PDK1信号通路

目的：观察基于经络辨证的温灸刮痧疗法治疗肝郁痰凝型乳腺增生的临床疗效。方法 :将60例肝郁痰凝型乳腺增生患者按照随机数字表法分为治疗组和对照组，每组各30例。治疗组采用经络辨证的温灸刮痧疗法治疗，对照组采用口服小金丸治疗，2组均治疗3个月。观察比较2组治疗前后乳房疼痛、肿块大小、肿块硬度评分，并评价综合疗效。结果：治疗过程中，治疗组脱落3例，对照组脱落4例。总有效率治疗组为88.89%此网站(24/27),对照组为61.54%(16/26),2组比较，差异有统VE-822采购计学意义(P<0.05)。治疗后2组乳房疼痛、肿块大小、肿块硬度评分均较治疗前明显减少，且治疗组的改善幅度更大，差异均Brazillian biodiversity有统计学意义(P<0.05)。结论 :基于经络辨证的温灸刮痧疗法治疗肝郁痰凝型乳腺增生疗效颇佳，且操作性及重复性强，值得临床推广。

目的 分析经巩膜睫状体光凝术治疗难治性青光眼短期预后情况以及影响因素。方法 回顾性病例研究。收集2018年1月至2021年12月安徽医科大学第二附属医院的难治性青光眼90例(90只眼)。分别收集术前及术后1 d、1周、1个月、3个月、6个月患者检查情况，记录视力、眼压、降眼压药物和任何并发症，并根据患者资料对影响经巩膜睫状体光凝术治疗难治性青光眼早期预后的相关因素进行初步筛选，采用多因素Logistic回归模型分析其影响因素。结果 患者术前Tofacitinib说明书、术后1 dStaurosporine供应商、1周、1个月、3个月、6个月平均眼压分别为(43.9±12.0)、(25.57±8.5)、(23.5±7.5)、(22.3±8.1)、(23.2±8.4)、(24.2±9.1)mmHg;重复测量方差分析结果显示不同时间点测量的眼压与术前相比差异均有统计学意义(F=76.031,均P<0.01)。随着时间延长，患者手术成功率逐渐减少，研究中术后6个月总体累积成功概率为67.7%。多因素回归分析结果显示：术前眼压和术后再次治疗是经巩膜睫状体光凝术治疗难治性青光眼短期预后独立保护因素(P<0.05);性别是其非独立minimal hepatic encephalopathy影响因素(均P>0.05)。结论 经巩膜睫状体光凝术是治疗难治性青光眼有效的手术方式，不良反应较少，术前眼压和术后再次治疗影响患者手术成功率。

酪氨酸激酶参与多种癌症的发生发展过程,并且以其为靶点的抑制剂类药物由于其相较于传统化疗药物所具有的突出疗效,近年来一直是药物研发的热点。但是经研究发现酪氨酸激酶抑制剂的使用表现出了许多不良反应包括心脏毒性,甚至会导致心力衰点击此处竭。伊马替尼(IMA)于2001年经FDA批准成为第一代小分子BCR-ABL酪氨酸激酶抑制剂,临床用于治疗慢性粒细胞白血病以及不可移除或已发生转移的胃间质实瘤。Kerkela等人在2006年首次系统地提出IMA会导致心脏毒性,在使用过程中应注意检测患者的心脏功能。因此,有必要去研究IMA导致心脏毒性的可能机制以及保护患者避免发生心脏毒性的药物。目前有关IMA所诱导的心脏毒性的发病机制包括内质网压力过载、氧化应激、细胞凋亡以及自噬等。铁死亡是一种不同于细胞凋亡和自噬的细胞调控死亡方式,其主要特征是细胞内铁离子的蓄积以致脂质过氧化物的堆积超过了以谷胱甘肽(GSH)为底物的磷脂氢过氧化物酶所维持的氧化还原能力。盐酸小檗碱(Ber)作为天然生物碱类物质,主要存在于黄连的根茎中,具有抗菌、抗炎、抗肿瘤以及心脏保护作用。目前为止,铁死亡是否参与IMA所致的心脏毒性以及Ber对IMA的保护作用机制是否与铁死亡有关还未见相关报道。本实验在前期研究中发现伊马替尼可以通过下调Nrf2信号通路诱发铁死亡从而导致心脏毒性,进而通过体内外实验探讨了Ber对IMA诱导心脏毒性的保护作用是否与Nrf2依赖性铁死亡相关。