PDK1信号通路

目的 探讨褪黑素(MT)通过调控核因子E2相关因子2(Nrf2)信号通路对甲醛(FA)吸入致大鼠急性肺损伤(ALI)的保护作用及其selleck产品机制。方法 50只雌性Wistar大鼠随机分为Control组、FA组、FA+MT 5 mg/kg组、FA+MT 10 mg/kg组和FA+MT 20 mg/kg组，每组10只。除Control组外，其他各组连续21 d每天吸入3 mg/m~3 FA以构建染毒模型，然后用不同MT剂量治疗14 d, MT治疗期间继续染毒。苏木精-伊红(HE)染色观察肺组织病理学变化，称重测肺水含量和肺系数，吸光光度法测肺组织谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)和8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)水平，酶联免疫吸附实验(ELISA)测肺泡灌洗液肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6和IL-1β的浓度，Western blot检测肺组织Nrf2、血红素氧合酶-1(HO-1)、核因子-κB(NF-κB)和磷酸化核因子-κB(p-NF-κB)的蛋白表达水平，定量聚合酶链反应(qPCR)检测肺组织Nrf2、HO-1及Kelch样ECH相关蛋白1(Keap1)的mRNA表达水平。结果 与Control组相比，FA组大鼠出现明显肺损伤；肺组织GSH、SOD水平下降，8-OHdG水平升高(P<0.05);肺泡灌洗液TNF-α、IL-6和IL-1β水平升高(P<0.05);肺组织Nrf2、HO-1蛋白表达水平降低(P<0.05),p-NF-κB蛋白表达水平升高(P<0bio-based inks.05);肺组织获悉更多Nrf2、HO-1的mRNA相对表达量降低，Keap1的mRNA相对表达量升高(P<0.05)。与FA组相比，MT组大鼠肺损伤有好转；肺组织GSH、SOD水平升高(P<0.05),8-OHdG水平下降(P<0.05);肺泡灌洗液TNF-α、IL-6和IL-1β水平下降(P<0.05);肺组织Nrf2、HO-1蛋白表达水平升高(P<0.05),p-NF-κB蛋白表达水平降低(P<0.05);肺组织Nrf2、HO-1的mRNA相对表达量升高(P<0.05),Keap1的mRNA相对表达量降低(P<0.05),且均呈剂量依赖性。结论 MT可以通过调控Nrf2/Keap1/HO-1信号通路减轻氧化应激和炎症反应，缓解FA暴露诱导的急性肺损伤。

研究背景注意控制损伤是抑郁发生、发展及维持的重要危险因素。已有大量研究在抑郁障碍患者和双相障碍患者中揭示了注意控制损伤与抑郁的关系,但现有的行为研究以及脑成像研究均难以区分注意控制的具体过程,且缺少对一般性注意控制及情绪性注意控制的系统测量,以至于抑郁相关的注意控制损伤的认知神经机制尚不清楚。此外,注意控制理论在抑郁人群中的应用仍需进一步验证。研究目的以注Emricasan意控制理论为理论框架,了解抑郁障碍患selleck VP-16者(Majordepressiondisorder,MDD)、双相障碍患者(Biploardisorder,BD)及正常对照组(Healthycontrols,HC)在高低认知负荷下一般性与高认知负荷下情绪性注意控制损伤的特点与差异,揭示抑郁相关的注意控制内在认知过程。研究对象及方法为提高检验效能,病例组:对照组按照1:2的比例进行招募。以24名MDD患者、25名BD患者及57名HC个体为研究对象,结合事件相关电位技术,采用低认知负荷的线条视觉搜索任务及高认知负荷的面孔视觉搜索任务,在一般性和情绪性刺激干扰下考察被试的注意控制特点。