PDK1信号通路

目的:从少阳阳明合病的角度辨治玫瑰痤疮,采用中药湿热清加味联合强脉冲光治疗脾胃湿热型玫瑰痤疮,并观察其临床疗效及对患者生活质量的影响,以期为玫瑰痤疮的治疗提供有效且安全的治疗思路。方法:选取脾胃湿热型玫瑰痤疮患者共60例,随机分为治疗组30例(湿热清加味+强脉冲光),对照组30例(盐酸米诺环素胶囊),两组基础治疗方案为湿敷复方黄Entinostat浓度柏液涂剂加外用夫西Neuroscience Equipment地酸软膏,观察并记录患者治疗前及治疗6周后皮损的主要症状评分(潮红斑、毛细血管扩张、丘疹脓疱)、次要症状评分(瘙痒、灼热、刺痛、肿胀、斑块、眼部表现、面部外周累及、肥大增生性改变)、生活质量评分及不良反应等,运用SPSS27.0软件对各个观察指标进行统计分析。结果:治疗结束后两组的主要及次要症状,生活质量均较前改善;治疗结束后,治疗组在红斑、毛细血管扩张、灼热及肿胀的改善程度上要优于对照组(P<0.05),在丘疹DS-3201体内实验剂量脓疱、瘙痒、刺痛感的改善程度上,两组无明显差异(P>0.05);治疗结束后,治疗组在生活质量的改善程度上要优于对照组(P<0.05)。结论:1.湿热清加味联合强脉冲光可以明显改善玫瑰痤疮患者的临床症状及生活质量,且优于对照组。2.湿热清加味联合强脉冲光治疗脾胃湿热型玫瑰痤疮疗效确切,安全性好,尤其对于玫瑰痤疮患者的面部红斑、毛细血管扩张、肿胀及灼热感的改善要优于对照组;在生活质量方面,患者焦虑状态的改善也优于对照组。3.本研究根据六经来自八纲理论,认为玫瑰痤疮中医病机为少阳阳明合病,以和解少阳、清利湿热之龙胆泻肝汤化裁而来的湿热清加味治疗,疗效确定,切中病机,为经方辨治玫瑰痤疮提供了治疗思路。

细胞对力学刺激做出相应的反应很大程度上取决于细胞自身的结构，细胞内丰富的力学蛋白在响应外界力学信号刺激中也起着关键作用。液-液相分离（liquid-liquid phase separation, LLPS）是蛋白质或蛋白质-RNA复合物自发分离形成两个不同的“相”的过程，即共同存在的低浓度相和高浓度相。研究发现无膜细胞器通过LLPS来形成并维持自身结构，并调节内部的生化活动。LLCeralasertib作用PS作为一种细胞内调节生物大分子生化反应的新机制，在调控细胞力学蛋白响应中发挥着至German Armed Forces关重要的作用。它通过生物大分子之间的多价相互作用形成高浓度的液相凝聚体，进而调控细胞内一系列生命活动。已有研究表明多种细胞力学蛋白通过LLPS响应外界力学信号，进而影响细胞生长、增殖、扩散、迁移、凋亡等生物学行为。除了介绍细胞力学、液-液相分离的发生机制外，本综述还从含LIM结构域的蛋白1(LIM domain-containing protein1, LIMD1)相分离调控黏着斑成熟和力学信号转导、闭锁小带蛋白(zonula occludens, ZO)相分离调控细胞间紧密连接、Hippo信号通路的力学蛋白相分离调控细胞增殖和凋亡等方面介绍细胞力学蛋白相分离的最新进展。LLPS的提出不仅解释了细胞内无膜细胞器的形成机制，更为理解细胞内生理或病理的生物学功能提供了新的解题思路。但LLPS驱动黏着斑和细PLX4032体内实验剂量胞边缘动力学的分子机制仍然不完全明了，体外条件下的LLPS能否在机体生理条件下发生仍未明确，通过LLPS解释细胞内多种分子的相互作用仍存在困难，这些方向的研究有待开展。

