PDK1信号通路

目的 探究十全大补汤对阿尔兹海默病(AD)小鼠突触功能及认知损伤的改善作用。方法 60只小鼠随机分为对照组、模型组、美金刚组(5 mg/kg)和十全大补汤高、中、低剂量组(6.24、3.12、1.56 g/kg),每组10只，除对照组外，其余各组小鼠腹腔注射D-半乳糖并灌胃AlCl_3 70 d建立AD模型，造模第寻找更多29天开始，各组灌胃给予相应剂量药物42 d。通过Morris水迷宫实验和条件恐惧实验检测空间学习记忆及联想记忆，HE染色观察海马神经元形态改变情况，试剂盒检测血清SOD活性、MDA水平及海马组织SOD、AChE活性，MDA、ACh、TNF-α、IL-1β水平，Western blot法检测海马组织PSD-95、Shank3、NR1、NR2A、NR2B、AMPErdafitinibK、p-AMPK蛋白表达。结果 与模型组比较，十全大补汤高剂量组小鼠空间学习记忆能力与联想记忆提升(P<0.05,P<0.01),海马神经元病理损伤减轻，氧化应激及炎症水平下降(P<0.05,P<0.01),胆碱能传递增强(P<0.05,P<0.01),海马组织PSD-95、Shankrecurrent respiratory tract infections3、NR1、NR2A、NR2B、p-AMPK蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01)。结论 十全大补汤可改善AD小鼠认知损伤，其机制可能与激活AMPK,恢复突触功能有关。

纳米纤维素作为一种具有独特微纳结构(高长径比、纳米Entinostat级直径)的生物质天然高分子,因为其具有高比表面积、丰富的活性基团(羟基、羧基等)和优异的生物相容性等优点,纳米纤维素基功能材料近年来被广泛研究。其中,纳米纤维素基抗菌材料因为具有可降解、生物相容等特性,在生物医用辅料、包装材料等领域具有应用前景。本论文以自然界中存在的具有天然抗菌性的松果为原料,通过绿色环保的水解方法制备了木质素-纤维素纳米纤维,并探究了其抗菌性能。在理解纳米纤维素和木质素复合材料抗菌性质和抗菌原理的基础上,以纳米纤维素和木质素为主要成分,生物可降解高分子聚己二酸-对苯二甲酸丁二醇酯(PBAT)为增强材料,制备了具有抗菌性和热黏合性能的复合抗菌膜,并对其微观形貌、力学性能、抗菌性能和热粘合等性能进行了探究,为纳米纤维素基抗菌复合材料的开发提供参考。主要研究内容如下:(1)抗菌性纤维素复合纳米纤维的制备及其性能研究:以自然界中具有天然抗菌性质的松果为原料,双氧水为水解溶剂,在加热条件下(60°C),H_2O_2产生的HOO~-、OH~·、O~(2-)等自由基破坏松果内部结构以及纤维素的无定形区,成功制备了一种具有良好抗菌性能的纤维素基纳米纤维(P-CNF)。通过FT-IR、UV-Vis和SEM研究发现,该水解方法制备的纳米纤维素含有木质素和松香,直径约为20-30 nm,长度约为1-2μm。由于木质素和松香中的酚类物质可以抑制生物酶活性从而阻碍细菌繁殖,因此在抗菌实验可以发现P-CNF对革兰氏阴性大肠杆菌(E.coli)和革兰氏阳性金黄色葡萄球菌(S.aureus)具有优异的抑制效果,其最小抑菌浓度(MIC)分别低至1.5和2 mg m L~(-1)。此外,P-CNF在乙醇中有良好的分散性,其乙醇分散液(0.15 wt%)可作为一种兼具杀菌和长效抑菌的新型消毒剂,有效抵御细菌的二次入侵,为抗菌性纤维素基纳米纤维在消杀细菌领域中的应用提供新思路。(2)抗菌性纳米纤维素基复合膜的制备及其性能研究:在探明木质素和纳米纤维素复合材料抗菌性质和机理的基础上,可利用纳米纤维素和木质素为原料制备抗菌复合包装膜。为提升制备制备复合膜的力学性能和热加工性能,本论文利用聚己二VX-661半抑制浓度酸-对苯二甲酸丁二醇酯(PBAT)为增强高分子,制备具有热粘附性能的抗菌复合膜。将纤维素纳米纤维(CNF)分散在木质素的DMAc溶液中,实现CNF与木质素的共混,加入PBAT并通过溶液浇筑增强纳米纤维素基复合膜。通过红外、热重、力学等测试,探究不同ER biogenesis占比的PBAT对复合膜化学结构、热稳定性、紫外阻隔性、机械性能、耐水性能、热封性能及抗菌性能的影响。研究发现,PBAT可以改善CNF和木质素之间的相容性从而提高复合膜的力学性能,拉伸强度最大提升25.5%。此外,PBAT提高纳米纤维素基复合膜热稳定性的同时,其耐水性也得到显著提升,薄膜在水溶液中4小时内无溶胀或内容物扩散现象。根据抗菌结果,复合膜对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌有良好的抑制作用,并且得益于PBAT赋予的可加工性,该纳米纤维素基复合膜有望成为抗菌包装领域的理想材料。

