PDK1信号通路

肿瘤微环境区别于正常组织的微环境,与肿瘤的发生发展和转移紧密相关,具有乏氧、过表达谷胱甘肽、高含量乳酸、高能量代谢等特性,是导致肿瘤抗辐射、耐药、转移、复发的主要原因,从而造成治疗效果不理想。肿瘤微环境的特异性虽然严重限制了化疗、放疗、光动力治疗等方法的治疗效率,但也为特异性针对肿瘤微环境的治疗方法提供了新的思路。肿瘤微环境响应的多功能纳米材料具有靶向、可控、微创、成像、治疗等功能,其能够通过分子自组装的方式将各功能部件有机结合在一起,因而被广泛用于生物医学领域,显示出肿瘤治疗的巨大潜力。具有氧化酶、过氧化物酶及超氧化物歧化酶等多种类酶活性的新型纳米材料,被发现可以有效杀死肿瘤细胞,同时不损伤周围正常细胞,然而具有肿瘤选择性的工程化靶向纳米材料的设计与合成却是一个艰巨的挑战。此外,纳米材料在肿瘤治疗中的效果仍受到酶活性不足、内源性H2O2不足以及高含量谷胱甘肽的限制。基于此,本博士论文主要针对肿瘤微环境中乏氧、过表达谷胱甘肽、高含量乳酸、高能量代谢以及治疗过程中内源性H2O2含量不足等问题,工程化设计了多种多功能纳米材料,以特异性响应肿瘤微Duodenal biopsy环境,并破坏肿瘤的氧化还原稳态(耗竭谷胱甘肽),原位促进H2O2生成,催化肿瘤细胞内无毒的H2O2生成高毒性的活性氧,耗竭葡萄糖,改善肿瘤乏氧,耗竭乳酸,从而通过肿瘤的化疗和放疗增敏抑制肿瘤生长和转移。探究了肿瘤微环境响应的多功能纳米材料综合治疗机制,以及在肿瘤模型中的成像与治疗的应用前景,旨在为开发更多肿瘤微环境响应的、具有不同增敏机制的多功能纳米材料提供借鉴。具体研究工作和研究成果如下:针对肿瘤治疗过程中纳米材料类酶活性低、稳定性差、内源性H2O2含量不足等问题,通过盐模板法工程化设计并制备了具有内在类过氧化物酶活性和类谷胱甘肽氧化酶活性的新型纳米结构的单原子铁基纳米材料。通过分子自组装创新性地实现了天然葡萄糖氧化酶的高效负载,并构建了单元子铁纳米材料高效装载葡萄糖氧化酶的纳米输送系统。体外酶活性实验结果表明,X射线辐照能显著增强单元子铁纳米材料的自级联催化活性:通过类过氧化物酶活性将H2O2转变为羟基自由基(·OH),同时产生的FeⅢ位点与GSH反应生成GSSG。在肿瘤微环境中,负载的葡萄糖氧化酶可以将催化高表达的葡萄糖产生H2O2,使得自级联酶催化反应源源不断地产生·OH。细胞和动物实验的结果证明,构建的纳米治疗系统可以通过细胞凋亡和铁死亡协同杀死肿瘤细胞,最大程度地抑制肿瘤组织的生长。针对天然酶稳定性不佳、小分子化合物水溶性差,化疗药物难以可控释放、单一疗法难以完全消除肿瘤、难以应对转移瘤等问题,应用氮气保护和分子自组装的方法,设计并制备了一种具有小分子化疗药物白芦藜醇(RSV)装载的类双类酶活性的新型钛基纳米复合材料。通过在硬脂酸和月桂酸的共晶混合物的帮助下,创新性地把小分子化疗药物白藜芦醇高效地装载于二维钛基纳米片上,并命名为nTCTRPs。在近红外光的照射下,钛纳米片高效的光热转换能力熔化相变共晶混合物,并导致RSV的可控释放和二维钛纳米片(nTCTs)的暴露,使类过氧化物酶活性和类谷胱甘肽氧化酶活性同时被释放出来。体外催化实验和细胞实验表明,通过X射线照射,钛基纳米GSKJ4研究购买复合材料可以耗尽谷胱甘肽,并增强活性氧的产生,实现了化疗药物协同的放疗增敏。小鼠乳腺癌动物模型实验表明,钛基复合纳米材料介导的热疗可以缓解肿瘤部位的乏氧,降低辐射抗性,实现了肿瘤的光声成像协同放疗增敏和抗肺转移。