PDK1信号通路

本实验利用H_(2)O_(2)构建Caco-2细胞氧化应激损伤模型，探究笛鲷鱼鳞源海洋功能多肽（Crimson snapper scale peptides， CSSPs）对Caco-2细胞氧化应激损伤的保护作用，为其在功能性食品的应用奠定基础。通过测定细胞上Acute neuropathologies清液LDH和IL-8水平、胞内抗氧化酶活性和MDA含量、胞内ROS的释放量、相关此网站凋亡基因的表达，从细胞氧化还原状态和细胞凋亡两方面阐明CSSPs对损伤Caco-2细胞的抗氧化作用。结果显示，CSSPs能够通过抗selleck化学氧化防御系统来减轻H_(2)O_(2)对Caco-2细胞的损伤，主要包括增加胞内抗氧化酶活性以抑制LDH释放、胞内ROS积累、MDA及IL-8的生成。此外，CSSPs抑制氧化应激损伤诱导的细胞凋亡与线粒体介导的细胞凋亡途径有关，其可显著提高线粒体膜电位，下调Caspase-3、Caspase-9和Bax的表达，上调Bcl-2的表达。结果表明，CSSPs能够维持细胞氧化还原稳态和抑制细胞凋亡，有效减轻Caco-2细胞的损伤程度。

目的：探讨针对行糖皮质激素治疗的系统BLZ945细胞培养性红斑狼疮（SLE）患者实施循证护理具体方法及临床价值。方法：以我院2020年10月至2021年7月收治的90例SLE患者作为本次研究对象，按照信封法分为对照组（n=45）和研究组（n=45）。对照组SLE患者进行常规护理，研究组SLE患者予以常规护理（同对照组）联合循证护理，比较两组SLE患者护理过程中糖皮质激素相关不良反应发生情况、护理满意度等指标。结果：研究组SLE患者血糖代谢异常、恶心呕吐、感染等糖皮质激素相关不良反应发生率（分别为4.44%、6.67%、2.22%）均低于对照组SLE患者（分别为enterovirus infection17.78%、24.44%、15.56%），差异有统计学意义（P<0.05）；研究组SLE患者护理满意度（95.56%）高于对照组SLE患者（62.22%），差异有统计学意义（P<0.05）。结论：对接受糖皮质激素治疗的SLETaurine作用患者实施循证护理，有利于降低糖皮质激素相关不良反应发生率，并维持良好的护患关系。

目的:探讨安徽省界首市购买家庭医生签约服务的高血压患者服药依从性现状及其影响因素，为干预高血压患者服药依从性提供依据。方法:采用整群抽样的方法，对界首市5个乡镇合计48个photodynamic immunotherapy行政村中购买家庭医生签约服务的高血压患者开展问卷调查；采用自制服药依从性量表和影响因素调查问卷作为数据收集工具，selleck NMR结合患者家庭智能语音血压计上传的血压数据，分析高血压患者的服药依从性及其影响因素。结果:共调查3004名购买家庭医生签约服务的高血压患者，患者的服药依从性平均得分率63.50%。服药依从性与患者的病程、年龄、BMI、收缩压及其变异系数、舒张压变异系数、相关症状数和家人的Canagliflozin小鼠督促提醒密切相关(P<0.05)。结论:界首市购买家庭医生签约服务的高血压患者服药依从性得分率不高，仍有很大的提升空间。可基于影响因素特点，对重点人群进行针对性的用药行为干预以进一步提高服药依从性。

目的 探讨妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)患者胎盘组织中氧化应激相关因子Nrf2、热休克蛋白70(HSP70)的表达，分析二者相关性及滋养细胞氧化应激在ICP发病机制中的作用。方法 收集2018年3月—2019年12月在我院治疗并以剖宫产终止妊娠的ICP患者的胎盘组织标本60例，urine biomarker其中ICP轻度组30例，重度组30例；另收集同期正常妊娠孕妇的胎盘组织标本30例，作为正常妊娠组。