目的 探讨槲皮素抑制奥沙利铂耐药胃癌Laboratory Services细胞(SGC-7901/L-OHP)迁移的作用及其可能机制。方法 培养人胃癌敏感细胞(SGC-7901)和SGC-7901/L-OHP,槲皮素处理SGC-7901和SGC-7901/L-OHP细胞，通过CCK8检测槲皮素对其增殖的影响；采用划痕和Transwell实验检测SGC-7901和SGC-7901/L-OHP细胞迁移能力，以及槲皮素对SGC-7901/L-OHP细PD0325901核磁胞迁移能力的作用；采用Western blot检测槲皮素对SGC-7901/L-OHP细胞p-PI3K、p-AKT、MMP2和MMP9蛋白表达的作用；采用PI3K激活剂(IGF-1)和槲皮素联合处理SGC-7901/L-OHP细胞，观察其对SGC-7901/L-OHP细胞迁移能力以及对p-PI3K、p-AKT、MMP2和MMP9蛋白表达的影响。结果 划痕和Transwell实验结果显示，耐药细胞的迁移能力明显强于敏感细胞(P<0.05),槲皮素能够抑制SGC-7901/L-OHP细胞的迁移能力(P<0.05)。Western blot结果显示，槲皮素能抑制p-PI3SBE-β-CD IC50K、p-AKT、MMP2和MMP9的表达(P<0.05)。与槲皮素组比较，IGF-1与槲皮素联合处理促进SGC-7901/L-OHP细胞迁移(P<0.05),促进p-PI3K、p-AKT、MMP2和MMP9蛋白表达(P<0.05)。结论 槲皮素可能通过抑制PI3K/AKT信号通路抑制胃癌奥沙利铂耐药细胞SGC-7901/L-OHP细胞迁移。

目的 评价终末期肾病行高通量血透治疗的预后效果，为终末期肾病患者治疗工作提供参考。方法 选择我院2018年8月至2019年6月期间收治治疗的终末期肾病患者，总计80例。结合血透治疗方案进行随机法分组，对照组、观察组例数一致，伦理委员会审核批准。对照组40例终末期肾病患者行低通量血透治疗，观察组40例终末期肾病患者行高通量血透治疗，比较两组患者的治疗情况，包括并发症发生情况system medicine、血清学指标、降压药使用频率以及生活质量状况，参考健康Erdafitinib调查简表（The MOS Item Short from HealAdezmapimod浓度th Survey,SF-36）评估。结果 就并发症情况分析，观察组患者高甲状腺血症、肾性骨病等并发症发生率5.00%明显低于对照组（20.00%）,P <0.05；就β_2-微球蛋白、血红蛋白、血磷以及甲状旁腺素相关指标水平比较，治疗后比较治疗前改善，观察组β_2-微球蛋白（41.02±6.60）mg/L、血磷（1.73±0.33）μmol/L、甲状旁腺素（248.02±10.02）μmol/L均低于对照组，血红蛋白（114.20±9.20）g/L高于对照组，P <0.05；就降压药使用频率分析，观察组降压药使用频率7.50%明显低于对照组的25.00%,P <0.05；就生活质量评分进行分析，观察组患者评分高于对照组，P <0.05。结论 对比低通量血透治疗，高通量血透治疗终末期肾病的效果显著，利于缓解和改善症状体征，且安全性获得保障，提高了患者的生活质量。