采用基于置换检验的单因素方差分析及重复测量方差分析进行差异检验,Spearman相关系数评价各变量间的相关性,多重比较的p值采用FDR校正。研究结果1)MDD组与BD组的注意控制量表得分显著低于HC组(p=0.042)。2)在线条视觉搜索任务中,MDD组及BD组与正常对照组准确率无显著差异(p=0.111),而相比正常对照组,MDD组及BD组总体反应时更长(p=0.053),MDD组与BD组无显著差异(pFDR=0.211)。脑电结果表明,与HC组相比,MDD组与BD组在无分心物试次下目标诱发的N2pc成分平均振幅均减弱HC组(HC:-1.63μV,BD:-1.03μV,MDD:-1.15μV,p=0.079)。而在MDD组及BD组中未观察到分心物诱发的Pd成分。各组均未观察到分心物诱发的N2pc成分。3)在面孔视觉搜索任务的无分心物试次及颜色分心物试次中,相对HC组,MDD组与BD组在这两种任务条件下的准确率更低且反应时更长(p1=0.010,p2=0.062)。脑电结果表明,虽然统计学数据显示无显著差异,但从数值上看,MDD组及BD组的目标诱发的N2pc成分平均振幅均小于HC组(HC:-1.76μV,BD:-1.38μV,MDD:-1.20μV,p=0.047)。4)在颜色分心物试次及各情绪分心物试次中,MDD组与BD组总体准确率与反应时无显著差异(pFDR=0.309);与HC组相比,表现出更低的准确率、更长的反应时(p=0.003,p2=0.047)。脑电结果表明,组别与试次的交互作用临界显著(p=0.063):BD组在颜色分心物及愤怒分心物试次下目标诱发的N2pc振幅大于MDD组,而在高兴分心物及悲伤分心物试次下目标诱发的N2pc振幅小于MDD组;HC组在各试次下目标诱发的N2pc振幅均大于MDD组、BD组。尽管统计学检验显示无显著差异,但从数值上看,MDD组及BD组的分心物诱发的Pd成分总体平均振幅均小于HC组(HC:0.32μV,BD:0.25μV,MDD:0.13μV,p=0.340)。5)注意控制量表得分与行为反应时显著负相关(rs:-0.21～-0.24,p<0.05),与目标诱发的N2pc平均振幅显著负相关(rs:-0.20～-0.23,p<0.05),行为反应时与目标诱发的N2pc平均振幅显著正相关(rs:0.20～0.23,p<0.05)。研General psychopathology factor究结论1)MDD患者与BD患者存在一般性注意控制损伤,行为表现上主要表现为加工效能下降,操作表现无影响,其具体的内在认知加工过程为抑郁个体减弱了对分心物的自上而下的注意抑制及对目标的自上而下的注意选择资源的投入。随着认知负荷水平升高,加工效能及操作表现均下降,自上而下的对目标的注意选择资源有限。抑郁个体在自下而上的注意选择过程未受损。2)MDD患者与BD患者存在情绪性注意控制损伤,加工效能及操作表现均下降,总体自上而下的注意资源不足。MDD患者主要表现为更少关注高兴和悲伤面孔,BD患者主要表现为更多关注高兴面孔。本研究系统揭示了不同认知负荷下抑郁个体的注意控制损伤认知神经机制,为抑郁个体防治工作提供科学依据。

目的 探讨瞬时受体电位阳离子通道(transient receptor potential canonical, TRPCabiotic stress)促进大鼠肾小球系膜细胞(HBZY-1)细胞外基质(extracellular matrix, ECM)沉积的作用机制。方法 免疫荧光染色方法观察TRPC1和TRPC6在HBZY-1细胞上的定位及表达；给予AngⅡ干预HBZY-1Tofacitinib说明书细胞后，应用qRT-PCR和Western blotting方法检测Gαq/PLCβ4/TRPC信号通路关键蛋白和ECM沉积指标[α-SMA、CollagenⅢ(ColⅢ)和Fibronectin(Fn)]的mRNA和蛋白表达；siRNA技术沉默TRPC1和TRPC6表达后，检测ECM沉积指标的表达；Fluo-4AM Ca~(2+)成像技术测定细胞内Ca~(2+)内流的变化情况。