PDK1信号通路

目的:铜死亡是一种新颖且独立的铜依赖的程序性细胞死亡方式,在各种癌症的发生和进展中起着关键作寻找更多用。然而,铜死亡相关基因对肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)的影响知之甚少。本研究旨在探索铜死亡相关基因,确定肝细胞癌亚型,并开发肝细胞癌的新型预后模型,探究其与肿瘤微环境浸润的关系。方法:在癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库的基础上,评估10个铜死亡相关基因在肝细胞癌中的表达、体细胞突变和拷贝数变异等遗传学变化。一致性聚类用于鉴定肝细胞癌铜死亡相关新分子亚型,并进行富集分析确定其生物学功能。随后鉴定亚型间差异表达基因,通过单因素Cox回归分析,获得候选预后基因,进一步采用最小绝对值收敛和选择算子(least absolute shrinkage and selection operator,Lasso)回归分析缩小过拟合,建立预测总体生存的基因风险评分模型,并在国际肿瘤基因组协作组(International Cancer Genome Consortium,ICGC)数据库中进行了验证。使用单因素和多因素Cox回归来确定风险评分是否可以用作独立预测因子。将风险评分与临床特征因素纳入绘制列线图,校准曲线、ROC曲线、DCA曲线用以评估列线图的预测价值。此外,使用“Estimate”和“ss GSEA”算法来评估高低风险组之间肿瘤免疫微环境中免疫细胞浸润的情况以及和预后模型基因的相关性。同时,评估不同风险组与常用化疗药物和免疫检查点表达水平之间的相关性。最后,通过人蛋白质数据库(Human Protein Atlas,HPA)验证了风险模型中基因的表达模式。结果:本研究共纳入分析了10个铜死亡相关基因,与正常组织相比,肝细胞癌组织中FDX1表现下调,其余9个基因表现上调。CDKN2A的突变率最高,为3%。GO和KEGG分析genetic evaluation显示,铜死亡相关基因主要参与柠檬酸循环等途径。利用10个差异表达的基因,将HCC分为两个亚型,预后不同。Cluster2的预后比Cluster1差(P<0.05),T分期、TNM分期和肿瘤的亚型有明显正相关性。基于CBX2,G6PD,SLC2A1,KPNA2,NEIL3,TAF3,TTK,KIAA1841和UCK2的LASSO回归系数,建立了一个新的风险预测模型。在两个数据集中,低风险组的总生存率(OS)比高风险组好(P<0.001)。TCGA数据集1、3、4年的AUC面积分别为0.788、0.720和0.722,ICGC外部验证集1、3、4年的AUC面积分别为0.778、0.782和0.776。同时,将构建的模型与以往研究中构建的模型进行比较,本研究的模型优于以往的模型,这进一步说明了构建的模型的准确性。高风险的患者具有较高的肿瘤组织学等级、较高的分期和较差的预后。多因素Cox回归分析也证实,在TCGA和ICGC组中,风险评分是HCC的独立预后因素(P<0.001)。此外,将风险评分与临床特征因素(性别、年龄、TNM分期、组织学分级)5个变量纳入构建列线图。校准曲线显示列线图的预测与实际观测概率之间具有出色的一致性。一致性指数(CI)说明联合临床病理特征因素模型的CI比单个临床病理因素的CI更高。ROC曲线分析显示,AUC值高于单独使用临床特征变量中的每一个来预测OS时的值,这表明新的列线图预测模型具有较高的准确性。临床决策曲线说明,组合5个变量构建的列线图的临床获益率高于每个临床变量的获益率。“Estimate”评分方面观察到两个风险组之间有明显差异,高风险组的基质评分低于低风险组,风险评分与基质评分呈负相关。ss GSEA分析的结果显示,高风险组和低风险组之间在7种免疫细胞和4种免疫相关功能方面存在差异。免疫检查点基因在高危组的表达水平普遍selleck Liraglutide高于低危组。确定了索拉菲尼、5-氟尿嘧啶、多柔比星、吉西他滨、舒尼替尼和丝裂霉素在高风险组患者中的治疗敏感性。最后,在HPA数据库中,检测到肝癌组织中CBX2、G6PD、KPNA2、TTK和SLC2A1的蛋白表达高于正常组织,而KIAA1841的蛋白表达却低于正常组织。NEIL3、TAF3和UCK2在数据库中没有记录。结论:本研究基于铜死亡相关基因对肝细胞癌患者进行分型,并构建了新的预后模型,可以较好的预测肝细胞癌的生存结局,加深了对肿瘤免疫微环境的理解,有望帮助临床医生识别更具侵袭性的肿瘤并启动适当的个体化治疗。