采用RT-qPCR、免疫组化方法测定胎盘组织中Nrf2、HSP70的表达情况，同时分析Nrf2与HSP70之间的相关Decitabine体内性。结果 ICP轻、重度组胎盘组织中Nrf2、HSP70的表达均高于正常妊娠组，ICP重度组胎盘组织中的表达高于轻度组，且组间表达差异有统计学意义(P<0.selleck化学01);ICP组胎盘组织中Nrf2与HSP70的表达呈正相关(r=0.980,P<0.05);ICP组平均孕周明显低于正常妊娠组，差异有统计学意义(t=-6.487,P<0.01)。结论 Nrf2、HSP70均存在于人体胎盘滋养细胞中，且在ICP胎盘组织中呈高表达；ICP发生机制可能与滋养细胞氧化应激有关；Nrf2、HSP70可能相互影响，共同作用，参与了ICP的发生。

目的 探讨黄山市首康医院幽门螺杆菌（HP）阳性患者对不同药物耐药及精准治疗情况，为临床治疗HP提供相关依据。方法 选取2019年3月至2022年3月于该院行14C呼气试验阳性的患者为研究对象，进行HP菌株分离培养，对HP菌株进行药敏实验和耐药基因突变检测，并根据患者性别、年龄进行分组，比较亚组间抗菌药物耐药率、基因突变率差异性。对分离出HP菌株的患者给予精准治疗经验性治疗，比较两组患者HP根除情况。结果 313例患者共分离培养出267例菌株，培养阳性率为85.30%。267例HP菌株对甲硝唑耐药性最高（88.01%），对阿莫MK-2206西林（0.Berzosertib半抑制浓度00%）、呋喃唑酮（0.00%）、四环素（0.00%）耐药性最低。多重耐药结果显示，甲硝唑+克拉霉素（47.19%）耐药性最高。亚组分析显示，不同年龄患者的甲硝唑、克拉霉素、左氧氟沙星耐药率比较，差异有统计学意义（P<0.05）；基因突变检测结果显示，甲硝唑突变率（100.00%）最高；亚组分析显示，不同性别患者的阿莫西林、左氧氟沙星突变率比较，差异有统计学意义（P<0.05）；不同年龄患者的呋喃唑酮、左氧氟沙星突变率比较，差异有统计学意义（P<0.05）。267例分离出HP菌株的患者194例选择个性化治疗，73例选择经验性治疗，个性化治疗患者和经验性治疗患者治疗总有效Sickle cell hepatopathy率分别为90.21%和79.45%，差异有统计学意义（P<0.05）。结论 应高度重视HP耐药性，并根据耐药菌株确定治疗方案，以期获得较好的临床治疗效果。

目的 制备负载低聚倍半硅氧烷-双氯芬酸钠（polyhedral oligomeric silsesquioxane-diclofenac sodium,POSS-DS）纳米颗粒的甲基丙烯酰透明质酸（hyaluronic acid methacrylate,HAMA）水凝胶微球，对其进行表征并探究体内外生物学特性。方法 以八巯基POSS(sulfhydryl POSS,POSSNirogacestat采购-SH)为纳米构筑平台，采用“点击化学”法将聚二乙醇和DS以化学键接枝其上，构建功能化纳米颗粒POSS-DS，并使用核磁共振波谱仪分析成分，透射电镜对形貌进行表征。为实现药物长期缓慢释放，将POSS-DS包载于HAMA中，通过微流控技术制备多功能水凝胶微球，即HAMA@POSS-DS；利用光镜及扫描电镜对其形态进行表征，观察体外降解及药物释放效率，采用细胞计数试剂盒8(cell counting kit 8,CCK-8)试剂盒及活/死染色法检测对软骨细胞增殖的影响；并构建软骨细胞炎症模型后用HAMA@POSS-DS进行处理，通过免疫荧光染色及实时荧光定量PCR检测相关炎症指标，即Ⅱ型胶原、聚集蛋白聚糖（aggrecan,AGG）、基质金属蛋白酶13(matrix metalloproteinase 13,MMP-13)、解聚蛋白样金属蛋biomarker validation白酶5(recombinant A disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin 5,Adamts5)、速激肽1(recombinant tachykinin precursor 1,TAC1)，以正常培养软骨细胞及未作处理的炎症模型分别作为对照组及空白组，进一步评估其抗炎性能。