体外实验:在前期实验中用不同浓度的IMA溶液处理H9c2心肌细胞24 h,得到IMA对H9c2的IC_(50)为23.44μM,因此采用20μM IMA溶液处理24 h为模型组。将细胞一共分为6组:空白对照组(Control),模型组(IMA),Ber预处理组(10μM、20μM、40μM),铁死亡抑制剂组(Fer-1non-coding RNA biogenesis)。采用MTT实验探究Ber和IMA对细胞生长情况的影响,通过TMRE、DCFH-DA、Calcein-AM荧光探针分别检测H9c2细胞中线粒体膜电位(MMP)、活性氧(ROS)、可变铁池(LIP)水平以及油红染色检测细胞中脂质沉积的情况。通过转染Nrf2质粒并且使用免疫荧光法检测细胞中Nrf2的表达水平。最后采用蛋白免疫印迹法(Western blot)来分析铁死亡相关蛋白的表达水平。体内实验:采用持续腹腔注射50 mg/kg剂量的IMA溶液14天建立IMA诱导的C57BL/6J小鼠心脏毒性模型。将小鼠随机分为6组,每组8只:空白对照组(Control),模型组(IMA),Ber低、中、高剂量组(分别提前2 h灌胃20 mg/kg/d、40 mg/kg/d、80 mg/kg/d的Ber溶液,2 h后腹腔注射50 mg/kg/d的IMA溶液),铁死亡抑制剂(Fer-1)组(提前2 h腹腔注射1 mg/kg/d的Fer-1溶液,2 h后腹腔注射50 mg/kg/d的IMA溶液)。给药完毕后,采用心电图(ECG)监测小鼠心脏功能,记录心电图波形,眼球取血并解剖小鼠,记录小鼠体重、心脏重量等参数。然后检测小鼠血清心肌酶谱水平并且采用HE染色、MASSON染色、油红O染色分别观察小鼠心脏组织的心肌损伤以及纤维化、脂质沉积情况;通过试剂盒检测丙二醛(MDA)、GSH、组织铁水平,并通过免疫组化和Western blot分析铁死亡关键蛋白GPX4,Nrf2信号通路以及铁死亡相关蛋白表达水平探究Ber对IMA所诱导心脏毒性的保护作用机制。细胞实验中,结果表明预先给与不同浓度的Ber溶液处理12h,均可以明显提高IMA溶液刺激下的H9c2细胞增殖活性,恢复心肌细胞线粒体膜电位并且降低胞内ROS、LIP和脂质沉积的水平。转染Nrf2目标质粒后,结果显示Nrf2表达水平明显上调,IMA可以显著降低Nrf2表达水平,Ber预处理可以上调Nrf2的表达。Western blot结果表明VX-765分子式,IMA可以降低Nrf2及其下游相关的抗氧化蛋白HO-1,NQO1,GPX4以及FTH1的表达,Ber预处理可以上调上述蛋白的表达,下调由IMA刺激所致上调的转铁蛋白受体Tf R和氧化应激相关蛋白P53的表达水平。动物实验中,ECG结果表明Ber可以改善心脏功能,并且与模型组相比,Ber组的小鼠体重、心脏重量有所增加。血清心肌酶谱结果表明Ber可以显著降低血清中心肌酶乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)的水平;H&E染色结果显示Ber可以改善小鼠心肌损伤,减少心肌细胞空泡化病变;MASSON结果显示Ber可以抑制心脏组织发生纤维化病变;透射电镜结果表明,模型组小鼠心肌细胞线粒体膜发生破裂皱缩、嵴断裂或消失,符合铁死亡的典型特征,Ber可以显著改善线粒体的形态和线粒体功能;油红O染色结果表明Ber可以改善小鼠心脏脂质沉积;铁死亡相关生化指标分析结果表明Ber可以升高GSH的水平并且降低MDA以及组织铁的水平;对铁死亡代谢过程中的关键酶GPX4进行免疫组化结果显示Ber可以上调GPX4的水平;Western blot结果显示Ber可以上调Nrf2、HO-1,NQO1、GPX4以及FTH1的表达,同时下调白Tf R和P53的表达水平。综上所述,体内外的实验结果均表明Ber能够通过增加抗氧化、减少胞内游离铁离子的水平从而抑制Nrf2依赖性铁死亡来保护IMA导致的心脏毒性。