针对肿瘤微环境中乳酸和谷胱甘肽表达量过高以及现有放疗副作用大、能量不能高效沉积在肿瘤部位、肿瘤细胞内高水平的谷胱甘肽和乳酸含量、放疗过程中内源H2O2含量不足等问题,通过溶剂热法制备了一种新型顺序催化的多功能铋基复合纳米材料(BBSLPs)。该多功能铋基纳米复合材料通过分子自组装,创新性地实现了天然乳酸氧化酶(LOX)和谷胱甘肽耗竭剂(PDS-2)的共同装载。体外细胞实验表明,BBSLPs能够用于SB203580半抑制浓度耗竭肿瘤细胞内过表达的谷胱甘肽,并通过引入外场能量(X射线)促进活性氧的生成,同时实现自供给H2O2。随后,自供给H2O2在X射线照射下,BBSLPs通过增强照射催化促进了随后的活性氧生成。体内小鼠乳腺癌模型实验表明,乳酸的耗尽和上升的pH值进一步诱导肿瘤转移因子VEGF表达的下调,实现抗肿瘤转移和增强的DNA损伤,最终实现了 CT成像指导的肿瘤微环境调控的放疗增敏。

目的:观察白内障超声乳化联合房角分离术(phacoemulsification combined with goniosynechialysis,Phaco+GSL)术前不同时间散瞳对原发性闭角型青光眼(primary angle closure glaucoma,PACG)患者手术的影响,指导临床选择青光眼患者术前散瞳时间。方法:本研究选取2021年11月至2022年12月在广西壮族自治区人民医院眼科就诊的PACG的患者60例(60眼),其中急性闭角型青光眼(acute angle-closure glaucoma,AACG)18例(18眼),慢性闭角型青光眼(chronic angle-closure glaucoma,CACG)42例(42眼),按随机数表抽样法分成三组:A组术前20 min散瞳、B组术前30 min散瞳、C组术前1h散瞳,各20例(20眼)。所有患者采用仰卧位,每隔5 min滴1次复方托吡卡胺滴眼液,共滴3次。比较患者术前术后眼压(intraocular pressure,IOP)、视力,散瞳前后的IOP、瞳孔直径、前房深度(anterior chamber depth,ACD)、晶体厚度(lens thickness,LT)以及各组手术时间和能量(cumulative dissipated energy,CDE)的差异,分析各指标之间的相关性。结果:(1)三组术后视力较术前明显提高,差异有统计学意义(P<0.001)。三组组间比较,差异无统计学意义(P=0.541)。(2)三组术后IOP较术前降低,差异有统计学意义(P<0.001),IOP降低幅度:术前1h组>术前30 min组>术前20 min组,差异有统计学意义(均P<0.05);散瞳后IOP较术前升高,差异有统计学意义(P<0.001),IOP升高幅寻找更多度:术前1h组>术前20 min组和术前30 min组,差异有统计学意义(P<0.001,P=0.04),术前30 min组与术前20 min组,差异无统计学意义(P=0.678)。(3)三组散瞳后与散瞳前相比,ACD加深、LT变薄、瞳孔直径增大,差异有统计学意义(均P<0.001),其中术前1h组>术前30 min组>术前20 min组,差异有统计学意义(均P<0.05)。(4)三组手术所需的CDE差异无统计学意义(P=0.623),三组手术时间差异有统计学意义(P<0.001),手术所需时长:术前20 min组>术前30 min组Telaglenastat分子量>术前1h组,差异有统计学意义(均P<0.05)。(5)瞳孔直径差值与Psychosocial oncologyACD差值、LT差值、IOP差值1(术前与术后IOP差值)、IOP差值2(散瞳后与散瞳前IOP差值)存在着显著的正相关(均P<0.001)。