最后，通过构建大鼠膝关节骨关节炎模型，经X线片及Micro-CT检查，验证HAMA@POSS-DS对骨关节炎的治疗效果。结果 POSS-DS纳米颗粒总体粒径均一，约100 nm。HAMA@POSSDS为不透明球体，selleck抑制剂粒径约100μm，呈多孔结构；体外降解周期为9周，期间缓释负载的POSS-DS。CCK-8试剂盒及活/死染色法检测显示HAMA@POSS-DS无明显细胞毒性，且其释放的POSS-DS对细胞增殖有促进作用（P<0.05）。软骨细胞抗炎实验中，HAMA@POSS-DS组Ⅱ型胶原mRNA相对表达量高于对照组和空白组、AGG mRNA相对表达量高于空白组、MMP-13、Adamts5以及TAC1 mRNA相对表达量低于空白组，上述差异均有统计学意义（P<0.05）。体内实验显示术后大鼠骨关节炎关节间隙宽度减小，但HAMA@POSS-DS可延缓关节间隙变窄进程，并改善关节周围骨赘增生情况（P<0.05）。结论 HAMA@POSS-DS可有效改善局部炎症微环境，并显著促进软骨细胞增殖，有利于促进骨关节炎的软骨再生与修复。

对来自不同产地的藏药材渣驯进行肝病治疗活性比较研究， 在本研究中， 首先评价了产自新疆维吾尔自治区阿勒泰地区哈巴河县、巴基斯坦吉尔吉特地区、西藏自治区山南市洛扎县、西藏自治区昌都市洛隆县、四川省甘孜藏族自治州九龙县等5个地区的藏药材渣驯对0.2%四氯化碳 (CCl_(4)) 诱导ICR小鼠急性肝损伤的保护作用。结果显示， 5个不同产地来源的藏药IACS-010759材渣驯在CCl_(4)诱导的小鼠急性氧化性肝损伤模型中， 均可显著降低肝损伤小鼠血清谷丙转氨酶(alanine aminoComplementary and alternative medicinetransferase， ALT)、谷草转氨酶 (aspartate aminotransferase， AST)、乳酸脱氢酶 (lactate dehydrogenase， LDH) 水平; 改善肝组织病理损伤; 其中， 新疆维吾尔自治区阿勒泰地区哈巴河县、巴基斯坦吉尔吉特地区、西藏自治区昌都市洛隆县三地来源的渣驯可显著降低肝组织丙二醛 (malondialdehyde， MDA) 含量 (P < 0.05)， 升高谷胱甘肽 (glutathione， GSH) 含量 (P < 0.01)， 改善肝组织氧化应激。进而利用对乙酰氨基酚 (acetaminophen， APAP) 诱导的HepG2细胞损伤模型， 评价了产自不同产地渣驯药材的体外保肝活性， 结果显示， 不同产地来源的藏药材渣驯均能显著抑制APAP诱导的肝细胞损伤， 提高肝细胞存活率。本研究表明， 不同产地来源的渣驯均具有明确的体内外肝保护活性， 其中， 来源于西藏自治区昌都市洛隆县的渣MS-275临床试验驯药材肝保护活性相对略优。本实验所用动物及相关处置符合动物福利的要求， 实验开展前经过中国医学科学院药物研究所实验动物管理和使用委员会的审查批准 (批准号: 00004024)。