食源性微生物污染是致使每年数千万人患病或死亡的重要原因之一。大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等目前流行食源性致病菌在食源性微生物污染中占比最高。现有的检测技术对时间和技术人员操作能力的要求较高,无法满足当下食品快速检测的需求。此外,抗生素的滥用致使一些耐药性食源性病菌的产生,这对食源性致病菌的杀灭技术提出了更高的要求。近年selleck CX-5461来,纳米酶凭借优异的催化能力与稳定的性能结构成为抗菌领域的热点材料。本文设计了一种具有级联催化能力(葡萄糖氧化酶-类过氧化物酶)的新型纳米酶GGFzyme,能催化底物葡萄糖生成活性氧,活性氧通过氧化3,3′,5,5′-四甲基联苯胺实现葡萄糖浓度和实际样品中的食源性致病菌活性的快速检测。同时催化产生大量活性氧让GGFzyme纳米酶展现出优异的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌杀灭能力。该纳米酶可有获悉更多效提高检测和杀灭食源性致病菌的效率。论文的主要研究内容如下:1.GGFzyme纳米酶的合成及其级联催化活性采用水热法制备GGFzyme,通过扫描电子显微镜(SEM)、透射电子显微镜(TEM)观察到材料的形貌呈椭球形且分布均匀,纳米激光粒度仪确定材料的粒径大小在20～50 nm。傅里叶变换红外光谱仪(FTIR)、X射线光电子能谱(XPS)以及能谱分析(SEM-EDS)等方法确定了各元素在合成材料内的分布和价键情况,同时证实了材料的成功合成。在体系中未添加过氧化氢(H_2O_2)的情况下,纳米酶GGFzyme能以葡萄糖为底物生成使显色底物TMB氧化的自由基,表明GGFzyme纳米酶具有葡萄糖氧化酶和类过氧化物酶催化能力。通过设置梯度对催化反应条件进行优化,得出GGFzyme纳米酶的最优反应温度为37°C,最佳p H=4.0,反应时间为30 min。GGFzyme纳米酶的合成方法简便且不需繁复仪器,在较宽温度和p H范围内具有较高的检测精度,较好的催化活性和稳定的结构。2.基于GGFzyme纳米酶级联催化食源性病菌检测以GGFzyme纳米酶级联催化为手段,利用食源性致病菌代谢过程对葡萄糖的消耗,构建食源性致病菌活性的快速检测方法。结果表明当体系中葡萄糖浓度在1～500μM之间时葡萄糖与吸光度值存在良好的线性关系(R~2=0.993),最低检测限(LOD)为0.43μM。本章中验证了GGFzyme纳米酶对底物具有良好的特异性,使得能通过吸光度值对未知浓度体系中的葡萄糖进行定量检测。实际样品测试中以苹果汁为检测对象,在对苹果汁进行预处理后,测定苹果汁中的吸光度值并计算出苹果汁中葡萄糖的含量。利用食源性致病菌生长繁殖会消耗葡萄糖的原理检测食源性致病菌污染前后的吸光度值变化,在本试验中能检测出浓度为10~7 CFU m L~(-1)的大肠杆菌(E.coli)、金黄色葡萄球菌(S.aureus)、鼠伤寒沙门菌(S.typhimurium)、单增李斯特菌(L.monocytogenes)和阪崎肠杆菌(E.sakazalii)等5种常见食源性致病菌。3.基于GGtranscutaneous immunizationFzyme纳米酶级联催化MRSA高效杀灭以葡萄糖触发的GGFzyme纳米酶级联催化产生的自由基为杀菌成分,对MRSA进行绿色高效杀菌。首先采用平板涂布法明确了GGFzyme纳米酶对MRSA的杀菌能力,结果表明材料在30 min内对10~7 CFU m L~(-1)细菌浓度的杀菌率高达99.4%。