目的 探讨肝素结合蛋白(Heparin binding protein, HBP)在血液系统疾病早期感染中的恰当解读的正确模式，寻找早期判断感染的新模式。方法 回顾性分析2021年3月至8月在郑州selleck化学大学第一附属医院接受治疗的90例血液系统疾病患者的病例资料。所有患者分为感染组multiple sclerosis and neuroimmunology与非感染组，检测血常规、C反应蛋白(C-Reactive Protein, CRP)、降钙素原(Procalcitonin, PCT)、肝素结合蛋白，比较两组资料的差异。根据白细胞数目进一步分成白细胞细胞正常组、白细胞细胞减少组、中性粒细胞缺乏组，比较在不同中性粒细胞数目下感染组与非感染组在CRP、PCT、HBP中的差异。进一步分析HBP与中性粒细胞数目的关系，比较“肝素结合蛋白/中性粒细胞”在感染组与非感染组的差异。结果 感染组CRJNJ-42756493作用P、PCT、HBP水平均明显高于非感染组；白细胞数目正常时，HBP在AUC数值上高于CRP、PCT;HBP受中性粒细胞数目的影响，HBP水平与中性粒细胞数目呈正相关(r=0.706,P<0.05);“肝素结合蛋白/中性粒细胞”比值不受中性粒细胞数目影响，“肝素结合蛋白/中性粒细胞”比值在感染组明显高于非感染组。结论 HBP水平受中性粒细胞数目影响，当中性粒细胞数目正常时，HBP在判断早期感染的价值上优于CRP、PCT,当中性粒细胞数目减少甚至缺乏时“肝素结合蛋白/中性粒细胞”比值反应感染更具有意义。HBP作为感染指标用于血液系统疾病感染时，应结合中性粒细胞数目进行综合评价。

目的 分析低分子肝素联合复方氨基酸、硫酸镁治疗宫内胎儿生长受限的效果。方法 选择2019年1月至2022年2月我院的80例宫内胎儿生长受限孕产妇为研究对象，根据入院时间不同将其分为对照组（2019年1月至2021年1月）和观察组（2021年2月至Orthopedic infection2022年2月），各40例。对照组接受复方氨基酸+硫酸镁治疗，观察组在对照组基础上加用低分子肝素Empagliflozin使用方法治疗。比较两组的治疗效果。结果 治疗后，观察组的胎儿股骨长（FL）、双顶径AY-22989浓度（BPD）、腹围（AC）、头围（HC）大于对照组，差异具有统计学意义（P<0.05）。分娩后，观察组的脐血清胰岛素样生长因子-2(IGF-2)水平高于对照组，胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IGFBP-3)水平低于对照组，差异具有统计学意义（P<0.05）。治疗后，观察组的脐动脉阻力指数（RI）、收缩期与舒张期流速比（S/D）、搏动指数（PI）低于对照组，舒张末期血流速度（EDV）高于对照组，差异具有统计学意义（P<0.05）。观察组的不良妊娠结局总发生率低于对照组，差异具有统计学意义（P<0.05）。结论 低分子肝素联合复方氨基酸、硫酸镁治疗宫内胎儿生长受限效果显著，可改善胎儿脐动脉血流，调节IGF-2、IGFBP-3表达，改善胎儿生长发育情况，降低不良妊娠结局发生情况。

目的:本研究旨在探讨急性白血病患儿(acute leukemia,AL)诱导缓解期发生中枢神经系统并发症(central nervous system complication,CNSC)的危险因素、总结CNSC的临床特征,以期能够早期发现CNSC高风险患儿并及时有效处置。方法:收集2017年3月至2022年9月于吉林大学第一医院小儿血液科住院的30例在诱导缓解期发生CNSC的AL患儿作为病例组,并随机抽取相同住院时间段内的60例AL但未发生CNSC的患儿作为对照组。