目的 探究右美托咪定对子宫内膜癌细胞增殖influenza genetic heterogeneity、凋亡及Wnt/β-连环蛋白（β-catenin）通路的影响。方法 将Ishikawa、RL95-2细胞分为对照组，右美托咪定1、10、100nmol/L组GDC-0973临床试验，右美托咪定（100nmol/L）+LiCl组。CCK-8法和EdU检测细胞增殖，流式细胞术检测细胞凋亡，Western blotting检测增殖细胞核抗原（PCNA）、B淋巴细胞瘤-2蛋白（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、β-连环蛋白（β-catenin）、c-Myc基因（c-Myc）、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)表达水平。构建子宫内膜癌裸鼠模型，分为对照组、右美托咪定组、右美托咪定+LiCl组，测量肿瘤质量与体积，苏木精–伊红（HE）染色观察移植瘤组织形态，免疫组化法检测移植瘤组织Ki-67、β-catenin蛋白表达。结果 与对照组相比，不同浓度右美托咪定处理后Ishikawa、RL95-2细胞吸光度（A）值、EdU阳性细胞率、迁移细胞数、侵袭细胞数、PCNA、Bcl-2、β-catenin、c-Myc、Cyclin D1蛋白表达显著降低，凋亡率、Bax表达上升（P<0.05）；与右美托咪定100 nmol/L组相比，右美托咪定+LiCl组A值、EdU阳性细胞率、迁移细胞数、侵袭细胞数、PCNA、Bcl-2、β-catenin、c-Myc、Cyclin D1蛋白表达显著升高，凋亡率、Bax表达下降（P<0.0CCRG 81045 IC505）。右美托咪定能抑制移植瘤质量和体积，促进肿瘤凋亡，降低β-catenin、Ki-67蛋白表达（P<0.05）;Li Cl能逆转右美托咪定对移植瘤的抑制作用（P<0.05）。结论 右美托咪定能抑制子宫内膜癌细胞增殖，促进凋亡，其作用机制可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路有关。

红景天苷是从红景天分离得到的一种苯丙素苷，具有耐缺氧、抗氧化、抗炎、保护神经、抗疲劳、抗衰老及调节免疫等广谱药理特性。红景天苷具有多靶点—多途径LBH589配制的整体调节特征，通过激活磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B信号通路和单磷酸腺苷活化蛋白激酶途径、B淋巴细胞瘤-2基因/B淋巴细胞瘤-2基因相关X蛋白通路和内源性抗氧化酶的活性及环氧合酶/前列腺素E2信号通路保护糖尿病性视网膜病变视网膜血管内皮细胞、视网膜色素上皮细胞及Müller细胞；激活调控转化生长因子信号通路、磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白hepatic tumor激酶B信号通路和分泌性糖蛋白/β-连环蛋白通路，从而抑制青光眼小梁网细胞和神经节细胞凋亡，并调节眼内压的稳定；激活蛋白激酶B/糖原合成酶激酶-3信号通路抑制年龄相关性黄斑变性视网膜色素上皮细胞氧化损伤，降低血管内皮生长因子和缺氧诱导因子-1的表达水平抑制脉络膜新生血管的形成；发挥抗氧化活性，保护白内障晶状体上皮细胞免受氧化损伤；改善近视所致的巩膜缺氧；以及通过激活单磷酸腺苷活化蛋白激酶—沉默信息调节因子1信号通路促进自噬等来抑制机体氧化应激，缓解干眼症引起的角膜上皮细胞氧化损伤等。红景天苷在眼科应用研究涉及的范围越来越广，本文就国内、外红景天苷www.selleck.cn/products/liraglutide治疗相关眼科疾病的最新研究进展予以综述。