(6)ACD差值与LT差值、眼压差值1、眼压差值2存在着显著的正相关(均P<0.05)。(7)LT差值与IOP差值1、IOP差值2存在着显著的正相关(均P<0.001)。(8)IOP差值1与IOP差值2存在着显著的正相关(P=0.001)。(9)手术时间与瞳孔直径差值、ACD差值、LT差值、IOP差值1、IOP差值2存在着显著的负相关(均P<0.001)。(10)余各项观察指标之间无显著相关性。结论:(1)本研究三组散瞳后的IOP均升高,但2 mm Hg的幅度临床意义有限,未增加手术风险及并发症的发生。(2)本研究三组随术前散瞳时间增加,瞳孔直径增大,ACD加深,LT变薄,手术时间减少,术后IOP降低幅度增大。(3)PACG患者行Phaco+GSL手术,术前1h散瞳能获得更好的手术效果及临床疗效。

共价有机框架(Covalent Organic Frameworks,COFs)是一种由非金属元素(如C,H,N,O和B)通过强共价键连接而成的高结晶性多孔有机聚合物。COFs具有高比表面积、结构和功能可Gefitinib-based PROTAC 3设计性、高稳定性等特点,在气体储存和分离、多相催化、传感检测以及能源储存等领域具有广泛的应用前景。本论文以苯并噻二唑基团(BTz)和氮氧自由基(2,2,6,6-四甲基哌啶-1-氧自由基,TEMPO)作为功能化基团,将其嫁接于COFs骨架,合成了一系列苯并噻二唑和氮氧自由基功能化的COFs,探索了溶剂热法、超声合成法、室温合成法和机械化学合成法以及不同溶剂体系对COFs形貌和结晶度的影响,初步研究了上述功能性COFs光催化氧化苯甲硫醚、α-松油烯和热催化苯甲醇的性能。本论文的研究内容主要分为以下两个部分:(1)苯并噻二唑功能化COFs的合成及可见光催化性能选择具有可见光氧化还原活性的4,7-二溴-2,1,3-苯并噻二唑为原料,利用Suzuki偶联反应合成含醛基的4,4′-(苯并噻二唑-4,7-二酰基)二苯甲醛(构筑单元为C_2构型),并与2,4,6-三(4-氨基苯基)-1,3,5-三嗪(TTA,C_3构型)通过溶剂热法合成TTA-BTz-COF。扫描电镜图(SEM)表明TTA-BTz-COF由高度团聚的球型纳米颗粒组成。可见光催化实验结果表明,以甲醇为溶剂,苯甲硫醚(0.3 mmol),TTA-BTz-COF为催化剂(4 mg),蓝光照射下(3 W,425 nm),反应5 h,苯甲硫醚氧化为甲基苯基亚砜的转化率为39.8%。以4,7-二溴-2,1,3-苯并噻二唑为原料,利用Suzuki偶联反应将BTz基团引入氨基配体,合成4,7-双(4-氨基苯基)-2,1,3-苯并噻二唑构筑单元,并与三醛基间苯三酚(TP)通过溶剂热合成法、超声合成法、室温合成法和机械化学合成法在不同溶剂体系(溶剂体系A:邻二氯苯:正丁醇:6M冰醋酸=5:5:1;溶剂体系B:均三甲苯:1,4-二氧六环:17.4M冰醋酸=17:3:1)中合成一系列BTz功能化的亚胺类TP-BTz-COFs。系统研究上述TP-BTz-COFs的结晶度与合成条件的关系,发现TP-BTz-COFs的结晶度主要取决于合成方法,与上述溶剂体系无关。其中,室温和超声合成法制备的TP-BTz-COFs具有良好的结晶度。电子顺磁共振谱(EPR)表明TP-BTz-COFs在可见光照射下能够活化氧气生成单线态氧(~1O_2)和超氧自由基(O_2~(·-)),然而将其可见光催化剂氧化苯甲硫醚和α-松油烯,发现其仅能Blue biotechnology将α-松油烯选择性氧化为阿斯利多,但催化苯甲、硫醚转化为甲基苯基亚砜的催化性能较差。