分析两组患儿AL初诊时的一般资料、阳性体征、白血病分型、危险度分组、血常规、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、超敏C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)、肿瘤溶解情况、遗传学特征、诱导缓解化疗疗末的骨髓形态学及微小残留病(minimal residual disease,MRD),分析AL患儿发生CNSC的危险因素及CNSC对诱导缓解化疗疗效的影响;收集并总结CNSC组患儿的疾病类型、发生时间、临床表现、病情进展等临床特征。结果:1、AL合并CNSC的单因素方差分析提示白血病危险度分组、年龄是否≤6岁、白细胞计数是否>100×10~9/L组间具有统计学差异(P<0.05)。性别、白血病免疫分型、中性粒细胞绝对值、血红蛋白、血小板、LDH、肝脾淋巴结肿大、CRP、肿瘤溶解综合征(tumor lysis syndrome,TLS)组间无统计学差异(P>0.05)。2、将白血病危险度、白细胞总数是否>100×10~9/L、年龄是否≤6岁进一步行多因素Logistic回归分析结果提示,高危组、年龄≤6岁是CNSC发生的独立危险因素。3、将两组患儿(不包括急性早幼粒细胞白血病(acute promyelocytic leukemia,APL))不利的遗传学特征进行对比,结果提示不利的Transfusion-transmissible infections遗传学特征将增大AL合并CNSC的风险。在CNSC组中,具有不利的遗传学特征的患儿共9例,其中4例(44.44%)存在IKZF1缺失,2例(22.22%)为MLL-AF4融合基因阳性,1例(11.11%)为BCR-ABL1融合基因阳性,1例(RSL3体内11.11%)存在RUNX1突变,1例(11.11%)存在C-KIT突变。4、根据CNSC发生的时间,30例CNSC组患儿中,10例(33.33%)的患儿发生在开始应用化疗药物之前,8例(26.67%)发生于化疗后7天内,12例(40.00%)发生于化疗后8-45天。5、根据CNSC发生时的临床表现,9例(30.00%)出现癫痫发作,8例(26.67%)出现头痛,8例(26.67%)无异常临床表现,6例(20.00%)出现恶心、呕吐,5例(16.67%)出现意识障碍,3例(10.00%)出现头晕,3例(10.00%)出现发热,1例(3.33%)出现肢体疼痛。6、根据CNSC所涉及的疾病类型,CNSC组中脑血管疾病12例(40.00%),中枢神经系统白血病(central nervous system leukemia,CNSL)9例(30.00%),颅内感染8例(26.67%),癫痫7例(23.33%),脑萎缩4例(13.33%),脑/脊髓占位3例(10.00%),脑白质病变1例(3.33%),硬膜下积液1例(3.33%)。在12例脑血管疾病患儿中,颅内出血8例(66.67%),急性脑梗塞2例(16.67%),急性脑梗塞合并颅内出血1GSK1349572细胞培养例(8.33%),颅内出血合并静脉窦血栓1例(8.33%)。8例颅内感染患儿中,4例(50.00%)脑脊液病原学检测阳性,分别为人疱疹病毒4、7型,肺炎链球菌,口腔链球菌,缓症链球菌,1例(12.50%)血液病原学检测为铜绿假单胞菌阳性,其余三例病原学检测未见异常。在7例癫痫患儿中,6例(85.71%)为全面性发作,1例(14.29%)为局灶性发作。7、在CNSC组中,共5例患儿白细胞总数>100×10~9/L(141.71-763.49×10~9/L),其中1例发生急性脑梗塞、脑萎缩,2例发生颅内出血,1例发生CNSL,1例发生CNSL、急性脑梗塞、颅内出血。8、CNSC组与对照组诱导缓解化疗疗末骨髓形态学是否完全缓解组间比较无统计学差异;对比两组(不包括APL)患儿诱导缓解化疗疗末骨髓MRD是否≥10~(-2),结果提示AL合并CNSC可增大诱导缓解化疗疗末MRD≥10~(-2)的风险。结论:1、白细胞计数、危险度分组、年龄与CNSC的发生有关,其中高危组、年龄≤6岁是AL患儿发生CNSC的独立危险因素。2、不利的遗传学特征可增加AL(不包括APL)患儿诱导缓解期发生CNSC的风险。3、CNSC可影响AL(不包括APL)患儿诱导缓解化疗疗末的MRD水平。4、CNSC最易发生在化疗8天以后,高白细胞性急性白血病易合并多种CNSC。5、CNSC中最常见的临床表现为癫痫发作、头痛、恶心、呕吐,最常见的疾病为脑血管疾病、CNSL、颅内感染、癫痫。