下丘脑神经元合成的促性腺激素释放激素(GnRH),通过垂体门脉系统,作用于垂体前叶促性腺激素细胞表面的GnRH受体(GnRHR),调节促性腺激素的合成与分泌。腺垂体促性腺激素细胞合成并分泌的促卵泡素(Fimmune exhaustionSH),作为下丘脑-垂体-性腺轴(HPGA)的中间因子,调节哺乳动物性腺发育与激素分泌、卵泡发育、配子发生等生理活动,在生殖过程中起着关键作用。同时,MG132配制FSH还被证实在骨骼生成、脂质代谢和胆固醇合成等方面发挥重要的调控功能。目前,FSH及其制剂已被广泛应用于家畜繁殖调控、人类辅助生殖等领域中。在细胞内,GnRH信号分子能够通过MAPK信号通路、Ca~(2+)/Ca MKⅡ信号通路等多种信号通路调控FSH的合成与分泌,其调控机制十分复杂。其中,Ca MKⅡ作为细胞内重要的信号传递分子,参与了多种垂体激素合成与分泌的调控。然而,有关GnRH通过Ca MKⅡ调控FSH合成与分泌的分子机制尚不明确。前期研究结果表明,非编码RNA介导了GnRH信号分子对垂体的调控过程,与FSH的合成密切相关。然而,垂体特异性表达的非编码RNA是否参与Ca MKⅡ调控FSH合成与分泌的过程尚不明确。为了明确GnRH刺激后腺垂体m RNA、mi RNA和蛋白质的表达变化,解析GnRH调控FSH合成与分泌的分子机制。本研究对GnRH处理后的大鼠腺垂体进行了蛋白组学、磷酸化蛋白组学和转录组学相关分析。通过生物信息学分析,建立了GnRH处理后腺垂体蛋白和磷酸化蛋白的差异表达图谱,对蛋白功能进行了聚类分析。结合TMT定量蛋白组学、HE染色、免疫荧光试验,验证CAMK2D与CREB1蛋白的差异表达和细胞定位。通过转染相应磷酸化位点突变质粒验证了CAMK2D对CREB1和FSH的调控作用。利用双荧光素酶报告试验,验证mi R-23b-3p与lnc RNA-m23b、CAMK2D的靶向调控作用。试验解析了GnRH通过CAMK2D调控FSH合成与分泌的分子机制,具体结果如下:1.成功构建GnRH处理后大鼠腺垂体蛋白差异表达谱,共鉴定得到81个差异表达的蛋白,其中28个蛋白表达上调、53个蛋白表达下调。2.成功构建GnRH处理后大鼠腺垂体磷酸化蛋白差异表达谱,共鉴定得到621个差异表达的磷酸化蛋白与1000个出现显著差异的磷酸化修饰位点。3.GnRH处理后,腺垂体中CAMK2D的蛋白表达量和磷酸化修饰水平升高,CREB1蛋白磷酸化修饰水平升高,CAMK2D与CREB1的共定位信号增强。4.GnRH通过磷酸化CAMK2D的T287位点,促进CREB1 S133位点的磷酸化,进而促进FSH的合成和分泌。5.GnRH处理大鼠腺垂体后,共鉴定到385个差异表达的m RNA,其中180个m RNA显著上调,205个m RNA显著下调。鉴定到20个差异表达的mi RNA,其中13个mi RNA显著上调,7个mi RNA显著下调。6.GnRH促进腺垂体中lncRNA-m23b的表达上调。高表达的lnc RNA-m23b竞争性结合mi R-23b-3p,促进CAMK2D的表达,进而调控FSH的合成与分泌。本研究探究了GnRH对腺垂体mRNA、miRNA、蛋白与磷酸化蛋白表达的影响,揭示了GnRH通过lnc Erdafitinib分子式RNA-m23b/mi R-23b-3p/CAMK2D/CREB1通路促进FSH合成与分泌的分子机制。研究结果从表观遗传学层面补充完善了GnRH对腺垂体FSH合成与分泌的调控网络,也为生殖激素在辅助生殖中的应用与相关激素制剂的开发提供了理论依据。