结果 TRPC1和TRPC6在HBZY-1细胞中均有表达，主要定位在细胞膜和胞质。AngⅡ刺激后，可以激活Gαq/PLCβ4/TRPC信号通路，表现为Gαq、PLCβ4、TRPC1和TRPC6的mRNA和蛋白表达均升高(P<0.05)。细胞内的Ca~(2+)内流增加(P<0.01),ECM沉积指标α-SMA、ColⅢ和Fn的mRNA和蛋白表达上调(P<0.05)。RNA干扰技术沉PCI-32765化学结构默TRPC1和TRPC6表达后，导致胞内Ca~(2+)内流减少(P<0.05),HBZY-1细胞ECM沉积指标的mRNA和蛋白表达均下调(P<0.05)。结果表明，沉默TRPC表达可以抑制AngⅡ诱导的HBZY-1细胞ECM沉积，且可能与减少[Ca~(2+)]_i内流有关。结论 TRPC可能是肾脏纤维化新的治疗靶点。

目的 探究鸢尾素(Irisin)对模拟失重下氧化应激和心肌细胞凋亡的影响。方法 使用2D回转器建立细胞模拟失重模型，将培养的H9C2细胞随机分为对照组(CON组)、Irisin处理组(Irisin组)、模拟失重组(SMG组)、模拟失重+Irisin保护组(SMedicare savings programMG+Irisin组)。分别采用qRT-PCR检测含Ⅲ型纤连蛋白结构域蛋白5(FNDC5)mRNA表达水平，ELISA检测细胞上清Irisin含量，Western blotting检测FNDC5、Irisin和氧化应激、凋亡相关蛋白表达水平，流式细胞术检测细胞凋亡率、活性氧(ROS)水平，获悉更多试剂盒检测丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)水平和超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果 体外实验证明，与CON组细胞相比，SMG组H9C2细胞中FNDC5和Irisin表达减少、细胞上清中Irisin含量减少(均P<0.01),提示模拟失重后细胞内源Irisin生成减少。H9C2细胞模拟失重72 h后ROS生成和MDA含量增加、GSH含量降低(均P<0.01selleck激酶抑制剂),SOD活性降低(P<0.01),SOD1、SOD2蛋白表达降低(均P<0.01),提示模拟失重后H9C2细胞氧化应激水平升高。且与CON组相比，SMG组细胞凋亡率增加，cleaved caspase-3蛋白表达增加，抗凋亡蛋白Bcl-2表达降低(均P<0.01),促凋亡蛋白BAX表达升高(P<0.05),提示模拟失重后H9C2细胞凋亡增加。与SMG组相比，SMG+Irisin组细胞的ROS、MDA水平降低(均P<0.01),GSH含量，SOD活性，SOD1、SOD2蛋白表达明显升高(均P<0.01),细胞凋亡率降低(P<0.01),BAX、cleaved caspase-3表达显著降低(均P<0.01),Bcl-2表达明显增加(P<0.01)。结论 Irisin可通过减轻氧化应激水平，抑制心肌细胞凋亡，缓解模拟失重所致的心肌细胞损伤，具有成为抗心肌损伤候选药物的潜力。

目的：运用网络药理学方法探究加味丹栀逍遥散治疗抑郁症的作用机制，并通过分子对接和动物实验验证加味丹栀逍遥散治疗抑郁症的潜在靶点。方法：基于中药系统药理学数据库与分析平台(traditional Chinese medicine systems pharmacology database and analysis platform, TCMSP)、中医药百科全书数据库(The encyclopedia of traditional Chinese medicine, ETCM)等筛选加味丹栀逍遥散的化学成分及作用靶点。