合成高结晶三嗪类COFs通常反应条件较苛刻,在研究上述BTz-COFs过程中,我们发现以TTA(C_3构型)与均苯三甲醛(TFB,C_3构型)为VX-445体内实验剂量单体,利用超声合成法能够在温和反应条件下快速合成具有较高结晶度的TTA-TFB-COF。X-射线衍射(XRD)、比表面积(BET)与热重分析(TGA)结果表明其具有较好的结晶度、较大的比表面积(632 m~2 g~(-1))和良好的热稳定性(518℃)。得益于TTA-TFB-COF结构中富氮且富含芳香环,TTA-TFB-COF对碘单质具有优异的吸附性能,在浓度为1 mmol L~(-1)的碘正己烷溶液中加入15 mg TTA-TFB-COF,经过4.5 h后,溶液中碘单质可被完全脱除。(2)TEMPO功能化COFs材料的合成及催化性能选择2,5-二溴-N-(2,2,6,6-四甲基哌啶)苯甲酰胺作为功能化分子,利用Suzuki偶联反应合成含氨基的NH_2-tpdc-TEMPO(C_2构型),并与TP(C_3构型)通过超声合成法在不同的溶剂体系(溶剂体系A和B)合成TEMPO功能化TP-TEMPO-COFs。SEM图表明TP-TEMPO-COFs由大量聚集的纳米粒子组成,XRD衍射结果表明该COF结晶度较低。以三氟甲苯为溶剂,在80℃和氧气氛围下探究TP-TEMPO-COFs对苯甲醇氧化为苯甲醛的性能,催化结果表明,当加入亚硝酸叔丁酯(TBN)作为引发剂,TP-TEMPO-COF(0.3mmol),24 h后,苯甲醇氧化为苯甲醛的转化率为24.17%。此外,我们还采用混合配体策略,将不同比例的BTz和TEMPO功能化的氨基单体与TP通过超声合成法和室温合成法制备出BTz和TEMPO双功能TP-(BTz_x-TEMPO_(1-x))-COFs。光电流响应和电化学循环伏安测试结果表明该双功能兼具可见光响应和电化学活性。将其作为可见光催化苯甲硫醚催化剂,在室温下使用蓝光LED灯(3 W,425 nm)照射5 h时,TP-(BTz_(0.5)-TEMPO_(0.5))-COF_(RT)对苯甲硫醚的转化率为50.5%,比TP-(BTz_(0.8)-TEMPO_(0.2))-COF_(RT)更高(转化率为15.6%)。

目的：观察针刺“阳陵泉”“足三里”“悬钟”对Ⅱ型胶原蛋白诱导性关节炎（CIA）大鼠关节炎指数（AI）、关节滑膜病理形态、血清相关免疫炎性因子及关节滑膜组织突变型p53(mt-p53)、核转录因子-κB(NF-κB)p65、滑膜过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPARγ)蛋白表达的影响，探讨针刺治疗类风湿性关节炎（RA）的可能机制。方法：随机选取6只雄性SD大鼠作为正常组，其余大鼠采用牛源性Ⅱ型胶原蛋白和完全弗氏佐剂建立CIA模型。将造模成功的18只大鼠随机分为模型组、来氟米特组、针刺组，每组6只。来氟米特组予来氟米特1.9 mg/kg灌胃，每日1次；针刺组针刺“阳陵泉”“足三里”“悬钟”，留针30 min，每日1次。以上均干预12周。每周进行关节炎指数（AI）评分；ELISA法检测血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素（IL）-6、IL-17含量；HE染色法观察大鼠踝关节的病理学变化；Western blot法检测膝关节滑膜组织中mt-p53、NF-κB p65、PPARγ蛋白表达水平；荧光定量PCR法检测膝关节滑膜组织中mt-p53、NF-κB p65、PPARγ mRNA表达水平。