目的:通过临床观察独活寄生汤与依托度酸缓释片在治疗腰椎间盘突出症上的差异,明确独活寄生汤治疗腰椎间盘突出症的临床疗效;通过临床取材髓核组织并提取髓核细胞,从分子水平探讨椎间盘退变的发病机理,阐明椎间盘退变与miR-223/JAK/STAT途径的相关性,并进一步探究独活寄生汤调控miR-223介导JAK/STAT信号通路减缓腰椎间盘退变的机制。方法:第一部分临床研究:回顾性分析2020年9月至2022年9月在我院骨科门诊治疗的162例腰椎间盘突出症患者,根据本研究的病例选择标准,分为独活寄生汤组(A组)和依托度酸缓释片组(B组),其中A组77例,B组85例,观察治疗前、治疗后1周、治疗后2周、治疗后4周的VAS评分、JOA评分、Oswestry功能障碍指数评分,评价独活寄生汤临床疗效及安全性。第二部分:本部分研究将临床取材的人腰椎间盘退变髓核组织和未退变髓核组织标本作为研究对象。(1)将手术中获取的髓核组织标本置于含20ml DMEM高糖培养液的50ml无菌离心管内,低温保存并于30min内送至实验室,进行髓核细胞分离、提取、培养,使用免疫荧光技术鉴定细胞。(2)qPCR检测退变与未退变髓核组织标本中miR-223、JAK/STAT各因子的表达。第三部分:本部分将研究髓核细胞中miR-223调控JAK/STAT信号通路的作用机制。(1)腰椎间盘髓核细胞作为研究对象,将第二部分中提取而来的髓核细胞进行复苏,传代至第二代,设置五组,分别是空白组,Mimic control转染组,miR-223 mimics转染组,Inhiselleckbitor control转染组,miR-223 Inhibitor转染组。细胞转染后,qPCR法检测STAT各因子的m RNA表达,用Western Blot检测p-JAK蛋白表达水平。(2)根据上述实验结果,构建STATx的慢病毒载体,观察NP细胞在LPS诱导的炎性环境中,miR-223调控JAK/STAT信号通路的具体机制。设置WT NP cells、control virus NP cells、STATx down-regulation NP cells三种细胞,每种细胞各设置六组,分别是空白组,LPS+未转染组,LPS+mimic control转染组,LPS+miR-223 mimics转染组,LPS+inhibitor control转染组,miR-223 inhiselleck合成bitor转染组。选用10μg/m L LPS处理NP细胞。使用qPCR法检测基因的表达水平,Western Blot检测蛋白表达量,ELISA法测定炎性水平,流式细胞术及Tunel染色检测细胞凋亡情况。集中观察miR-223干预JAK/STAT通路在LPS诱导的髓核细胞中调节细胞凋亡、炎性因子和基质降解酶表达以及细胞外基质合成中的作用机制。第四部分:本部分将腰椎间盘NP细胞作为研究对象。研究独活寄生汤干预髓核细胞后,miR-223/JAK/STAT途径及下游因子的变化,明确独活寄生汤在椎间盘髓核细胞中的作用机制。(1)制备独活寄生汤含药血清,建立LPS诱导的炎性NP细胞模型。研究分为四组,分别是:空白组(LPS+对照血清)、低剂量组(LPS+2%DXJS含药血清+8%胎牛血清)、中剂量组(LPS+5%DXJS含药血清+5%胎牛血清)、高剂量组(LPS+10%DXJS含药血清)。使用CCK-8法检测各组NP细胞的增殖情况,流式细胞术及Tunel染色检测各组NP细胞凋亡情况。(2)选择独活寄生汤含药血清最佳作用浓度,转染细胞,设置LPS+DXJS+mimic control转染组和LPS+DXJS+miR-223mimic转染组。使用CCK-8法检测转染后两组NP细胞的增殖情况,流式细胞术及Tunel染色检测转染后两组NP细胞凋亡情况。qPCR法检测基因的表达水平,Western Blot检测蛋白表达量。结果:第一部分临床研究:(1)在VAS评分方面,治疗前两组间VAS评分无显著差异(P=0.84),在治疗后1周、2周、4周两组患者VAS评分均显示有统计学差异(P<0.05),见表1-3。两组间治疗前后VAS各分值出现频率呈由大到小演变。两组间治疗前后VAS评分整体趋势呈由高向低递减变化。(2)在JOA评分方面,治疗前两组间JOA评Immunohistochemistry分无显著差异(P=0.61),在治疗后1周、2周、4周两组患者JOA评分均显示有统计学差异(P<0.05)。