与DHX9干扰与过表达慢病毒载体转染A549和Calu-1细胞后,通过荧光显微镜和q PCR检测,DHX9被成功干扰和过表达。相比p53野生型敲低组细胞,在p53突变型细胞中敲低DHX9后,细胞的增殖能力明显减弱,细胞侵袭穿过基质胶数量明显减少,细胞凋亡比例明显增高,EMT相关蛋白和VEGF表达受到抑制。在过表达DHX9后,p53突变组较p53野生组细胞的愈合能力明显增强,G1期细胞的比例显著减少。(8)在p53突变型A549细胞中过表达或敲低DHX9,PCNA、CDK2蛋白的表达出现了相应的上调或下调。在过表达DHX9的同时加入PCNA抑制剂,CDK2蛋白的表达也出现了下调,CCK8实验显示肺癌细胞的增殖能力较前明显减弱。(9)相比于p53野生型组,在p53突变组中过表达DHX9后裸鼠成瘤体积及瘤重明显增大,E-cadherin下调,N-cadherin、Vimentin、VEGF、PCNA、CDK2表达上调;敲低DHX9后裸鼠瘤体中细胞凋亡比例明显增加。【结论】(1)宣威女性肺腺癌多组学分析分别从全外显子组、转录组、蛋白质组、磷酸化蛋白质组水平上,鉴定出了大量发生突变的基因和表达失调的蛋白及下游生物学过程,这些差异可能存在更深的机制。(2)DHX9和SF1可能是p53突变型肺癌患者潜在的治疗靶点。(3)对失调的Notch信号通路进行干预可作为TP53/EGFR双突变肺癌患者的辅助治疗方法。对于EGFR/RTK-RAS通路基因发生双突变的患者,抑制肿瘤细胞的糖酵解途径可能会得到更显著的治疗效果。(4)开发MAD1-MAD2和TPRN-PPP1CA相互作用的抑制剂可能是治疗宣威女性肺腺癌的有效药物。(5)谷氨酰胺代谢途径可能是宣威女性肺腺癌冷肿瘤亚型的潜在治疗靶点。(6)DHX9可能通过上调PCNA/CDK2轴促进p53突变型肺癌细胞的增殖、迁移、侵袭及G1期进程,抑制其凋亡,并可能通过上调EMT相关蛋白和促肿瘤血管生成来促进p53突变型肺癌的进展。

目的:探讨地黄苷A(ReA)通过调节蛋白激酶B(AKT)/核因子红细胞系2相关因子2(Nrf2)/谷胱甘肽过氧化酶4(GPX4)信号Fulvestrant价格通路介导的铁死亡对大鼠心肌缺血再灌注损伤(MI/RI)的影响。方法:将90只大鼠随机分为假手术组(Sham组)、模型组(Model组)、ReA低剂量组(ReA-L组)、ReA高剂量组(ReA-H组)、铁死亡抑制剂ferrostatin-1(Fer-1)组(Fer-1组)及ReA高剂量+AKT抑制剂perifosine组(RKPT-330采购eA-H+perifosine组),每组15只。ReA-L组、ReA-H组大鼠分别腹腔注射40、80 mg/kg ReA,Fer-1组大鼠腹腔注射2 mg/kg ferrostatin-1,ReA+perifosine组大鼠腹腔注射80 mg/kg ReA及20 mg/kg perifosine, Sham组和Model组大鼠腹腔注射等量生理盐水，每日1次，连续给药2周。除Sham组外，各组大鼠在末次给药1 h后采用左冠状动脉前降支结扎法建立MI/RI大鼠模型。试剂盒检测血清心肌酶水平；氯代三苯基四氮唑(TTC)染色测定心肌梗死面积；苏木素-伊红(HE)染色观察心肌组织病理形态学变化；原位末端标记测定法(TUNEL)染色检测心肌细胞凋亡率；试剂盒测定心肌组织抗氧化能力；Fe~(2+)含量检测试剂盒检测心肌组织Fe~(2+)含量；蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测AKT/Nrf2/GPX4信号通路相关蛋白表达。