仔猪腹泻是生猪规模化养殖过程中常见的肠道疾病之一,导致仔猪生长缓慢和死亡,严重影响养猪业的健康发展。C型产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens type C)产生的beta2毒素(CPB2)损害仔猪肠道,引起仔猪坏死性肠炎。目前,通过使用抗生素和疫苗等在一定程度上控制了仔猪腹泻的发生,但随着食品安全和环境污染等问题的出现及绿色无抗养殖的呼吁,给仔猪腹泻的防治带来了新的挑战。因此,从分子遗传角度研究仔猪抵抗病原菌感染的腹泻机制,在本质上提高仔猪抗腹泻能力,已成为防治仔猪腹泻的重要途径之一。LncRNA和miRNA参与调控病原微生物感染引起的肠道疾病,但其在仔猪C型产气荚膜梭菌性腹泻中的功能及调控机制尚不清楚。鉴于此,本研究基于课题组前期C型产气荚膜梭菌感染仔猪回肠组织RNA-seq数据,筛选出在腹泻仔猪回肠组织和CPB2毒素处理的IPEC-J2细胞中共同差异表达的lnc RNA和miRNA,构建lnc RNA-miRNA-m RNA调控网络。利用RT-q PCR、Western Blot、ELISA、Ed U染色、流式细胞术、双荧光素酶基因报告等试验研究lnc RNA和miRNA在CPB2毒素诱导IPEC-J2细胞损伤中的调控机制。主要研究结果如下:(1)以FDR<0.05、FPKM>1和|log_2 FC|>1为筛选条件,同时剔除没有靶基因的lnc RNA,在课题组前期RNA-seq数据中筛选出靶基因富集在炎症、免疫相关通路的6个差异表达lnc RNAs,利用RT-q PCR检测这6个差异表达lnc RNAs在腹泻(易感和耐受)仔selleckchem猪回肠组织和CPB2毒素诱导的IPEC-J2细胞中的表达。结果表明,lnc001776在组织和细胞中的差异倍数均最大,且在两者中均极显著上调表达(P<0.01)。组织表达谱结果显示,lnc001776在仔猪十二指肠、空肠和回肠表达较高。5'和3'RACE试验得到lnc001776全长序列为3386bp。过表达lnc001776增加了促炎细胞因子表达水平、LDH活性和ROS水平,降低了抗炎细胞因子表达水平、SOD活力和细胞活力,抑制细胞增殖,促进细胞凋亡,破坏细胞紧密连接,进而加重CPB2毒素诱导的IPEC-J2细胞损伤。敲低lnc001776可改善CPB2毒素对IPEC-J2细胞的损伤作用。细胞质核分离试验和RNA-FISH结果表明,lnc001776主要定位于IPEC-J2细胞质。同时,筛选出与lBiotic interactionnc001776存在结合位点且表达负相关的差异miRNA(ssc-let-7i-5p),预测其靶基因,筛选与炎症、免疫感染性疾病相关的靶基因,与差异m RNA取交集,预测出了可能的lnc001776/ssc-let-7i-5p/IL-6 ceRNA调控网络。(2)ssc-let-7i-5p在腹泻仔猪回肠组织和CPB2毒素处理的IPEC-J2细胞中极显著下调表达(P<0.01),并在CPB2毒素处理24 h时表达最低(P<0.01)。组织表达谱结果表明,ssc-let-7i-5p在仔猪回肠中表达最高,在脾脏、空肠、肺脏和肝脏中呈中高表达。过表达ssc-let-7i-5p对ROS水平和SOD活力无显著影响,但可抑制促炎细胞因子表达水平、LDH活性和细胞凋亡,提高抗炎细胞因子表达水平和细胞活力,促进细胞增殖,改善肠上皮屏障功能,从而缓解CPB2毒素诱导的IPEC-J2细胞损伤。