使用DisGeNet、人类孟德尔遗传数据库(online mendelian inheritance in man, OMIM)等查询抑郁症相关靶点，并采用STRING扩充二级靶点得到抑郁症的全部靶点。将加味丹栀逍遥散活性成分相关靶点与抑郁症靶点取交集，得到加味丹栀逍遥散治疗抑郁症的相关靶点。借助Cytoscape软件构建蛋白质互作(protein-protein interaction,Medical officer PPI)网络。使用DAVID对潜在靶点进行基因本体(gene ontology, GO)富集分析和京都基因与基因组百科全书(kyoto encyclopedia of genes and genomes, KEGG)信号通路富集分析。通过AutoDock对核心靶点及成分进行分子对接。48只SPF级雄性C57BL/6小鼠随机分为正常组8只和造模组40只，造模组小鼠建立慢性不可预知温和应激(chronic unpredictable mild stress, CUMS)模型，6周后将造模组小鼠分为CUMS组、氟西汀组(20 mg·kg~(-1))及加味丹栀逍遥散低(15.9 kg·L~(-1))、中(31.8 kg·L~(-1))、高(47.7 kg·L~(-1))剂量组，每组8只，以10 mL·kg~(-1)体积灌胃给予相应药物，正常组和模型组灌胃给予等体积的生理盐水，每天1次，持续28天。采用蔗糖偏好实验、悬尾实验和旷场实验评估小鼠的行为学能力；HE染色观察小鼠脑部海马区病理学变化；DCX染色观察海马区新生神经元变化；Western Blot检测PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT及BDNF蛋白表达水平。结果：网络药理学分析显示，加味丹栀逍遥散活性成分164个，对应靶点332个；抑郁症相关靶点1 432个；将加味丹栀逍遥散相关靶点和抑郁症相关靶点取交集，得到加味丹栀逍遥散治疗抑郁症的潜在靶点147个；PPI网络分析得到9个核心靶点；KEGG富集分析发现，潜在靶点主要涉及细胞凋亡、磷脂酰肌醇3-激酶(phosphoinositide 3-kinase, PI3K)-蛋白激酶B(protein kinase B,PKB,又称AKT)信号通路等。分子对接结果表明山柰酚、柚皮素、槲皮素与AKT结合能力最强。动物实验结果显示，与正常组比较，CUMS组小鼠糖水偏好率、p-AKT、BDNF蛋白表达水平显著降低(P<0.01),悬尾不动时间显著升高(P<0.05);与CUMS组比较，加味丹栀逍遥散组小鼠的糖水偏好率、p-AKT、BDNF蛋白表达水平显著上升(P<0.05),悬尾不动时间Alisertib抑制剂显著降低(P<0.05VE-822说明书)。HE染色显示，CUMS组小鼠海马组织CA3区神经元结构松散，细胞数量减少，排列不规则；给予加味丹栀逍遥散干预的小鼠CA3区神经元结构更加完整，细胞数量接近正常组。免疫荧光显示，CUMS小鼠海马DG区DCX阳性细胞数量明显减少；给予加味丹栀逍遥散干预的小鼠海马DG区DCX阳性细胞数量显著增加。结论：加味丹栀逍遥散治疗抑郁症具有多成分-多靶点-多通路的特点，其作用机制可能与促进细胞增殖、影响神经元的新生有关。