落实天然橡胶有效供给和质量提升,优先保障关键领域用胶安全水平是农垦天然橡胶产业发展的重要工作之一。天然橡胶是保障国家安全的战略物资,世界上98%以上的天然橡胶来源于巴西橡胶树(Hevea brasiliensis)。橡胶树红根病是我国橡胶树最重要的根部病害,目前,生产上种植品种缺乏抗性,抗病机制不明确,限制了对该病害的预测预报以及防治措施精准实施。近年来,高通量测序技术不断在发展,越来越多的研究从微生态视角探究橡胶树红根病菌侵染的驱动因素。本研究通过分析在橡胶树红根病菌侵染过程中起主要作用的细胞壁降解酶类型及其对橡胶树根部的侵染过程,研究细胞壁相关酶活性及相关基因表达变化,确定细胞壁降解酶是否为橡胶树红根病菌主要的致病生化因子,明确起关GSK J4体内实验剂量键性作用的细胞壁降解酶,为橡胶树红根病的防控和抗红根病育种奠定理论基础。主要结果如下:1.对中国热带农业科学院试验场三队的患病橡胶树树根采样,进行真菌分离,分离出一株病原真菌,对病原真菌进行形态特征、致病性判定,并测定病原菌的r DNA-ITS序列进行比对鉴定,从而确定导致橡胶树根部感病,最终死亡的病原真菌,是橡胶树红根病真菌(Ganoderma pseudoferreum),为灵芝属相关真菌。橡胶树红根病菌侵染橡胶树组培苗后第3 d可见根部表皮外层细胞已被破坏,第7 d表皮Trichostatin A配制细胞均被菌体结构占据。2.利用3,5-二硝基水杨酸(DNS)法和紫外分光光度计法检测橡胶树红根病菌侵染过程中细胞壁降解酶活性的变化。通过测定酶处理后橡胶树根部渗透性还原糖和相对电导率以及对根系活力的影响,分析细胞壁降解酶对橡胶树根部的损伤致病作用。在检测的细胞壁降解酶中,中性木聚糖酶活性最高,β-葡萄糖苷酶次之,中性蛋白酶、果胶甲基反式消除酶等其他酶活性较低。橡胶红根病菌产生的细胞壁降解酶单一酶和混合酶均可导致橡胶树根组织明显受损,并影响其根系活力。3.利用RT-PCR从橡胶树中红根病菌中克隆得到纤维素酶Gp TR6079全长adult medulloblastoma序列为1302 bp,编码433个氨基酸,纤维素酶Gp TR6079蛋白存在信号肽的概率为0.9945,信号肽位置在GAA和AS之间。β-葡萄糖苷酶Gp TR894全长序列为1563 bp,编码520个氨基酸,β-葡萄糖苷酶Gp TR894蛋白存在信号肽的概率为0.9483,信号肽位置在ARG和AY之间。木聚糖酶Gp TR1774全长序列为780 bp,编码259个氨基酸。采用qRT-PCR分析红根病菌侵染橡胶树组培苗材料后纤维素酶GpTR6079、β-葡萄糖苷酶Gp TR894、木聚糖酶Gp TR1774基因相对表达量的变化。分别以橡胶树组培苗材料的0 d为对照,q RT-PCR显示接种橡胶树红根病菌后纤维素酶Gp TR6079、β-葡萄糖苷酶Gp TR894、木聚糖酶Gp TR1774表达量整体趋势为先上升后下降,侵染第3 d和4 d表达量极显著上升,4 d达到最高水平。

目的：研究参芪调肾方对香烟烟雾（CS）暴露法建立的慢性阻塞性肺疾病（COPD）模型小鼠的炎症抑infection time制、肺组织病理及骨组织内破骨细胞介导的骨吸收的改善作用机制。