(3)双荧光素酶活性试验表明ssc-let-7i-5p分别与lnc001776和IL-6能够特异性结合。过表达lnc001776降低ssc-let-7i-5p的表达,增加IL-6的表达,敲低lnc001776存在相反的结果。此外,ssc-let-7i-5p的过表达抑制了lnc001776对IL-6表达的正向调控,确定lnc001776/ssc-let-7i-5p/IL-6调控网络成立。挽救试验表明ssc-let-7i-5p的过表达阻断了lnc001776对CPB2毒素诱导的IPEC-J2细胞炎症、凋亡和紧密连接紊乱的促进作用,而过表达IL-6抑制了ssc-let-7i-5p对lnc001776的阻断作用,从而恢复lnc001776对CPB2毒素诱导的IPEC-J2细胞的损伤作用。综上所述,lnc001776/ssc-let-7i-5p/IL-6互作网络对CPB2毒素诱导的IPEC-J2细胞损伤具有重要的调控作用,即lnc00FG-45921776通过海绵吸附ssc-let-7i-5p调节下游靶基因IL-6的表达,进而促进CPB2毒素诱导的IPEC-J2炎症反应、凋亡和肠屏障功能紊乱,最终加剧CPB2毒素对IPEC-J2细胞的损伤。本研究结果可为进一步揭示lnc RNAs在仔猪C型产气荚膜梭菌性腹泻中的作用机制提供理论依据。

目的:铜死亡是一种新颖且独立的铜依赖的程序性细胞死亡方式,在各种癌症的发生和进展中起着关键作寻找更多用。然而,铜死亡相关基因对肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)的影响知之甚少。本研究旨在探索铜死亡相关基因,确定肝细胞癌亚型,并开发肝细胞癌的新型预后模型,探究其与肿瘤微环境浸润的关系。方法:在癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库的基础上,评估10个铜死亡相关基因在肝细胞癌中的表达、体细胞突变和拷贝数变异等遗传学变化。一致性聚类用于鉴定肝细胞癌铜死亡相关新分子亚型,并进行富集分析确定其生物学功能。随后鉴定亚型间差异表达基因,通过单因素Cox回归分析,获得候选预后基因,进一步采用最小绝对值收敛和选择算子(least absolute shrinkage and selection operator,Lasso)回归分析缩小过拟合,建立预测总体生存的基因风险评分模型,并在国际肿瘤基因组协作组(International Cancer Genome Consortium,ICGC)数据库中进行了验证。使用单因素和多因素Cox回归来确定风险评分是否可以用作独立预测因子。将风险评分与临床特征因素纳入绘制列线图,校准曲线、ROC曲线、DCA曲线用以评估列线图的预测价值。此外,使用“Estimate”和“ss GSEA”算法来评估高低风险组之间肿瘤免疫微环境中免疫细胞浸润的情况以及和预后模型基因的相关性。同时,评估不同风险组与常用化疗药物和免疫检查点表达水平之间的相关性。最后,通过人蛋白质数据库(Human Protein Atlas,HPA)验证了风险模型中基因的表达模式。结果:本研究共纳入分析了10个铜死亡相关基因,与正常组织相比,肝细胞癌组织中FDX1表现下调,其余9个基因表现上调。CDKN2A的突变率最高,为3%。GO和KEGG分析genetic evaluation显示,铜死亡相关基因主要参与柠檬酸循环等途径。利用10个差异表达的基因,将HCC分为两个亚型,预后不同。Cluster2的预后比Cluster1差(P<0.05),T分期、TNM分期和肿瘤的亚型有明显正相关性。基于CBX2,G6PD,SLC2A1,KPNA2,NEIL3,TAF3,TTK,KIAA1841和UCK2的LASSO回归系数,建立了一个新的风险预测模型。在两个数据集中,低风险组的总生存率(OS)比高风险组好(P<0.001)。