结果:与Sham组比较，Model组大鼠血清乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、心肌肌钙蛋白Patrinia scabiosaefoliaI(cTnI)水平及心肌组织中丙二醛(MDA)和Fe~(2+)含量上升，组织中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)活性及p-AKT/AKT、Nrf2和GPX4蛋白水平下降，转铁蛋白受体1(TfR1)蛋白水平升高，心肌细胞凋亡率及心肌梗死面积增加，心肌组织损伤严重(P<0.05);与Model组相比，ReA-L组、ReA-H组、Fer-1组大鼠血清LDH、CK-MB和cTnI水平及心肌组织中MDA和Fe~(2+)含量下降，组织中GSH-Px、SOD活性及p-AKT/AKT、Nrf2和GPX4蛋白水平升高，TfR1蛋白水平降低，心肌细胞凋亡率及心肌梗死面积减少，心肌组织损伤减轻(P<0.05);perifosine减弱了高剂量ReA对MI/RI大鼠铁死亡的抑制作用。结论:ReA可能通过激活AKT/Nrf2/GPX4信号通路，抑制铁死亡，改善MI/RI大鼠心肌组织损伤。

肿瘤微环境区别于正常组织的微环境,与肿瘤的发生发展和转移紧密相关,具有乏氧、过表达谷胱甘肽、高含量乳酸、高能量代谢等特性,是导致肿瘤抗辐射、耐药、转移、复发的主要原因,从而造成治疗效果不理想。肿瘤微环境的特异性虽然严重限制了化疗、放疗、光动力治疗等方法的治疗效率,但也为特异性针对肿瘤微环境的治疗方法提供了新的思路。肿瘤微环境响应的多功能纳米材料具有靶向、可控、微创、成像、治疗等功能,其能够通过分子自组装的方式将各功能部件有机结合在一起,因而被广泛用于生物医学领域,显示出肿瘤治疗的巨大潜力。具有氧化酶、过氧化物酶及超氧化物歧化酶等多种类酶活性的新型纳米材料,被发现可以有效杀死肿瘤细胞,同时不损伤周围正常细胞,然而具有肿瘤选择性的工程化靶向纳米材料的设计与合成却是一个艰巨的挑战。此外,纳米材料在肿瘤治疗中的效果仍受到酶活性不足、内源性H2O2不足以及高含量谷胱甘肽的限制。基于此,本博士论文主要针对肿瘤微环境中乏氧、过表达谷胱甘肽、高含量乳酸、高能量代谢以及治疗过程中内源性H2O2含量不足等问题,工程化设计了多种多功能纳米材料,以特异性响应肿瘤微Duodenal biopsy环境,并破坏肿瘤的氧化还原稳态(耗竭谷胱甘肽),原位促进H2O2生成,催化肿瘤细胞内无毒的H2O2生成高毒性的活性氧,耗竭葡萄糖,改善肿瘤乏氧,耗竭乳酸,从而通过肿瘤的化疗和放疗增敏抑制肿瘤生长和转移。探究了肿瘤微环境响应的多功能纳米材料综合治疗机制,以及在肿瘤模型中的成像与治疗的应用前景,旨在为开发更多肿瘤微环境响应的、具有不同增敏机制的多功能纳米材料提供借鉴。具体研究工作和研究成果如下:针对肿瘤治疗过程中纳米材料类酶活性低、稳定性差、内源性H2O2含量不足等问题,通过盐模板法工程化设计并制备了具有内在类过氧化物酶活性和类谷胱甘肽氧化酶活性的新型纳米结构的单原子铁基纳米材料。通过分子自组装创新性地实现了天然葡萄糖氧化酶的高效负载,并构建了单元子铁纳米材料高效装载葡萄糖氧化酶的纳米输送系统。体外酶活性实验结果表明,X射线辐照能显著增强单元子铁纳米材料的自级联催化活性:通过类过氧化物酶活性将H2O2转变为羟基自由基(·OH),同时产生的FeⅢ位点与GSH反应生成GSSG。在肿瘤微环境中,负载的葡萄糖氧化酶可以将催化高表达的葡萄糖产生H2O2,使得自级联酶催化反应源源不断地产生·OH。