方法：将40只小鼠随机分为正常对照组、模型对照组、参芪调肾方8.53 、17.06、34.11 g/kg组，每组8只，除正常对照组外其余4组采用CS暴露法造模24 w，第12 w -24 w各组灌胃给予相应药物或生理盐水，连续12 w；ELISA法检测肺组织、外周血、骨组织内炎症因子白细胞介素（IL）-1、IL-6、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）含量；HE染色观察肺组织病理学AM-2282供应商改变；抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色观察骨组织内破骨细胞；免疫组化法观察骨组织内骨保护素（OPG）、核因子κB受体活化因子配体（RANKL）、核因子κB p65（NF-κB p65）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）蛋白在小鼠胫骨组织中的定位表达；Western blot法检测肺组织NF-κB p65、p-NF-κB p65、MMP-9及胫骨OPG、RANKL、NF-κB p65、p-NF-κB p65、MMP-9、组织蛋白酶K(（CTSK）蛋白表达。结果：与正常对照组比较，模型对照组肺组织损伤明显，管腔内、管壁及周围见大量炎症细胞聚集；肺组织、外周血及骨组织内炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α含量显著升高（P＜0.01）；骨组织内破骨细胞数量、RANKL、NF-κB p65、MMP-9、CTSK、TRAP蛋白表达显著升高（P＜0.01），OPG蛋白表达显著降低（P＜0.01）；与模型对照组比较，参芪调肾方各剂量组可不同程度改善小鼠支气管壁增厚、肺气肿形成等病理改变，减轻炎性细胞浸润，参芪调肾方34.11 g/kg组可显著下调肺组织内NF-κB p65、p-NF-κB p65、MMP-9蛋白表达（P＜0.01）、降低炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α含量（P＜0.01）；明显降低骨组织内破骨细胞数量以及RANKL、NN2211供应商NF-κB p65、p-NF-κB p65、MMP-9、CTSK、TRAP蛋白表达（P＜0.05或P＜0.01），显著升高OPG蛋白（P＜0.01）。结论：参芪调肾方对COPD模型小鼠合并骨质疏松（OP）有一定防治作用，可能是通过调控OPG/RANKL/NF-κB/MMP-9信号通路，改善COPD模型小鼠肺组织病理，降低肺、外周血、骨组织炎症反应，抑制破骨细胞过度活化。

目的:本课题旨在确定动脉粥样硬化性血管疾病发病机制中与氧化应激和免疫浸润细胞相关的生物标志物,并且进一步探讨生物标志物可能参与动脉粥样硬化坏死核心形成和破裂的作用机制。方法:基于Gene Expression Omnibus(GEO)数据库中的GSE100927数据集和基因集富集分析(gene set eElexacaftor分子式nrichment analysis,GSEA)得到的389个氧化应激(oxidative stress,OS)基因进行差异基因表达分析,共鉴定出74个与infectious ventriculitis氧化应激相关的差异表达基因(differentially expressed genes related to oxidative stress,DEOSGs)。使用“CIBERSORT”和“WGCNA”R包,比较动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS)血管组织和健康对照组血管组织的免疫浸润细胞水平差异。将74个DEIOSGs与WGCNA关键模块基因(972个)取交集,得到27个与免疫浸润细胞相关的氧化应激差异表达基因(differentially expressed immune-related oxidative stress genes,DEIOSGs)。为了进一步识别关键基因,利用STRING数据库和Cytoscape软件构建蛋白质-蛋白质相互作用(protein-protein interaction,PPI)网络。通过ROC分析确定对AS具有诊断价值的生物标志物。此外,在GSE57691数据集中对它们的诊断价值进行验证。通过相关性分析和单细胞分析进一步明确生物标志物主要与免疫细胞的种类相关。