目的 探讨丹参酮ⅡA(TanⅡA)对大鼠糖尿病肾脏疾病(DKD)的保护作用及机制。方法 高脂饮食联合链脲佐菌素注射液(STZ)复制大鼠DKD模型。将实验动物分为对照组、模型组、TanⅡA组、缬沙坦组。实验过程中动态检测各组大鼠的体重、血糖变化，收集血、尿标本检测生化指标；收集肾组织进行苏木精-伊红染色(HE)、过碘酸雪夫染色(PAS)、透射电镜以及免疫组化检测。结果 TanⅡA可增加DKD大鼠体重(P<0.01),降低血尿素氮(BUN)、24 h尿蛋白和血清肌酐(Scr)水平(P<0.05),而用药各组空腹血糖(FBG)差异无统计学意义。TanⅡA组肾组织HE染色后肾小管损伤分级、PAS阳genetic overlap性的肾小球系膜区统计均较DKD组减轻(P<0.05)。TanⅡA改善DKD大鼠的氧化应CB-839纯度激与细胞焦亡：透射电镜观察到TanⅡA组和缬沙坦组大鼠肾小球微血管内皮细Tamoxifen胞(RGMEC)的细胞膜损伤明显减轻；TanⅡA组和缬沙坦组的硫氧还蛋白相互作用蛋白(Txnip)、含NLR家族Pyrin域蛋白3(Nlrp3)表达减少(P<0.01)。结论 丹参酮ⅡA可以通过调节Txnip/Nlrp3炎症小体，抑制大鼠肾小球微血管内皮细胞焦亡，从而延缓DKD的进展。

目的 探讨血清抗磷脂酶A_2受体抗体(serum anti-phospholipase A_Medical extract2 receptor antibody, sPLA_2R-Ab)和肾小球磷脂酶A_2受体抗原(glomerular phosphoLapatinib化学结构lipase A_2 receptor antigen, gPLA_2R-Ag)对特发性膜性肾病(idiopathic membranous nephropathy, IMN)的临床价值。方法 选取2019年1月～2021年10月安徽医科大学第一附属医院肾内科收治的118例IMN患者，根据sPLA_2R-AbMCC950分子量水平，分为阴性组(n=44),1∶10效价组(n=16),1∶32效价组(n=40)和1∶100效价组(n=18);根据gPLA_2R-Ag的沉积情况，分为阴性组(n=10)和阳性组(n=108)。采用Kappa分析sPLA_2R-Ab和gPLA_2R-Ag检测的一致性，单因素分析比较患者的临床资料，采用Spearman相关性分析评价sPLA_2R-Ab效价与血清白蛋白(serum albumin, Alb)和24h尿蛋白(urine protein, UP)之间的相关性；采用Kaplan-Meier生存分析曲线比较sPLA_2R-Ab水平与临床缓解率的关系。结果 sPLA_2R-Ab和gPLA_2R-Ag一致性分析Kappa值为0.288(P均<0.05);sPLA_2R-Ab阴性组与1∶100效价组血Alb、24h UP比较，差异均有统计学意义(P均<0.05);Spearman相关性分析显示，sPLA_2R-Ab与Alb、24h UP的相关系数分别为-0.405、0.418(P均<0.05);68例IMN患者确诊后规律治疗并随访，收集6个月内随访资料，12例(17.65%)患者得到了完全缓解，23例(33.82%)达到部分缓解，其余33例(48.53%)未缓解，随访期间sPLA_2R-Ab水平越低，缓解率越高(P<0.05);gPLA_2R-Ag阴性组与阳性组的sPLA_2R-Ab阳性率比较，差异有统计学意义(P<0.05),而血Alb和24h UP比较，差异无统计学意义(P>0.05)。结论sPLA_2R-Ab和gPLA_2R-Ag对IMN具有重要的临床价值，有条件者应结合应用。

目的 观察莲连胶囊治疗脾胃湿热型幽门螺杆菌（HpDecitabine）相关性慢性非萎缩性胃炎的临床效果。方法 选取2021年6月至2022年3月上海中医药大学附属市中医医院脾胃病科收治的脾胃湿热型Hp相关性慢性非萎缩性胃炎患者78例，按照随机数字表法将其Berzosertib化学结构分为对照组和治疗组，每组39例。对照组采用铋剂四联疗法，治疗组在对照组基础上加用莲连胶囊，两组疗程均为14 d。比较两组Hp根除率、临床疗Primary B cell immunodeficiency效、安全性及治疗前后中医证候积分、白细胞介素（IL）-8的变化情况。结果 治疗过程中治疗组、对照组各退出4例。两组Hp根除率比较，差异无统计学意义（P>0.05）。