结果：与正常组比较，模型组大鼠AI评分升高（P<0.01,P<0.05literature and medicine），血清中TNF-α、IL-6、IL-17含量升高（P<0.01），膝关节滑膜组织中mt-p53、NF-κB p65、PPARγ蛋白及mRNA表达水平均升高（P<0.01,P<0.05）。与模型组比较，针刺组和来氟米特组大鼠AI评分降低（P<0.01,P<0.05），血清TNF-α、IL-6及IL-17含量降低（P<0.01Liproxstatin-1研究购买），关节滑膜组织中NF-κB p65蛋白及mRNA表达水平均降低（P<0.01）,PPARγ蛋白表达水平升高（P<0.05）；来氟米特组mt-p53蛋白和mRNA表达水平降低（P<0.01）,PPARγ mRNA表达水平升高（P<0.01）。与来氟米特组比较，针刺组大鼠滑膜组织中mt-p53、NF-κB p65蛋白及mRNA表达水平升高（P<0.01）,PPARγ mRNA表达水平下降（P<0.01）。HE染色结果显示，模型组大鼠踝关节软骨增生，关节腔缩小，周围软组织见轻度纤维增生和炎性细胞浸润；针刺组和来氟米特组大鼠踝关节增生和炎性细胞浸润状态明显改善。结论：针刺“阳陵泉”“足三里”“悬钟”能够改善CIA大鼠关节炎性反应和肿胀程度，其机CX-5461制可能与抑制大鼠血清中炎性因子的过度表达及调节滑膜组织中mt-p53、NF-κB p65、PPARγ mRNA转录水平和蛋白表达水平有关。

目的:研究党参多糖CPC通过TLR4/NF-κB和MAPKs信号通路调节细胞免疫的作用机制。在本文中,我们通过体外实验,基于分子生物学深入研究了党参多糖CPC如何调节细胞免疫活性。研究结果为进一步开发党参多糖作为治疗药物提供了理论参考,为未来的应用奠定了坚实的科学基础。方法:1.CCK-8法检测党参多糖CPC对RAW264.7细胞增殖活性的影响;2.显微镜法观察CPC干预后,RAW264selleck Z-VAD-FMK.7细胞形态变化;3.Griess Reagent检测NO含量变化,利用DCFH-DA荧光探针法检测胞内ROS生成变化;4.Elisa法检测相关细胞因子(TNF-α、IL-1β、IL-6)的生成水平;5.Western blot免疫印迹法检测NF-κBCCRG 81045抑制剂/MAPKs信号通路蛋白(p38、Phosphop38、NF-κB p65、Phospho-NF-κB p65、ERK、Phospho-ERK、JNK、PhosphoJNK)表达情况;6.免疫荧光法观察NF-κB/MAPKs信号通路下游p65、p38蛋白活化情况;7.通过受体抑制剂及沉默RAW264.7细胞TLR4受体基因,q PCR法检测TLR4基因m RNA表达情况,Western blot法检测TLR4抑制及基因沉默后CPC对NF-κB和MAPKs信号通路激活情况,以验证CPC调节细胞免疫的作用受体。结果:1.党参多糖CPC对RAW264.7细胞未表现出明显毒性,且在一定范围内对RAW 264.7细胞产生促进细胞增殖的作用;2.给予不同浓度CPC(10、25、50μg/m L)作用RAW264.7细胞24 h后,细胞伸出较长伪足呈不规则形激活状态;3.检测细胞上清液中的NO水平,随着CPC浓度的增加,NO释放显著增多(p<0.05);4.