MMP9、ALOX5、NCF2、NCF1和NCF4被确定为AS的诊断标志物,相关分析和单细胞分析显示,5个诊断基因主要与巨噬细胞相关。逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)证实MMP9、ALOX5、NCF2、NCF1和NCF4基因在ox-LDL干预的巨噬细胞内高表达。免疫组化(immunohistochemistry,IHC)和免疫印迹法(western blotting)证实斑块组织中ALOX5高表达。在ox-LDL诱导的巨噬细胞模型中,通过转染si RNA敲低ALOX5。检测LDH反映细胞损伤和检测细胞活性氧(ROS)的变化反应细胞氧化应激状态。为了进一步探索氧化应激相关生物标志物参与动脉粥样硬化的作用机制,分别将铁死亡基因集、坏死性凋亡基因集和焦亡基因集与GSE100927的差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs)取交集以进一步探索潜在的分子生物机制。结果:MMP9、ALOX5、NCF2、NCF1和NCF4被确定为AS的诊断标志物。PCR结果证实在ox-LDL诱导的RAW264.7巨噬细胞中上述分子显著高表达。在高脂喂养APOE~(-/-)小鼠血清中ALOX5蛋白表达明显高于对照组,提示ALOX5可以用于临床中动脉粥样硬化病人的血清学生物标志物。免疫组化和western blotting证实在高脂喂养APOE~(-/-)小鼠动脉组织中,ALOX5的表达水平显著高于对照组。单细胞测序分析表明ALOX5主要表达于斑块内的巨噬细胞。通过检测LDH反映细胞损伤情况:ox-LDL可以诱导巨噬细胞损伤,损害细胞活力。在ox-LDL诱导的巨噬细胞中,ALOX5的表达水平高于正常对照组。转染ALOX5 si RNA能够降低RAW264.7巨噬细胞中ALOX5的表达水平并降低ox-LDL诱导的巨噬细胞中的ROS含量。将铁死亡基因集、坏死性selleckchem VP-16凋亡基因集和焦亡基因集与DEGs取交集进行分析,结果表明:ALOX5是调控AS发生发展过程中斑块内巨噬细胞铁死亡的关键分子。结论:MMP9、ALOX5、NCF2、NCF1和NCF4是AS的诊断基因,与氧化应激和多种斑块内免疫浸润细胞相关。ALOX5可能作为铁死亡调控基因介导巨噬细胞死亡促进斑块坏死核心形成。

目的探究黄芩苷（BG）对慢性偏头痛（CM）大鼠的治疗作用及作用机制。方法通过间first-line antibiotics歇性皮下注射硝酸甘油的方式建立慢性偏头痛大鼠模型。将大鼠随机分为对照组（contrFG-4592作用ol组）、慢性偏头痛组（CM组）、黄芩苷低、高剂量组（BG-L组、BG-H组）、黄芩苷+MIP-1α重组蛋白组（BG+MIP-1α组）、CCR1抑制剂组ZK811752（CCR1-ZK组），每组10只。观察大鼠的一般行为并进行评分；vonFrey纤维丝测痛仪测定大鼠机械痛阈值；尼氏染色法观察腹外侧中脑导水管周围灰质（vlPAG）神经元结构；酶联免疫吸附法（ELISA）检测肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）水平；免疫组织化学法检测疼痛相关蛋白c-Fos、CGRP表达；Westernblot检测MIP-1α、CCR1蛋白表达。结果与control组相比，CM组大鼠体质量、机械痛阈值、vIPAG区尼氏体数量显著降低，一般行为学评分、TNF-α、IL-1β水平以及c-Fos、CGRP、MIP-1α、CCR1表达显著升高（P<0.05）；与CM组相比，BG-L组、BG-H组、CCR1-ZK组大鼠体质量、机械痛阈值、vIPAG区尼氏体数量显著升高，一般行为学评分、TNF-α、IL-1β水平以及c-Fos、CGRP、MIP-1α、CCR1表达显著降低（P<0.05）；与BG-H组相比，BG+MIP-1α组大鼠体质量、机械痛阈值、vIPAKD025G区尼氏体数量显著降低，一般行为学评分、TNF-α、IL-1β水平以及c-Fos、CGRP、MIP-1α、CCR1表达显著升高（P<0.05）。结论黄芩苷对慢性偏头痛大鼠具有一定的治疗作用，其作用机制可能和抑制MIP-1α/CCR1信号通路激活相关。