细胞和动物实验的结果证明,构建的纳米治疗系统可以通过细胞凋亡和铁死亡协同杀死肿瘤细胞,最大程度地抑制肿瘤组织的生长。针对天然酶稳定性不佳、小分子化合物水溶性差,化疗药物难以可控释放、单一疗法难以完全消除肿瘤、难以应对转移瘤等问题,应用氮气保护和分子自组装的方法,设计并制备了一种具有小分子化疗药物白芦藜醇(RSV)装载的类双类酶活性的新型钛基纳米复合材料。通过在硬脂酸和月桂酸的共晶混合物的帮助下,创新性地把小分子化疗药物白藜芦醇高效地装载于二维钛基纳米片上,并命名为nTCTRPs。在近红外光的照射下,钛纳米片高效的光热转换能力熔化相变共晶混合物,并导致RSV的可控释放和二维钛纳米片(nTCTs)的暴露,使类过氧化物酶活性和类谷胱甘肽氧化酶活性同时被释放出来。体外催化实验和细胞实验表明,通过X射线照射,钛基纳米GSKJ4研究购买复合材料可以耗尽谷胱甘肽,并增强活性氧的产生,实现了化疗药物协同的放疗增敏。小鼠乳腺癌动物模型实验表明,钛基复合纳米材料介导的热疗可以缓解肿瘤部位的乏氧,降低辐射抗性,实现了肿瘤的光声成像协同放疗增敏和抗肺转移。针对肿瘤微环境中乳酸和谷胱甘肽表达量过高以及现有放疗副作用大、能量不能高效沉积在肿瘤部位、肿瘤细胞内高水平的谷胱甘肽和乳酸含量、放疗过程中内源H2O2含量不足等问题,通过溶剂热法制备了一种新型顺序催化的多功能铋基复合纳米材料(BBSLPs)。该多功能铋基纳米复合材料通过分子自组装,创新性地实现了天然乳酸氧化酶(LOX)和谷胱甘肽耗竭剂(PDS-2)的共同装载。体外细胞实验表明,BBSLPs能够用于SB203580半抑制浓度耗竭肿瘤细胞内过表达的谷胱甘肽,并通过引入外场能量(X射线)促进活性氧的生成,同时实现自供给H2O2。随后,自供给H2O2在X射线照射下,BBSLPs通过增强照射催化促进了随后的活性氧生成。体内小鼠乳腺癌模型实验表明,乳酸的耗尽和上升的pH值进一步诱导肿瘤转移因子VEGF表达的下调,实现抗肿瘤转移和增强的DNA损伤,最终实现了 CT成像指导的肿瘤微环境调控的放疗增敏。

目的:观察白内障超声乳化联合房角分离术(phacoemulsification combined with goniosynechialysis,Phaco+GSL)术前不同时间散瞳对原发性闭角型青光眼(primary angle closure glaucoma,PACG)患者手术的影响,指导临床选择青光眼患者术前散瞳时间。方法:本研究选取2021年11月至2022年12月在广西壮族自治区人民医院眼科就诊的PACG的患者60例(60眼),其中急性闭角型青光眼(acute angle-closure glaucoma,AACG)18例(18眼),慢性闭角型青光眼(chronic angle-closure glaucoma,CACG)42例(42眼),按随机数表抽样法分成三组:A组术前20 min散瞳、B组术前30 min散瞳、C组术前1h散瞳,各20例(20眼)。所有患者采用仰卧位,每隔5 min滴1次复方托吡卡胺滴眼液,共滴3次。比较患者术前术后眼压(intraocular pressure,IOP)、视力,散瞳前后的IOP、瞳孔直径、前房深度(anterior chamber depth,ACD)、晶体厚度(lens thickness,LT)以及各组手术时间和能量(cumulative dissipated energy,CDE)的差异,分析各指标之间的相关性。结果:(1)三组术后视力较术前明显提高,差异有统计学意义(P<0.001)。