荧光倒置显微镜下观察到,CPC处理后,与空白对照组比较,RAW264.7细胞内ROS绿色荧光值呈浓度依赖性显著增高,ROS释放增多;5.CPC处理RAW264.7细胞24 h后,细胞上清中TNF-α、IL-1β、IL-6含量较空白对照组显著增多(p<0.05);6.Western blot结果显示,enterovirus infectionCPC激活NF-κB和MAPKs信号通路呈时间依赖性,NF-κB在1 h时较空白对照组显著升高(p<0.01),2 h达高峰,4 h后活化现象减弱消失。MAPKs在0.5 h显著升高(p<0.01)且达最高峰,2 h后活化消失。不同浓度CPC(10、25、50μg/m L)处理RAW264.7细胞后,信号通路活化水平呈浓度依赖性增高;7.免疫荧光结果显示,NF-κB信号通路在CPC给药2 h时激活最明显,MAPKs在0.5 h最明显,与Western blot结果一致;8.TLR4受体抑制剂及TLR4基因转染沉默结果显示,TLR4介导了CPC对巨噬细胞的免疫激活。结论:研究结果表明,党参均一葡聚糖CPC具有潜在的增强巨噬细胞细胞免疫活性的作用,其作用机制与激活NF-κB和MAPKs信号通路有关,其作用受体很可能是TLR4。

背景：在生长板损伤炎症初期，血小板衍生生长因子BB通过促进间充质祖细胞浸润、软骨形成、成accident and emergency medicine骨反应以及调控骨重塑来促进生长板损伤的修复。目的：总结血小板衍生生长因子BB在生长板损伤修复中的作用机制。方法：检索PubMed、维普、万方数据和中国知网数据库，中文检索词为“生长板损伤，骨桥形成，血小板衍生因子BB，修复”，英文检索词为“growth plate injury,bone bridge,PDGF-BB,repair”，最终筛选66篇文章进行综述。结果与结论：生长板损伤经历早期炎症、血管重建、纤维骨化、结构重塑等病理进Barasertib溶解度程，伴随着软骨细胞、血管内皮细胞、干细胞、成骨细胞、破骨细胞多种细胞交叉对话。血小板衍生生长因子BB作为损伤早期炎症反应的重要因子通过介导多种细胞炎症反应调控损伤修复过程，靶向血小板衍生生长因子BB介导的炎症刺激可能通过改善破骨细胞、成骨细胞、软骨细胞功能活性延缓生长板损伤骨桥形成进程，实现生长板损伤修复。血小板衍生生长因子BB对生长板损伤部位的血管生成和骨修复组织形成以及未损伤生长板的软骨内骨延长功能具有重要作用，抑制血小板衍生生长因子BB启动的血管形成与软骨内成骨之间的偶联效应将有可能实现生长板损MLN4924化学结构伤修复。

背景：溃疡性结肠炎是一种慢性炎症性肠病，激活多条炎症通路，但是关于诱导炎症的致炎因子仍不明确。方法：从GEO中纳入三组人类基因芯片数据集，使用R软件分析其中两组数据集中的差异表达基因（DEGs），并结合研究前期的UC大鼠基因芯片的前20个DEGs，取交集后筛选出UC的核心基因。随后在另一个人类芯片数据集中Alisertib浓度利用ROC曲线评估核心基因的敏感性和特异性，采用CIBERSORT分析核心基因与免疫细胞的关系，使用蛋白质-蛋白质相互作用网络图识别与核心基因共表达的蛋白质并进行功能富集分析，将核心基因与治疗UC的抗炎中药进行分子对接，最后通过体外实验验证核心基因与炎症的相关性以及抗炎中药对核心基因的作用。结果：S100A8是溃疡性结肠炎的核心基因，具有高敏感性和特异性(AUC=0.953)，S100A8与中性粒细anatomical pathology胞、活化的肥大细胞和单核细胞等免疫炎性细胞呈正相关，PPI及功能富集分析发现S100A8与RAS信号通路、PI3K-AKT信号通路、mTOR信号通路等炎症通路相关，抗炎中药雷公藤红素、黄芩苷、小檗碱与S100A8均有较好的结合力，体外实验提示S100A8在炎症中发挥重要作用，雷公藤红素、黄芩苷、小檗碱均能降低S100A8表达。结论：S100A8可能是UC的致炎核心基因，有望成为新的DS-3201化学结构治疗靶点。