神经酸(Nervonic acid)是大脑神经纤维以及菌膜的重要组成成分,可以修复和保护神经细胞。但同时神经酸也存在水溶性差、生物利用率低等问题,限制了其进一步的应用。因此,探索提高神经酸水溶性、增加其生物利用Ipatasertib临床试验度的研究具有重大意义。本研究以神经酸为研究对象,通过分离纯化制备得到神经酸,以壳寡糖、丝素蛋白为微载体包埋神经酸制备水溶性微粉。设计模拟体外释放实验和贮藏稳定性实验,研究了神经酸微粉的特性,结合扫描电镜、热分析、X射线衍射、红外及体外抗氧化等技术手段对神经酸微粉进行表征。最后,采用淀粉样蛋白1-42(Aβ_(1-42))处理神经元细胞(HT22)建立阿尔茨海默症细胞模型,从细胞水平探讨药物抗AD的作用机制。神经酸的分离纯化工艺研究。分离纯化工艺中首先,对元宝枫种仁油进行皂化处理得到混合脂肪酸。以皂化率为评价指标,采用单因素实验和正交实验优化脂肪酸皂化工艺,得到最佳皂化工艺参数为:A_2、B_2和C_2(皂化时间为3 h,用碱量为10%,皂化温度为80°C)。在此条件下,三次平行验证实验所获得元宝枫种仁油皂化率为75.83%±3.79。运用分子蒸馏技术,对皂化所得混合脂肪酸进行纯化处理,以神经酸含量为评价指标,采用单因素方法和正交实验设计法富集神经酸,并优化神经酸纯化工艺。元宝枫神经酸纯化的最优工艺为:A_3、B_3、C_2和D_3(刮板转速为200 r/min,蒸馏温度为240°C,压力为100 Pa,进料速度为10 m L/min)。在此条件下,三次平行验证实验所获得元宝枫神经酸纯度为35.49%±1.78。神经酸水溶性微粉Microarrays(NA-WM)的构建及工艺优化。采用层层自组装技术(LBL),以神经酸作为基材,良好生物相容性的天然高分子化合物壳聚糖和丝素蛋白为壁材,通过单因素优化实验制备出具有水溶性的核-壳型(神经酸/丝素蛋白/壳聚糖)微粉,运用Box-Behnken对NA-WM构建工艺最优因素进行筛选。得到NA-WM的最佳制备工艺为:壳寡糖固液比为1:2 g/m LCP-690550使用方法、包合速度为6500 r/min、包合时间为15 min、旋蒸温度为60℃、神经酸-壳寡糖包合物与丝素蛋白质量比为1、乳化速度为7500 r/min、乳化时间为15 min,进行3次平行实验,NA-WM的粒径为446 nm,与Box-Behnken预测值相差小于26。对采用层层自组装技术构建得到的NA-WM,进行热重分析、X射线衍射分析和红外光谱分析,发现壳寡糖和丝素蛋白成功封装神经酸得到水溶性微粉。检测得到酸环境响应的NA-WM水溶率为96.03%,说明以神经酸作为基材,壳聚糖和丝素蛋白为壁材,通过层层自组装技术制备的神经酸水溶性复合微粉具有良好的水溶性;扫描电镜图像显示制备得到的微粉粒子形态呈球形,平均粒径为420±35 nm,电位为-28.81±1.44 m V、包封率为88.11%,载药量28.27%。对NA-WM贮藏稳定性和体外释放特进行评价,结果表明NA-WM具有提高神经酸的贮藏稳定性的作用;酸环境是NA-WM的主要响应环境,自组装微粒具有显著的缓释作用。神经酸水溶性微粉的体外抗氧化活性检测。对制备的NA-WM以及原料本身进行体外抗氧化活性检测。结果表明NA-WM具有较强的综合抗氧化活性。神经酸水溶性微粉的体外活性研究。对制备的酸环境响应NA-WM进行体外抗AD作用机制表征,开展了细胞毒性分析、线粒体膜电位测定、细胞形态学分析、Aβ诱导损伤抑制作用、细胞CAT分析、细胞SOD分析、细胞MDA含量分析、细胞ROS抑制作用、细胞GSH-PX酶分析、AnnexinⅤ-FITC细胞凋亡分析等活性检测,表明NA-WM能显著增强Aβ_(1-42)诱导损伤的HT22细胞的活力,可以明显降低受损HT22细胞产生的ROS的含量,抑制活性氧的积累,改善线粒体功能。