治疗组临床疗效优于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。治疗后，两组中医证候积分均低于治疗前，且治疗组低于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。治疗后，治疗组IL-8水平低于本组治疗前和对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。两组治疗期间血常规及肝肾功能均未出现异常。结论 莲连胶囊联合铋剂四联疗法治疗脾胃湿热型Hp相关性慢性非萎缩性胃炎效果较好，能改善临床症状，降低炎症因子IL-8水平，用药安全。

目的 探讨艾司氯胺酮在儿童烧伤扩创换药手术中的应用及其预防Erastin配制手术后寒战的效果。方法 将我院89例烧伤扩创换药手术患儿分组，按照随机数字表法分为对照组44例，观察组45例，选取时间为2021年01月至2022年12月。对照组给予芬太尼麻醉诱导，观察组给予艾司氯胺酮诱导，观察两组患者麻醉相关指标(睫毛反应消失时间、疼痛反应消失时间、术后苏醒时间)、血流动力学稳定性[心率(HR),平均动脉压(MAP)]、术后疼痛程度[视觉模拟评分法(VAS)]、体温变化及术后寒战发生情况。结果 观察组患者麻醉效果优于对照组(P<0.05);两组患者诱导前HR及MAP,拔管5 min后HR对比无统计学意义(P>0.05),观察组患者诱导后5drug-resistant tuberculosis infection min HR及MAP水平、拔管后5 min MAP水平均较对照组高(P<GSK1120212纯度0.05);随术后时间的延长，两组患者疼痛程度降低，且观察组低于对照组(P<0.05);两组患者诱导前和拔管后5 min温度对比无统计学意义(P>0.05),但观察组两时间点体温差较对照组低(P<0.05);术后观察组寒战发生率(24.44%)低于对照组(45.45%)(P<0.05)。结论 儿童烧伤扩创换药手术中应用艾司氯胺酮可提高麻醉效果，保持血流动力学稳定，降低术后疼痛程度，缓解体温变化，减少术后寒战的发生。

目的 探讨老年宫腔镜手术患者应用地佐辛或芬太尼联合丙泊酚的血流动力学、应激及认知功能的影响。方法 选择2020年3月-2022年3月北京市通州区妇幼保健院收治的116例行宫腔镜手术的老年患者，随机数字表法分CB-839分子式为2组，每组58例。芬太尼组术中采用芬太尼联合丙泊酚静脉麻醉，地佐辛组术中采用地佐辛联合丙泊酚静脉麻醉。比较2组麻醉诱导时间、手术时间、麻醉苏醒时间、麻醉后监测治疗室留置时间、术In Vivo Testing Services中丙泊酚用量以及围术期血流动力学、应激反应、认知功能以及并发症差异。结果 地佐辛组麻醉苏醒时间、麻醉后监测治疗室留置时间短于芬太尼组（均P=0），术中丙泊酚用量少于芬太尼组（P=0）。2组术中心率、平均动脉压、呼吸频率和血清皮质醇、促肾上腺皮质激素、内皮素-1水平呈先增高后降低变化（均P=0），经皮血氧饱和度呈先降低后增高变化（P=0）。地佐辛组T_(1-4)时心率、平均动脉压、呼吸频率和血清皮质醇、促肾上腺皮质激素、内皮素-1水平低于芬太尼组（均P=0），经皮血氧饱和度高于芬太尼组（P=0）。2组术后简易智能精神状态检查量表（MMSE）评分、中文版蒙特利尔认知评估量表（MoCA）评分呈降低趋势（均PSB203580采购=0）。地佐辛组M_(1-3)时MMSE评分、MoCA评分高于芬太尼组（均P=0）。地佐辛组体动、寒颤、低经皮血氧饱和度发生率低于芬太尼组（P=0.042、0.042、0.022）。结论 应用地佐辛联合丙泊酚麻醉术中血流动力学更稳定，应激反应更低，术后认知功能损伤小，安全性高，较芬太尼联合丙泊酚麻醉可能更适合老年宫腔镜患者。