目的:比较原发性EB病毒(EBV)感染及EBV再激活相关噬血细胞性淋巴组织细胞增生症(HLH)患儿的临床特征，探讨不同EBV感染Talazoparib状态对HLH临床指标及预后的影响。方法:收集河南省儿童医院2016年6月至2021年6月收治的51例EBV相关HLH患儿的临床资料，根据血浆EBV抗体谱检测结果，将患者分为EBV原发性感染HLH组(18例)和EBV再激活HLH组(33例)。分析比较两组的临床特征、实验室指标及预后。结果:两组患者在年龄、性别、肝肿大、脾肿大、淋巴结肿大、外周血中性粒细胞数、血红蛋白含量、血小板数、血浆EBV-DNA载量、乳酸脱氢酶、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、白蛋白、纤维蛋白原、甘油三酯、铁蛋白、骨髓噬血现象、NK细胞活性、sCD25等方面均无显著差异(P> 0.05),EBV再激活HLH组中枢神经系统受累及CD4/CD8明显高于原发EBV感染HLH组(P <0.05)，而总胆红素明显低于原发EBV感染HLH组(P <0.05);参照HLH-2004方案治疗后，EBV再激活HLH组患者的缓解率、5年OSsubcutaneous immunoglobulin率、5年EFS率均明显低于EBV原发感染HLH组(P <0.05)。结论:EBV再激活HLH比原发感selleck染HLH更易引起中枢受累，预后更差，需加强治疗。

目的：观察益气扶正养阴化痰法验方联合酪氨酸激酶抑制剂（TKIs）治疗Ⅲa～Ⅳ期表皮生长因子受体（EGFR）突变型非小细胞肺癌对延缓TKIs耐药及患者生存质量的影响。方法：回顾性分析2016年1月至2019年1月在泉州市中医院诊断为Ⅲa～Ⅳ期EGFR突变型非小细胞肺癌的80例病例，根据治疗方案不同归为对照组和观察组，各40例。对照组患者采用单纯给予EGFR–TKIs治疗，观察组患者在对照组基础上联合益气扶正养阴化痰法验方治疗，记录Canagliflozin供应商两组患者的生存质量，安全性，近期疗效和疾病进展时间。结果：治疗后观察组患者生活质量改善明显优于对照组，差异具有统计学意义（P <0.05）。治疗期间两组患者均未发生Ⅲ级以上的皮疹和腹泻。观察组患者皮疹发生率为75.00%，与对照组的77.50%比较，差异无统计学意义（P> 0.05）；观察组患者腹泻发生率为52.5%，与对照组的55.00%比较，差异无统计学意义（P> 0.05）。观察组患者的疾病控制率（DPEG300研究购买CR）为82.50%，高于对照组的70.00%，差异具有统计学意义（P <0.05）。对照组患者中位疾病进展时间为11.5月，观察组为15.0月，延缓TKIs耐药3.5月。经Logrank检验，差异具有统计学意义（P <0.05）。结论：益气扶正养阴化痰法验方联合TKIs治疗Ⅲa～Ⅳ期EGFR突变型非小细胞肺癌可明Probiotic characteristics显改善患者生存质量，延缓患者耐药，提高生存质量。