4′,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)、碘化丙啶(PI)荧光图像结果也显示MRSA会在葡萄糖和GGFzyme纳米酶的共同作用下大量死亡。通过观测扫描电镜探究GGFzyme纳米酶的杀菌机制,结果表明GGFzyme纳米酶催化产生的自由基破坏了耐药性食源性致病菌的细胞膜,导致细胞膜严重破损和细胞内容物质流出。通过电子自旋共振(ESR)确认生成自由基的种类为羟基自由基和超氧阴离子,导致自由基能破坏食源性致病菌的膜结构,影响细菌的代谢过程从而杀灭食源性致病菌。同时结合MTT细胞体外毒性实验和小鼠器官切片等手段,表明了GGFzyme纳米酶具有良好的生物安全性,为后续在食品领域深入开展食源性致病菌的杀灭研究奠定了坚实的基础。

目的：通过对慢性肾小球肾炎（Chronic glomerulonephritis,CGN，）的病案数据挖掘，总结分析中医运用中医药治疗CGN的用药规律。方法：由中国知网、万方、维普serum hepatitis及PubMed等数据库中筛检出相关研究文献，录入方药数据，整理、分析，探究其用药规律。结果：共录入处方83首，涉及中药214味，共计1250药次。常用药物排名靠前的依次为白术、黄芪、茯苓、GSI-IX分子量山药、薏苡仁、山茱萸等。药性为温、平、寒居多；药味为甘、苦、辛居前；主要归肝、脾、肾、肺经；功效上以补虚药为主，其次为利水渗湿药、清热药及活血化瘀药等。关联规则分析获得11个药对或角药组合和1组核心药物组合。聚类分析获得4类药物组合。结论：中医药治疗CGN的用药规律，是以健脾药为主兼以益肾药的用药基础上，辨证运用利水渗湿药、清热解毒药、活血化瘀VE-822核磁等，体现了扶正固本、祛邪治标的用药特点。

目的 评估肝内胆管癌(intrahepatic cholangiocarcinoma, ICC)根治性selleck产品切除术后行辅助性经肝动脉化疗栓塞(transcatheter arterial chemoembolization, TACE)治疗对患者生存及肿瘤复发的影响。方法 本研究收集2010年1月—2015年12月在东方肝胆外科医院完成根治性切除术的ICC患者，按是否接受术后辅助性TACE,分为TCobimetinib配制ACE组(术后接受辅助TACE)和非TACE组(术后未接受辅助TACE)。根据美国癌症联合委员会(AJCC)第8版肿瘤TNM分期系统进行分期。单因素及多因素分析用于评估独立的预后因素。Kaplan-Meier方法比较无复发生存率(RFS)和总生存率(OS)。结果 共有599例ICC患者纳入本研究，TACE组115例，非TACE组484例，中位随访时间为23个月。TACE组和非TACE组的1、3、5年OS生存率分别为67.0%、51.8%、36.6%和67.2%、48.5%、35.9%,两组患者生存时间比较，差异无统计学意义(P=0.592 9);TACE组的中位RFS时间要明显短于非TACE组(6个月vs 11个月),TACE组和非TACE组的1、3、5年RFS生存率分别为32.MLT Medicinal Leech Therapy3%、24.0%、18.8%,和46.1%、33.4%、25.8%,两组比较，差异具有统计学意义(P=0.003 6)。Cox回归模型显示，TACE组与非TACE组ICC患者无复发生存率存在统计学差异(HR=1.51,95%CI:1.15～1.96;P=0.002 6)。结论 ICC患者根治性切除术后辅助性TACE不能延长ICC患者的总生存率，而且可能有增加ICC术后患者肿瘤复发的风险。