TCGA数据集1、3、4年的AUC面积分别为0.788、0.720和0.722,ICGC外部验证集1、3、4年的AUC面积分别为0.778、0.782和0.776。同时,将构建的模型与以往研究中构建的模型进行比较,本研究的模型优于以往的模型,这进一步说明了构建的模型的准确性。高风险的患者具有较高的肿瘤组织学等级、较高的分期和较差的预后。多因素Cox回归分析也证实,在TCGA和ICGC组中,风险评分是HCC的独立预后因素(P<0.001)。此外,将风险评分与临床特征因素(性别、年龄、TNM分期、组织学分级)5个变量纳入构建列线图。校准曲线显示列线图的预测与实际观测概率之间具有出色的一致性。一致性指数(CI)说明联合临床病理特征因素模型的CI比单个临床病理因素的CI更高。ROC曲线分析显示,AUC值高于单独使用临床特征变量中的每一个来预测OS时的值,这表明新的列线图预测模型具有较高的准确性。临床决策曲线说明,组合5个变量构建的列线图的临床获益率高于每个临床变量的获益率。“Estimate”评分方面观察到两个风险组之间有明显差异,高风险组的基质评分低于低风险组,风险评分与基质评分呈负相关。ss GSEA分析的结果显示,高风险组和低风险组之间在7种免疫细胞和4种免疫相关功能方面存在差异。免疫检查点基因在高危组的表达水平普遍selleck Liraglutide高于低危组。确定了索拉菲尼、5-氟尿嘧啶、多柔比星、吉西他滨、舒尼替尼和丝裂霉素在高风险组患者中的治疗敏感性。最后,在HPA数据库中,检测到肝癌组织中CBX2、G6PD、KPNA2、TTK和SLC2A1的蛋白表达高于正常组织,而KIAA1841的蛋白表达却低于正常组织。NEIL3、TAF3和UCK2在数据库中没有记录。结论:本研究基于铜死亡相关基因对肝细胞癌患者进行分型,并构建了新的预后模型,可以较好的预测肝细胞癌的生存结局,加深了对肿瘤免疫微环境的理解,有望帮助临床医生识别更具侵袭性的肿瘤并启动适当的个体化治疗。

落实天然橡胶有效供给和质量提升,优先保障关键领域用胶安全水平是农垦天然橡胶产业发展的重要工作之一。天然橡胶是保障国家安全的战略物资,世界上98%以上的天然橡胶来源于巴西橡胶树(Hevea brasiliensis)。橡胶树红根病是我国橡胶树最重要的根部病害,目前,生产上种植品种缺乏抗性,抗病机制不明确,限制了对该病害的预测预报以及防治措施精准实施。近年来,高通量测序技术不断在发展,越来越多的研究从微生态视角探究橡胶树红根病菌侵染的驱动因素。本研究通过分析在橡胶树红根病菌侵染过程中起主要作用的细胞壁降解酶类型及其对橡胶树根部的侵染过程,研究细胞壁相关酶活性及相关基因表达变化,确定细胞壁降解酶是否为橡胶树红根病菌主要的致病生化因子,明确起关GSK J4体内实验剂量键性作用的细胞壁降解酶,为橡胶树红根病的防控和抗红根病育种奠定理论基础。主要结果如下:1.对中国热带农业科学院试验场三队的患病橡胶树树根采样,进行真菌分离,分离出一株病原真菌,对病原真菌进行形态特征、致病性判定,并测定病原菌的r DNA-ITS序列进行比对鉴定,从而确定导致橡胶树根部感病,最终死亡的病原真菌,是橡胶树红根病真菌(Ganoderma pseudoferreum),为灵芝属相关真菌。橡胶树红根病菌侵染橡胶树组培苗后第3 d可见根部表皮外层细胞已被破坏,第7 d表皮Trichostatin A配制细胞均被菌体结构占据。2.利用3,5-二硝基水杨酸(DNS)法和紫外分光光度计法检测橡胶树红根病菌侵染过程中细胞壁降解酶活性的变化。通过测定酶处理后橡胶树根部渗透性还原糖和相对电导率以及对根系活力的影响,分析细胞壁降解酶对橡胶树根部的损伤致病作用。在检测的细胞壁降解酶中,中性木聚糖酶活性最高,β-葡萄糖苷酶次之,中性蛋白酶、果胶甲基反式消除酶等其他酶活性较低。橡胶红根病菌产生的细胞壁降解酶单一酶和混合酶均可导致橡胶树根组织明显受损,并影响其根系活力。3.