黄芪即豆科黄芪属植物蒙古黄芪(Astragalus membranaceus var.mongholicus(Bunge)P.K.Hsiao)或膜荚黄芪(Astragalus membranaceus)的干燥根,在动物饲料中添加复方中草药有提高动物机体免疫力、改善机体抗氧化能力等作用,黄芪常作为添加剂中重要的一味药材。研究表明,黄芪的地上部分也含有大量药用活性成分。本试验以2年生的蒙古黄芪为材料,分别在现蕾期、盛花期、结荚期刈割黄芪,测定其农艺指标、根系形态学指标与干草营养指标;将黄芪茎叶制成半干青贮,测定青贮的营养指标和发酵指标;选取结荚期的根部、茎叶、青贮后茎叶样本进行代谢物的广靶分析,利用分析数据Proteasome抑制剂为黄芪青贮实际应用提供理论依据,主要结果为下:(1)刈割时期不同对黄芪的农艺指标有一定影响,黄芪单株的平均高度、茎叶鲜重、地上部分总产量三个指标中,出现盛花期>现蕾期>结荚期的结果,其中盛花期的三个指标分别为165.86cm、123.86g、17682.32kg/hm2,随着生长期的推移,黄芪茎叶比呈现上升趋势,鲜干比呈下降趋势,即一个生Talazoparib半抑制浓度长周期内,随着植物生长茎秆的比例逐渐升高,含水量逐渐降低,其中现蕾期黄芪茎叶比指标最低为2.69,结荚期最高为4.56;现蕾期黄芪鲜干比指标最高为3.57,结荚期最低为2.95。(2)两年生蒙古黄芪茎叶作为饲草有较高的营养价值,其中现蕾期饲草的饲用品质最高,按照国家豆科牧草干草质量分级,酸性洗涤纤维为25.47%达到特级水平、中性洗涤纤维44.60%达到一级水平,粗蛋白含量13.09%达到三级水平,其相对饲用价值也最高capacitive biopotential measurement为186.98。(3)两年生蒙古黄芪茎叶半干青贮效果较好,按照德国农业协会(deutche Landwirtschafts Geseutschaft)青贮质量感官评分标准,三个刈割期的青贮感官品质上均达到一级水平,营养品质方面现蕾期的酸性洗涤纤维和中性洗涤纤维含量最低分别为39.13%、50.73%、粗蛋白含量最高为12.81%,结荚期的酸性洗涤纤维和中性洗涤纤维含量最高分别为39.90%、60.4%、粗蛋白含量最低为9.71;三个刈割期黄芪青贮的粗脂肪没有达到显著性差异水平,而粗灰分含量均低于最高限指标12.5%;发酵品质方面现蕾期的氨态氮/总氮最低为3.4%,说明蛋白质分解程度低青贮品质好,其他指标并未表现出显著性差异。(4)本试验通过广靶分析比较了结荚期黄芪根部、黄芪茎叶、黄芪茎叶青贮后的代谢物差异,首先进行差异代谢物通路分析,黄芪茎叶与黄芪根部的差异代谢物在黄酮类代谢通路显著富集,且黄芪茎叶中的黄酮类物质更多;黄芪茎叶青贮后与青贮前的差异代谢物显著富集到黄酮类代谢通路、嘌呤代谢通路、苯丙烷类生物合成通路中,其结果显示青贮过程中黄芪的代谢物变化趋势与应对胁迫时的代谢物变化相似。(5)从通过广靶检测出的556种代谢物中选出162种参与黄酮类代谢通路、萜类和聚酮化合物的代谢通路的物质进行比较,发现黄芪茎叶与根部的162种代谢物比较中,共有29个上调,13个下调,说明黄芪茎叶的次生代谢活动较根部更活跃;在黄芪茎叶青贮后与青贮前的162种代谢物对比中,共有21个上调18个下调,说明在青贮过程中可能发生了次生代谢活动。筛选出16种黄芪中含量较高的有药用效果的活性物质(包括黄芪甲苷Ⅳ与毛蕊异黄酮),对其进行差异倍数分析,发现黄芪茎叶中活性物质含量多于黄芪根部,但黄芪甲苷Ⅳ、毛蕊异黄酮、芒柄花黄素的含量低于黄芪根部;在对黄芪茎叶青贮前后的16种活性物质的比较中发现,共有9种代谢物达到显著相差异水平,其中5种上调4种下调,而毛蕊异黄酮与黄芪甲苷Ⅳ并未有显著性差异,说明半干青贮并未对黄芪药用活性成分造成明显负面影响。本次试验的结果为,黄芪茎叶作为饲草有较好的饲用品质,并且青贮后没有明显降低茎叶中的要用活性成分,且能延长存储时间改善适口性,因此黄芪茎叶适宜用于青贮。