目的：从定性和定量的角度探究电磁场（EMF）对成骨细胞内Ca~(2+)变化的影响，并试图探明Ca~(2+)在电磁场调控成骨细胞增殖与分化中的作用。方法：搭建频率为38.7 Hz，强度为1.5 mT的正弦EMF发生平台，将MC3T3-E1成骨细胞随机Pathologic grade分为对照组和实验（EMF）组。EMF组施加EMF干预，每天干预8 h。利用CCK8检测成骨细胞增殖，ALP染色检测成骨细胞分化，Ca~(2+)荧光探针和流式细胞仪检测成骨细胞内Ca~(2+)浓度。结果：CCK8细胞增殖结果显示，EMF干预48、72、96selleckchem SAHA及120 h，可显著促进成骨细胞增殖。ALP染色结果显示EMF干预14 d后，ELorlatinib小鼠MF组ALP表达显著高于对照组。Ca~(2+)荧光探针及流式细胞仪检测Ca~(2+)浓度结果显示EMF干预可促进成骨细胞内Ca~(2+)的增多。结论：EMF上调成骨细胞内Ca~(2+)信号可能与EMF促成骨细胞增殖和分化密切相关，但是哪些与Ca~(2+)相关的生物信号通路参与了EMF促成骨细胞增殖和分化效应，有待进一步研究。

目的 探究黄芩素是否通过调控核转录因子(NF)-κB、信号传导与转录激活因子(STAT)3、细胞外调节蛋白激酶(ERK),参与影响过敏性鼻炎小鼠的炎症反应，探究NF-κB/STAT3/ERK信号通路作为黄芩素作用靶点的可能性。方法 选取72只BALB/c小鼠随机分为健康对照组、过敏性鼻炎组、氯雷他定组、黄芩素处理组、黄芩素+ERK激活组、黄芩素+NF-κB激活组，每组12只。构建过敏性鼻炎小鼠模型，过敏性鼻炎症状评分评估各组的构模情况；苏木素-伊红(HE)染色观察各组鼻黏膜组织的病理学变化；血球计数法检测各组鼻腔灌洗液中各类细胞数量；酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒检测各组鼻腔灌洗液中白细胞介素(IL)-12、肿瘤坏死因子(TNF)-α、IL-6水平及血清中OVA特异性免疫球蛋白(Ig)E、IgG1水平；Western印迹法检测鼻黏膜组织中NF-κB/STAT3/ERK信号通路蛋白表达水平。结果 健康对照组鼻黏膜组织完整；与健康对照组相比，过敏性鼻炎组鼻黏膜组织具有明显病理学变化，过敏性鼻炎症状评分、鼻腔灌洗液中IL-12、TNF-α、IL-6含量和血清中IgE、IgG1含量显著升高，嗜酸性粒细胞、中性粒细胞、淋巴细胞、巨噬细胞数量和NF-κB p65、STAT3、ERK蛋白磷酸化水平显著升高(P<presumed consent0.05);selleckchem LY-188011与过敏性鼻炎组相比，氯雷他定组、黄芩素处理组黏膜组织逐渐恢复，过敏性鼻炎症状评分、鼻腔灌洗液中IL-12、TNF-α、IL-6含量和血清中IgE、IgG1含量显著降低，嗜酸性粒细胞、中性粒细胞、淋巴细胞、巨噬细胞数量和NF-κB p65、STAT3、ERK的蛋白磷酸化水平显著降低(P<0.05);与黄芩素处理组相比，分别激活ERK、NF-κB通路后，小鼠鼻黏膜组织恢复缓慢，过敏性鼻炎症状评分、鼻腔灌洗液中IL-12、TNF-α、IL-6含量和血清中IgE、IgG1含量显著升高，嗜酸性粒细胞、中性粒细胞、淋巴细胞、巨噬细胞数量显著升高(P<0.05);氯雷他定组和黄芩素处理组相比，各项指标MLN4924研究购买无显著差异(P>0.05)。结论 黄芩素通过调控NF-κB/STAT3/ERK信号通路，抑制NF-κB p65、STAT3、ERK蛋白磷酸化，减少炎症细胞聚集，减轻炎症反应，缓解小鼠过敏性鼻炎。