乳清分离蛋白富含多种必须氨基酸、易于人体消化吸收被广泛用于食品工业。但乳清分离蛋白在食品加工过程中易受外界因素的影响,如温度、p H和离子强度等,造成蛋白质聚集或沉淀,导致其功能特性丧失,限制其应用领域。无有毒化学试剂添加的美拉德反应是一种绿色、安全的蛋白质改性方法。传统的干热法美拉德反应接触不均匀,湿热法美拉德反应所需温度高易造成蛋白质变性,并且两种方法在制备过程中都存在能耗高、废水产量大的问题。本文结合干热法和湿热法的优势,在湿热法的基础上使用乙醇溶液替代部分水溶液,建立乳清分离蛋白和葡聚糖在醇水溶液中进行的美拉德反应模型,分析乳清分离蛋白-葡聚糖接枝物Microscopes的功能特性,探讨该接枝物作为壁材制备的微胶囊鱼油的理化性质和稳定性。主要研究结果如下:(1)以接枝度为指标,在单因素试验的基础上选择以蛋确认细节糖质量比、反应时间、反应温度和乙醇体积浓度进行四因素三水平响应面设计试验,优化醇水预处理美拉德反应工艺。结果表明,各因素对接枝度的影响顺序为:乙醇体积浓度>蛋糖质量比>反应时间>反应温度。最优工艺条件为:蛋糖质量比1:3,反应温度70℃,反应时间23 h和乙醇体积浓度92%,在此条件下接枝度为24.22±0.35%。(2)研究了对不同反应程度的糖基化蛋白结构和功能特性。结果表明,接枝物的中间产物和褐变程度随反应时间延长逐渐积累,通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳和光谱技术均证实乳清分离蛋白-葡聚糖接枝物的生成,表面疏水性结果表明葡聚糖的共价接枝对乳清分离蛋白的疏水基团具有屏蔽作用,随着接枝度的增加其表面疏水性显著降低,扫描电子显微镜显示共价接枝葡聚糖后乳清分离蛋白的结构从典LY2835219价格型的表面光滑球状转变为表面较为粗糙的块状结构。浊度和溶解度表明乳清分离蛋白-葡聚糖接枝物具有良好的p H稳定性。与未改性乳清分离蛋白相比,接枝物乳化性和乳化稳定性分别提高了36.86%和26.95%,还原力提高了1.13倍,DPPH和ABTS自由基清除率提高到了42.98%和54.79%(3)将乳清分离蛋白-葡聚糖接枝物作为壁材应用于微胶囊化鱼油,考察了鱼油微胶囊的理化特性和稳定性。结果表明,鱼油微胶囊粉末均一,无结块和鱼腥味,水分含量为3.50±0.44%,堆密度为0.23±0.03 g/cm~3,休止角为33.70±0.59°,溶解度为69.08±4.04%,包埋率为76.04±2.03%。鱼油微胶囊红外光谱出现鱼油特征吸收峰但强度降低,表明其被成功包埋在微胶囊中。扫描电子显微镜显示鱼油微胶囊具有光滑致密的表面结构。差示扫描量热法确定鱼油微胶囊的玻璃化转变温度为109.27℃。60℃的加速储藏中,经过包埋的鱼油一周后过氧化值(POV)值为11.45±0.59 meq/kg变化缓慢,表现出良好的储藏稳定性。采用体外模拟消化实验发现乳清分离蛋白-葡聚糖接枝物的包埋可以实现对鱼油的缓慢释放。

目的:探究表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate, EGCg)特异性抑制芳香乙酰胺脱乙酰基酶蛋白(arylacetamide deacetylase, AADAC)来诱导卵巢癌细胞发生铁死亡的分子机制。方法:体外培养卵巢癌细胞系(SK-OV-3、A2780、Hey和SW626)。CCK-8检测EGCg对卵巢癌细胞的半数抑制浓度(median inhibition concentration, IC_(50))。铁离子检测试剂盒检测细胞内Fe~(2+)的含量。活性氧(reactive oxygen species, ROS)检测试剂盒检测细胞内ROS的含量。Western blot检测细胞内铁死亡相关蛋白GPX4和NOX1的表达。酶活实验检测EGCg对AADAC活性的影响。Westernhttps://www.selleck.cn/products/empagliflozin-bi10773.html blot检测EGCg对AADAC蛋白的影响。应用免疫组化和Western blot检测卵巢癌患者组织中AADAC的表达。应用siRNA沉默卵巢癌细胞总AADAC的表达。应用AADAC-KO敲除卵巢癌细胞中AADAC的表达。皮下成瘤验证小鼠体内EGCg对卵巢癌移植瘤生长的影响。