目的 观测沉默结缔组织生长因子(connective tissue growth factor, CTGF)HbeAg-positive chronic infection基因对肝星状细胞T6(hepatic stellate cell T6,HSC＿T6)的生长与凋亡，以及增殖细胞核抗原(Proliferating cell nuclear antigen, PCNA)、CTGF、整合素α5(integrin alpha 5,Itgα5)和Ⅰ型胶原(collagenⅠ, ColⅠ)表达的影响。方法 将CTGF-shRNA病毒感染HSC＿T6(实验组)。空病毒感染的HSC＿T6(空病毒组)或未感染的HSC＿T6(正常组)作对照。在显微镜下观测被感染HSC＿T6的生长与绿色荧光蛋白(green fluorescent protein, BMN 673 MWGFP)的表达变化；采用CCK-8(cell count kit-8))比色检测被感染HSC＿T6的增殖情况；流式细胞仪(flow cytometry, FCM)检GSK1349572说明书测被感染HSC＿T6的凋亡情况。定量PCR、Western blot及免疫荧光细胞化学分别检测PCNA、CTGF、Itgα5和ColⅠ的表达变化。结果 在显微镜下观察到被感染的HSC＿T6高表达GFP。CCK-8结果表明，与对照相比，沉默CTGF基因的HSC＿T6生长显著受抑，72 h开始其差异具统计学意义(P<0.05)。FCM检测结果显示，沉默CTGF基因可诱导HSC＿T6凋亡。定量PCR、Western blot及免疫荧光细胞化学结果证实，沉默CTGF基因可在mRNA及蛋白水平明显下调HSC＿T6的PCNA、CTGF、Itgα5与ColⅠ的表达，与对照比较，差异均具统计学意义(P<0.05)。结论 沉默CTGF基因可下调HSC＿T6的PCNA、CTGF、Itgα5及ColⅠ的表达，抑制HSC＿T6的生长，诱导HSC＿T6凋亡，其机制可能和HSC＿T6的CTGF/Itgα5信号通路受阻紧密相关。

高尿酸血症是痛风发病的生化基础，严重威胁人体的生命安全。本文针对35株乳酸菌分别进行鸟苷和肌苷降解能力的测定，并发现其中四株乳酸菌具有较高的降解能力。随后对Belumosudil体内这四株菌的菌悬液、细胞内容物及代谢物进行黄嘌呤氧化酶活性的抑制实验，选取其中抑制能力最强的菌株进行全基因组测序和安全性验证。结果表明，鼠李糖乳杆菌JY027对鸟苷和肌苷的降解率分别达到80.27%和87.33%，且该菌株Navitoclax的菌悬液、细胞内容物及代谢物对黄嘌呤氧化酶的抑制率分别为85.71%、78.34%、84.05%，说明该菌株具有较强的潜在降尿酸能力。此外，通过对鼠李糖乳杆菌JY027进行全基因组编码基因的预测发legal and forensic medicine现，该菌株具有次黄嘌呤磷酸核糖基转移酶、次黄嘌呤核苷酸脱氢酶等多个尿酸代谢相关基因。经过吲哚、溶血等实验验证了该菌株的安全性。综上，本研究为鼠李糖乳杆菌JY027用于缓解高尿酸血症提供了理论基础。

目的 利用网络药理学探究人参、红参、黑参、西洋参和人参叶治疗脾气虚的药效物质基础与作用机制。方法 利用TCMSP数据库查阅相关文献筛选人参、红参、黑参、西洋参和人参叶的有效成分和靶点。利用PubChem和Swiss target prediction平台收集TCMSP数据库中没有收录的人参、红参、黑参、西洋参和人参叶有效成分与靶点信息。利用GeneCarS63845ds数据库对脾气虚靶点进行搜索并下载数Dolutegravir据，整理和汇总。利用Cytoscape 3.7.2软件构建活性成分-疾病-靶点网络图。在String平台上构建靶点蛋白互作网络，最后利用R软件对关键靶点基因进行KEGG通路富集分析，揭示五种药材治疗脾气虚的作用机制和通路。结果 通过筛选分析，人参中有78个核心成Oncologic emergency分可通过537个核心靶点作用于195条通路上；红参中有26个核心成分可通过279个核心靶点作用于158条通路上；黑参中有16个核心成分可通过157个核心靶点作用于149条通路上；西洋参中有27个核心成分可通过236个核心靶点作用于168条通路上；人参叶中有26个成分可通过216个核心靶点作用于162条通路上。五种药材的活性成分可通过STAT3 （信号转导及转录激活因子3）、MAPK1（丝裂原活化蛋白激酶1）、HSP90AA1（热休克蛋白90AA1）、VEGFA（血管内皮生长因子A）等多个关键靶点调控PI3K-Akt信号通路、肿瘤坏死因子信号通路等发挥治疗作用。结论 人参、红参、黑参、西洋参及人参叶主要通过多靶点调配神经系统、抑制细胞分裂周期、控制炎症反应等途径发挥治疗脾气虚的作用。