目的 基于网络药理学和分子对接探讨黑骨藤追风活络胶囊（HZC）治疗类风湿关节炎（RA）的作用机制。方法 通过ETCM数据库和文献查阅获得复方活性成分，运用Swiss Target Prediction平台进行靶点预测。用GenFunctional Aspects of Cell BiologyeCards、DisGeNET、OMIM数据库筛选RA相关靶点，绘制韦恩图获取药物和疾病交集靶点。采用STRING平台构建蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）网络，利用Cytoscape3.9.1软件中centiscape2.2插件筛选潜在关键靶点。用DAVID数据库对关键靶点进行GO功能和KEGG通路富集分析，用Cytoscape3.9.1软件绘制药物-活RP56976小鼠性成分-靶点-通路网络图。最后选取核心成分与核心靶点进行分子对接。结果 共筛选出32个有效成分，药物与疾病交集靶点91个，主要活性成分为槲皮素、盐酸青藤碱和杠柳苷元，核心靶点为肿瘤坏死因子（TNF）、信号转导与转录激活因子3(STAT3)、表皮生长因子KD025体外受体（EGFR）。作用机制可能与HIF-1信号通路、TNF信号通路、PI3K-Akt信号通路、JAK-STAT信号通路等有关。分子对接显示主要活性成分与关键靶点具有很好的对接活性。结论 HZC可通过多靶点、多通路的作用机理治疗RA。

传统塑料薄膜包装果蔬产品,会因果蔬新陈代谢和外界环境变化而在包装薄膜内表面产生雾化现象,这不仅会降低果蔬产品的可见性,影响产品的销售,而且产生的水蒸气滴落在果蔬表面容易引起微生Talazoparib溶解度物生长繁殖,加速果蔬腐败变质,从而缩短其货架期。防雾抗菌包装兼具防雾和抗菌功能,既能明显改善果蔬产品贮藏销售期间的严重雾化现象,提高产品美观性,又能抑制微生物生长,保持果蔬品质。本研究以低密度聚乙烯(LDPE)为基材,联合采用吐温80(T-80)和椰油脂肪酸二乙酰胺(CDEA)两种表面活性剂(SF)为防雾改性剂,选择纳米氧化锌(nano-ZnO)为抗菌剂,制备具有防雾、抗菌功能的包装薄膜。首先研究了不同浓度的SF对改性LDPE防雾薄膜性能的影响;其次探究了不同浓度的nano-ZnO对改性LDPE防雾抗菌薄膜性能的影响;接着使用不同防雾抗菌薄膜在4℃下对生菜的保鲜效果展开研究;最后,对防雾抗菌薄膜对于生菜中优势腐败菌荧光假单胞菌的抑菌作用及其原理进行分析。本文主要研究内容和结果如下:(1)采用挤出流延方法制备防雾薄膜。将T-80和CDEA加入到LDPE树脂中获得SF浓度分别为0%、1%、3%、5%的防雾薄膜。研究了不同浓度的SF对LDPE薄膜性能的影响。结果表明,SF的加入使薄膜呈现出轻微的黄红色趋势;SF与LDPE之间存在物理相互作用;SF整体均匀分散在LDPE基体中,但随着SF浓度的增加,SF在LDPE基体中有聚集的趋势;过量的SF对薄膜的机械性能和热稳定性产生了负面影响;SF的掺入使薄膜的亲水性得到极大改善,使薄膜具有良好的防雾性能,其防雾持续时间随SF的增加而延长,其中含5%SF的薄膜的防雾持续时间达到216 h。(2)采用挤出流延法制备防雾抗菌薄膜。将nano-ZnO和SF(T-80,CDEA)加入到LDPE树脂中制得一系列的防雾抗菌薄膜,并对改性薄膜的微观结构及其性能进行表征。结果表明,掺入nano-ZnO后,薄膜变白,呈现出抗紫外性能。