结果:EGCg能抑制卵巢癌细胞的增殖，且对SK-OV-3和SW626细胞较为敏感。EGCg使卵巢癌细胞中Fe~(2+)含量增加，ROS含量增加，并抑制GPX4蛋白表达，促进NOX1蛋白的表达。EGCg能抑制AADAC蛋白的活性并促进其降解。AADAC在卵巢癌患者癌组织中高表达。沉默AADAC能促进卵巢癌细胞发生铁死亡。沉默AADAC后EGCg对卵巢癌细胞变得不敏感，并不能促进铁死亡的发生。相对于NCHuman genetics组，EGCg能抑制裸鼠移植瘤的生长，且移植瘤中AADAC表达下降，铁死亡被激活。结论:EGCg能特异性抑制AADAC来GSK2118436体内诱导卵巢癌细胞发生铁死亡。

目的 精神分裂症的发病机制尚不明确，其现有治疗药物疗效不理想、副作用较多。组胺与精神分裂症的发生密切相关，前期研究发现组胺受体存在细胞特异性功能。因此，本课题拟探究不同神经元上组胺受体在精神分裂症发生中的作用，并寻找精准治疗靶点。方法 利用Cre/loxp技术构建特异性敲除不同神经元上组胺受体的小鼠，并通过行为学、电生理、微透析等技术以及人脑样本进行探究。结果 胆碱能神经元上H1受体缺失引起小鼠产生精神分裂症阴性症状行为表型，并且有阴性症状患者的脑样本中基底前脑胆碱能神经元上H1受体表达下降。进一步发现可能是由于H1受体缺失后，投射至前额叶皮层的基底前脑胆碱能神经元功能降低，进而破坏了前额叶皮层锥体神经元的兴奋/抑High-risk medications制平衡。谷氨酸能神经元上H2受体缺失引起小鼠产生精神分裂症样阳性阴性症状相关行为selleck Tofacitinib表型，可能是内侧前额叶皮层谷氨酸能神经元上H2受体缺失后，HCN通道介导电流增加，进而引起神经元兴奋性降低导致的，并且精神分裂症患者的前额叶皮层谷氨酸神经元上H2受体表达下降。结论 胆碱能神经元上H1受体和谷氨酸能神经元上H2受体参与精神分裂症阳性和阴性selleckchem Etoposide不同症状发生，为精神分裂症的发病机制提供了“组胺受体假说”，并为精神分裂症的治疗提供了潜在精准药物靶点。

目的 探讨高血压合并冠状动脉粥样硬化性心脏病（冠心病）患者的血压变异性及其影响因素。方法 选择2021年1月至2022年1月于东部战区总医院秦淮医疗区接诊的100例高血压患者为研究对象，根据冠心病合并情况分为病例组（n=23）和对照组（n=77），分析患者的一般资料、血压变异性及其影响因素。结果 两组性别、饮酒、空腹血糖、血小板计数、血小板压积、体质指数、三酰甘油（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）及高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）比较无selleckchem Baricitinib统计学差异；病例组年龄、吸烟、血小板分布宽度、血小板的平均体积（MPV）、总胆固醇（TC）及同型半胱氨酸（Hcy）水平显著高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）；病例组24 h收缩压变异系数（24h SCV）、24h舒张压变异更多系数（24h DCV）、白天收缩压变异系数（dSCV）、白天舒张压变异系数（dDCV）、夜间收缩压变异系数（nSCVendocrine-immune related adverse events）及夜间舒张压变异系数（nDCV）水平显著高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）；多因素非条件Logistic分析结果显示，年龄、吸烟、血小板分布宽度、MPV、TC、Hcy、24h SCV、24h DCV、dSCV、dDCV、nSCV及nDCV均是高血压合并冠心病的独立危险因素（P<0.05）。结论患者年龄、吸烟、血小板分布宽度、MPV、TC、Hcy、24h SCV、24h DCV、dSCV、dDCV、nSCV及nDCV均是高血压合并冠心病的危险因素，临床上对于具有危险因素的患者引起重视，以提高疗效。