两组间治疗前后JOA各分值出现频率呈由小到大演变。两组间治疗前后JOA评分整体趋势呈由低向高递增变化。(3)在ODI方面,治疗前两组间ODI评分无显著差异(P=0.50),在治疗后1周、2周、4周两组患者ODI评分均显示有统计学差异(P<0.05)。两组间治疗前后ODI各分值出现频率呈由大到小演变。两组间治疗前后ODI评分整体趋势呈由高向低递减变化。(4)治疗后4周,A组有效率为74.03%,B组总有效率65.88%。第二部分:(1)免疫荧光检测可见细胞内同时有聚蛋白多糖和CollagenⅡ的存在,由此证明为NP细胞。(2)在退变椎间盘髓核组织miR-223表达明显高于未退变椎间盘髓核组织中miR-223的表达,且二者有显著性差异(P<0.01)。此表达水平差异性说明,椎间盘退变与miR-223有关。(3)与未退变髓核组织基因表达水平相比,退变髓核组织的Jak2(P<0.01)、Jak3(P<0.01)、stat1(P<0.01)、stat4(P<0.01)以及stat5B(P<0.05)m RNA表达显著增加;stat3(P<0.05)、stat5A(P<0.01)m RNA表达显著降低;Jak1、stat6以及stat2 m RNA表达无显著差异,同样,这种差异表明,Jak2、Jak3、stat1、stat4、stat5B与椎间盘退变具有相关性。第三部分:(1)qPCR检测NP细胞转染miR-223 mimics后,与空白组和Mimic control转染组相比,STAT1 m RNA表达量增加,NP细胞转染miR-223 Inhibitor后,与空白组和Inhibitor control转染组相比,STAT1和STAT6 m RNA表达量增加,其中STAT1增加幅度较STAT6要大。因此,根据qPCR实验结果,包装STAT1 sh RNA病毒和对照病毒进行后续实验。(2)miR-223-mimics显著增加了JAK2和STAT1的表达,miR-223抑制剂显著降低了JAK2的表达。这证明miR-223主要上调NP细胞中JAK2/STAT1的表达。(3)WB检测结果显示caspase-1,caspase-3在各样本中的表达情况:在control virus NP cells和WT NP cell中,LPS作用于两种细胞后,caspase-1,caspase-3的表达量均高于空白组,说明LPS可以刺激caspase-1,caspase-3在这两种细胞中的表达,LPS和miR-223 mimics共同作用于这两种细胞后,caspase-1,caspase-3的表达量均高于LPS组,说明miR-223 mimics可以刺激caspase-1,caspase-3在这两种细胞中的表达,LPS和miR-223 Inhibitor共同作用于两种细胞后caspase-1,caspase-3的表达量均低于LPS组,说明miR-223 Inhibitor可以抑制caspase-1,caspase-3在这两种细胞中的表达。在STATx down-regulation NP cells中,各组中caspase-1,caspase-3的表达量与空白组相比无明显变化。(4)在control virus NP cells和WT NP cell中,LPS作用于两种细胞后,凋亡细胞比例均高于空白组。第四部分:(1)采用CCK-8法结果显示,独活寄生汤浓度越高,NP细胞的活力越强,增殖能力越强;流式细胞术结果显示,独活寄生汤浓度越高,NP细胞的凋亡水平越低。(2)转染后,采用CCK-8法结果显示,miR-223减轻NP细胞活力,降低增殖水平;流式细胞术结果显示,miR-223增加NP细胞的凋亡水平。(3)转染后,qPCR结果显示,相较于LPS+DXJS+mimic control转染组,LPS+DXJS+miR-223mimic转染组miR-223表达显著增加(P<0.01);Caspase-1(P<0.01),Caspase-3(P<0.01),MMP3(P<0.01),MMP13(P<0.01),IL-6(P<0.01)和TNF-α(P<0.01)m RNA表达显著增加。