SF的加入对薄膜颜色的影响不明显,一定程度上提高了薄膜的抗紫外性能;nano-ZnO均匀地分散于LDPE基质中,但随着nano-ZnO含量的增加,nano-ZnO有聚集的趋势,SF的加入提高了nano-ZnO在LDPE基质中的分散性;nano-ZnO的掺入和其含量的增加,导致薄膜的拉伸强度(TS)和杨氏模量先增大后减小,薄膜的断裂伸长率(EAB)和氧气、水蒸气透过系数(OP、WVP)不断减小。SF的加入提高了薄膜的TS、EAB和杨氏模量,起到了增韧增塑的作用,但是SF的加入略微降低了薄膜的气体阻隔性能。SF和nano-ZnO的加入使薄膜具备了良好的防雾抗菌性能,其中LDPE/SF/5%ZnO薄膜的防雾持久时间为166 h,对E.coli和S.aureus的抑菌率达到96.47%和97.93%。(3)使用LDPE/SF/ZnO系列共混薄膜保鲜生菜,探究生菜在贮藏期间相关保鲜指标的变化。结果表明,LDPE/SF/5%ZnO薄膜对生菜的保鲜效果最好,在贮藏15天后仍具有良好的品质。在此基础上,进一步研究LDPE/SF/5%ZnO薄膜对生菜贮藏期间抗氧化活性的影响。结果发现,LDPE/SF/5%ZnO薄膜包装组生菜的活性氧(ROS)水平、丙二醛(MDA)含量及多酚氧化酶(PPO)和过氧化物酶(POD)活性,均低于LDPE薄膜包装组。同时,LDPE/SF/5%ZnO薄膜包装保持了生菜中较高的总酚含量和抗氧化酶活性。这说明LDPE/SF/5%ZnO薄膜包装通过保持较高的抗氧化酶活性和降低褐变相关酶的活性,减少ROS的产生和积累,抑制组织中酚类化合物的氧化,延缓生菜的褐变。(4)探究LDPE/5%ZnO和LDPE/SF/5%ZnO薄膜对生菜中优势腐败菌荧光假单胞菌的抑菌作用及抑菌原理。结果表明,LDPE/5%ZnO和LDPE/SF/5%ZnO薄膜对荧光假单胞菌具有明显的抗菌效果。与LDPE薄膜处理组相比,经LDPE/5selleck化学%ZnO和LDPE/SF/5%ZnO薄膜处理后的荧光假单胞菌细胞壁、细胞膜和菌体形态受到明显损伤,核酸和蛋白质泄露明显,胞内ROS水平显著提高,从而导致细胞大量死亡。与此同时,LDPE/SF/5%ZnO薄膜的抗菌性能显著优于LDPE/5%ZnO薄膜,这主要因为LDPE/SF/5%ZnO薄膜的初始nanAutoimmune encephalitiso-ZnO含量更高,并且迁移出来的nano-ZnO更多,大大提高了nano-ZnO的利用率,从而提高了薄膜的抗菌性。

纤维化疾病通常是指由于长期反复的炎症刺激、损伤，组织异常修复的启动，使成肌纤维细胞异常增殖和细胞外基质过度沉积，最终导致组织器官发生纤维化的病理过程。近年来研究显示，许多中药有Specialized Imaging Systems效成分可以调节心、肺、肝、肾及胰腺等各个器官纤维化疾病靶细胞中NOD样受体蛋白3炎症小体(NOD-like receptor protein 3,NLRP3)的活化。本文将从中药调控P2X7(P2 xpurinoceptor 7, P2X7)嘌呤能受体靶点减轻心肌、肝脏、肾间质免疫炎症反应改善纤维化进展，从抑制NLRP3相关的活性氧生成，减轻氧化应激反应延缓心肌、肺、肾组织纤维化形成，从调节内质网应激和自噬通量减轻NLRP3炎症小体介导特LGX818 MW发性肺间质纤维化、胰腺炎纤维化等炎症损伤、氧化应激及细胞selleckchem BYL719凋亡，从通过靶向微小RNA通路影响多种细胞的基因表达水平抑制纤维化形成这几个方面对近五年来国内外文献进行综述总结，阐释相关中药有效成分抗纤维化药理机制，并为相关疾病的防治提供一定参考。