利用RT-PCR从橡胶树中红根病菌中克隆得到纤维素酶Gp TR6079全长adult medulloblastoma序列为1302 bp,编码433个氨基酸,纤维素酶Gp TR6079蛋白存在信号肽的概率为0.9945,信号肽位置在GAA和AS之间。β-葡萄糖苷酶Gp TR894全长序列为1563 bp,编码520个氨基酸,β-葡萄糖苷酶Gp TR894蛋白存在信号肽的概率为0.9483,信号肽位置在ARG和AY之间。木聚糖酶Gp TR1774全长序列为780 bp,编码259个氨基酸。采用qRT-PCR分析红根病菌侵染橡胶树组培苗材料后纤维素酶GpTR6079、β-葡萄糖苷酶Gp TR894、木聚糖酶Gp TR1774基因相对表达量的变化。分别以橡胶树组培苗材料的0 d为对照,q RT-PCR显示接种橡胶树红根病菌后纤维素酶Gp TR6079、β-葡萄糖苷酶Gp TR894、木聚糖酶Gp TR1774表达量整体趋势为先上升后下降,侵染第3 d和4 d表达量极显著上升,4 d达到最高水平。

目的：研究参芪调肾方对香烟烟雾（CS）暴露法建立的慢性阻塞性肺疾病（COPD）模型小鼠的炎症抑infection time制、肺组织病理及骨组织内破骨细胞介导的骨吸收的改善作用机制。方法：将40只小鼠随机分为正常对照组、模型对照组、参芪调肾方8.53 、17.06、34.11 g/kg组，每组8只，除正常对照组外其余4组采用CS暴露法造模24 w，第12 w -24 w各组灌胃给予相应药物或生理盐水，连续12 w；ELISA法检测肺组织、外周血、骨组织内炎症因子白细胞介素（IL）-1、IL-6、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）含量；HE染色观察肺组织病理学AM-2282供应商改变；抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色观察骨组织内破骨细胞；免疫组化法观察骨组织内骨保护素（OPG）、核因子κB受体活化因子配体（RANKL）、核因子κB p65（NF-κB p65）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）蛋白在小鼠胫骨组织中的定位表达；Western blot法检测肺组织NF-κB p65、p-NF-κB p65、MMP-9及胫骨OPG、RANKL、NF-κB p65、p-NF-κB p65、MMP-9、组织蛋白酶K(（CTSK）蛋白表达。结果：与正常对照组比较，模型对照组肺组织损伤明显，管腔内、管壁及周围见大量炎症细胞聚集；肺组织、外周血及骨组织内炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α含量显著升高（P＜0.01）；骨组织内破骨细胞数量、RANKL、NF-κB p65、MMP-9、CTSK、TRAP蛋白表达显著升高（P＜0.01），OPG蛋白表达显著降低（P＜0.01）；与模型对照组比较，参芪调肾方各剂量组可不同程度改善小鼠支气管壁增厚、肺气肿形成等病理改变，减轻炎性细胞浸润，参芪调肾方34.11 g/kg组可显著下调肺组织内NF-κB p65、p-NF-κB p65、MMP-9蛋白表达（P＜0.01）、降低炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α含量（P＜0.01）；明显降低骨组织内破骨细胞数量以及RANKL、NN2211供应商NF-κB p65、p-NF-κB p65、MMP-9、CTSK、TRAP蛋白表达（P＜0.05或P＜0.01），显著升高OPG蛋白（P＜0.01）。结论：参芪调肾方对COPD模型小鼠合并骨质疏松（OP）有一定防治作用，可能是通过调控OPG/RANKL/NF-κB/MMP-9信号通路，改善COPD模型小鼠肺组织病理，降低肺、外周血、骨组织炎症反应，抑制破骨细胞过度活化。