三组组间比较,差异无统计学意义(P=0.541)。(2)三组术后IOP较术前降低,差异有统计学意义(P<0.001),IOP降低幅度:术前1h组>术前30 min组>术前20 min组,差异有统计学意义(均P<0.05);散瞳后IOP较术前升高,差异有统计学意义(P<0.001),IOP升高幅寻找更多度:术前1h组>术前20 min组和术前30 min组,差异有统计学意义(P<0.001,P=0.04),术前30 min组与术前20 min组,差异无统计学意义(P=0.678)。(3)三组散瞳后与散瞳前相比,ACD加深、LT变薄、瞳孔直径增大,差异有统计学意义(均P<0.001),其中术前1h组>术前30 min组>术前20 min组,差异有统计学意义(均P<0.05)。(4)三组手术所需的CDE差异无统计学意义(P=0.623),三组手术时间差异有统计学意义(P<0.001),手术所需时长:术前20 min组>术前30 min组Telaglenastat分子量>术前1h组,差异有统计学意义(均P<0.05)。(5)瞳孔直径差值与Psychosocial oncologyACD差值、LT差值、IOP差值1(术前与术后IOP差值)、IOP差值2(散瞳后与散瞳前IOP差值)存在着显著的正相关(均P<0.001)。(6)ACD差值与LT差值、眼压差值1、眼压差值2存在着显著的正相关(均P<0.05)。(7)LT差值与IOP差值1、IOP差值2存在着显著的正相关(均P<0.001)。(8)IOP差值1与IOP差值2存在着显著的正相关(P=0.001)。(9)手术时间与瞳孔直径差值、ACD差值、LT差值、IOP差值1、IOP差值2存在着显著的负相关(均P<0.001)。(10)余各项观察指标之间无显著相关性。结论:(1)本研究三组散瞳后的IOP均升高,但2 mm Hg的幅度临床意义有限,未增加手术风险及并发症的发生。(2)本研究三组随术前散瞳时间增加,瞳孔直径增大,ACD加深,LT变薄,手术时间减少,术后IOP降低幅度增大。(3)PACG患者行Phaco+GSL手术,术前1h散瞳能获得更好的手术效果及临床疗效。

共价有机框架(Covalent Organic Frameworks,COFs)是一种由非金属元素(如C,H,N,O和B)通过强共价键连接而成的高结晶性多孔有机聚合物。COFs具有高比表面积、结构和功能可Gefitinib-based PROTAC 3设计性、高稳定性等特点,在气体储存和分离、多相催化、传感检测以及能源储存等领域具有广泛的应用前景。本论文以苯并噻二唑基团(BTz)和氮氧自由基(2,2,6,6-四甲基哌啶-1-氧自由基,TEMPO)作为功能化基团,将其嫁接于COFs骨架,合成了一系列苯并噻二唑和氮氧自由基功能化的COFs,探索了溶剂热法、超声合成法、室温合成法和机械化学合成法以及不同溶剂体系对COFs形貌和结晶度的影响,初步研究了上述功能性COFs光催化氧化苯甲硫醚、α-松油烯和热催化苯甲醇的性能。本论文的研究内容主要分为以下两个部分:(1)苯并噻二唑功能化COFs的合成及可见光催化性能选择具有可见光氧化还原活性的4,7-二溴-2,1,3-苯并噻二唑为原料,利用Suzuki偶联反应合成含醛基的4,4′-(苯并噻二唑-4,7-二酰基)二苯甲醛(构筑单元为C_2构型),并与2,4,6-三(4-氨基苯基)-1,3,5-三嗪(TTA,C_3构型)通过溶剂热法合成TTA-BTz-COF。扫描电镜图(SEM)表明TTA-BTz-COF由高度团聚的球型纳米颗粒组成。