(4)转染后,WB结果显示,相较于LPS+DXJS+mimic control转染组,LPS+DXJS+miR-223 mimic转染组p-JAK2、p-STAT1、Caspase-1、Caspase-3、MMP3、MMP13、IL-6和TNF-α蛋白表达显著增加(P<0.01)结论:(1)独活寄生汤可以明显缓解腰椎间盘突出症患者的疼痛、改善功能障碍、提高生存质量,与依托度酸缓释片相比,疗效更可靠。(2)miR-223/JAK2/STAT1途径在腰椎间盘退变病理进展中的发挥着重要的调节作用,是腰椎间盘退变发病和防治的重要途径。(3)独活寄生汤可以通过抑制miR-223/JAK2/STAT1途径,减轻腰椎间盘髓核细胞的炎症反应,减缓髓核细胞过度凋亡。

目的 探讨急性缺血性卒中患者（AIS）入院肾小球滤过率估算值（eGFR）与3个月预后不良的关系。方法 基于西安卒中登记研究数据库，连续纳入西安市4所三级甲等医院住院的AIS患者临床特征和3个月随访相关资料。分别将eGFR按照连续性变量和四分组变量（Q1～Q4）处理。比较各组患者的eGFR临床特征差异；采用曲线拟合和多因素Logistic回归分selleck产品析，探讨AIS患者入院eGFR水平与3个月预后不良的关系。结果 最终纳入AIS患者2 280例，年龄（64.2±12.2）岁，男1 426例（62.5%）。校正相关混杂因素后，多因素Logistic回归分析显示，eGFR水平每升高5 mL·min-1·（1.73 m2）-1,3个月预后不良风险降低5.0%(OR=0.95,95%CI:0.94～0.99,P=0.028)，曲线拟合显示，随着e GFR水平的升高，3个月预后不良的风险呈先下降再升高的趋势thoracic oncology。与Q1相比，Q3组患者3个月预后不良风险降低44.0%，差异有统计学意义（OR=0.56,95%CI:0.38～0.82,P=0.003）,Q2组和Q4组患者3个月预后不良的风险降低差异无统计学意义。改良Rankin量表（modified Rankin scale,mRS）评分比例分布图显示，3个月预后不良患者中Q3和Q4组AIS患者中mRS>3分selleck Panobinostat的比例均明显降低。结论 低水平的eGFR是AIS患者短期预后不良的独立危险因素，早期干预e GFR在适当的范围内，可能会降低AIS患者短期预后不良的风险。

目的 观察柚皮苷对大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的影响及可能机制。方法 购买SPF级雌性SD大鼠，分离大鼠骨髓间充质干细胞并用流式细胞术进行鉴定；用不同浓度的柚皮苷诱导大鼠BMSCs细胞，MTT实验检测不同浓度柚皮苷不同时间点对BMSCs增殖的影响；流式细胞术检测柚皮苷对BMSCs凋亡的影响；对细胞进行茜素红染色；ELISA方法检测细胞ALP水平；Westernblot检测细胞成骨相关蛋白表达以及Wnt/β-catPuromycinenin信号通路相关蛋白的表达。结果 成功分离大鼠骨髓间充质干细胞并鉴定。柚皮苷能够促进BMSAntibiotic urine concentrationCselleck合成s细胞增殖，且呈剂量依赖性。除160μg/mL外，其他浓度的柚皮苷对细胞凋亡无明显促进作用。柚皮苷处理后，细胞橘红色矿化结节显著增加；细胞中ALP水平上调；BMP-2、OSX、Runx2、OPN和OCN表达显著提高，Wnt和β-catenin蛋白表达上调。结论 不同浓度的柚皮苷能够促进骨髓间充质干细胞的增殖，促进其成骨分化，该作用与激活Wnt/β-catenin信号通路相关。