可见光催化实验结果表明,以甲醇为溶剂,苯甲硫醚(0.3 mmol),TTA-BTz-COF为催化剂(4 mg),蓝光照射下(3 W,425 nm),反应5 h,苯甲硫醚氧化为甲基苯基亚砜的转化率为39.8%。以4,7-二溴-2,1,3-苯并噻二唑为原料,利用Suzuki偶联反应将BTz基团引入氨基配体,合成4,7-双(4-氨基苯基)-2,1,3-苯并噻二唑构筑单元,并与三醛基间苯三酚(TP)通过溶剂热合成法、超声合成法、室温合成法和机械化学合成法在不同溶剂体系(溶剂体系A:邻二氯苯:正丁醇:6M冰醋酸=5:5:1;溶剂体系B:均三甲苯:1,4-二氧六环:17.4M冰醋酸=17:3:1)中合成一系列BTz功能化的亚胺类TP-BTz-COFs。系统研究上述TP-BTz-COFs的结晶度与合成条件的关系,发现TP-BTz-COFs的结晶度主要取决于合成方法,与上述溶剂体系无关。其中,室温和超声合成法制备的TP-BTz-COFs具有良好的结晶度。电子顺磁共振谱(EPR)表明TP-BTz-COFs在可见光照射下能够活化氧气生成单线态氧(~1O_2)和超氧自由基(O_2~(·-)),然而将其可见光催化剂氧化苯甲硫醚和α-松油烯,发现其仅能Blue biotechnology将α-松油烯选择性氧化为阿斯利多,但催化苯甲、硫醚转化为甲基苯基亚砜的催化性能较差。合成高结晶三嗪类COFs通常反应条件较苛刻,在研究上述BTz-COFs过程中,我们发现以TTA(C_3构型)与均苯三甲醛(TFB,C_3构型)为VX-445体内实验剂量单体,利用超声合成法能够在温和反应条件下快速合成具有较高结晶度的TTA-TFB-COF。X-射线衍射(XRD)、比表面积(BET)与热重分析(TGA)结果表明其具有较好的结晶度、较大的比表面积(632 m~2 g~(-1))和良好的热稳定性(518℃)。得益于TTA-TFB-COF结构中富氮且富含芳香环,TTA-TFB-COF对碘单质具有优异的吸附性能,在浓度为1 mmol L~(-1)的碘正己烷溶液中加入15 mg TTA-TFB-COF,经过4.5 h后,溶液中碘单质可被完全脱除。(2)TEMPO功能化COFs材料的合成及催化性能选择2,5-二溴-N-(2,2,6,6-四甲基哌啶)苯甲酰胺作为功能化分子,利用Suzuki偶联反应合成含氨基的NH_2-tpdc-TEMPO(C_2构型),并与TP(C_3构型)通过超声合成法在不同的溶剂体系(溶剂体系A和B)合成TEMPO功能化TP-TEMPO-COFs。SEM图表明TP-TEMPO-COFs由大量聚集的纳米粒子组成,XRD衍射结果表明该COF结晶度较低。以三氟甲苯为溶剂,在80℃和氧气氛围下探究TP-TEMPO-COFs对苯甲醇氧化为苯甲醛的性能,催化结果表明,当加入亚硝酸叔丁酯(TBN)作为引发剂,TP-TEMPO-COF(0.3mmol),24 h后,苯甲醇氧化为苯甲醛的转化率为24.17%。此外,我们还采用混合配体策略,将不同比例的BTz和TEMPO功能化的氨基单体与TP通过超声合成法和室温合成法制备出BTz和TEMPO双功能TP-(BTz_x-TEMPO_(1-x))-COFs。光电流响应和电化学循环伏安测试结果表明该双功能兼具可见光响应和电化学活性。将其作为可见光催化苯甲硫醚催化剂,在室温下使用蓝光LED灯(3 W,425 nm)照射5 h时,TP-(BTz_(0.5)-TEMPO_(0.5))-COF_(RT)对苯甲硫醚的转化率为50.5%,比TP-(BTz_(0.8)-TEMPO_(0.2))-COF_(RT)更高(转化率为15.6%)。