PDK1信号通路

旨在分析雷州山羊胎儿70、90及120天背最长肌转录组测序中的差异表达mRNAs和lncRNAs及其靶基因，对差异表达基因进行功能富集分析，挖掘影响雷州山羊胎儿骨骼肌发育的关键候选基因。本研究选用年龄约2.5～3.5岁，饲养状况相同，健康无病，体重接近的雷州母山羊，分Staurosporine小鼠为妊娠期70、80和120天3组，每组各3只共9只，提取其胎儿背最长肌的RNA构建文库后使用Illumina HiSeq~(TM)2500进行转录组测序，以Q<0.05为阈值筛选出差异mRNAs和lncRNAs并进行生物学功能富集分析并构建靶向关系网络。最后通过荧光定量PCR鉴定差异基因表达水平，验证测序结果的可靠性。结果发现，在M70 vs. M90组中，总共发现185个差异表达mRNAs，其中170个上调，15个下调，66个差异表达lncRNAs，40个上调，22个下调；Acute care medicine在M120 vs. M90组中，共发现1 048个差异表达mRNAs，666个上调，382个Berzosertib浓度下调，352个差异表达lncRNAs，175个上调，177个下调。其中TNNT3、TNNI1、TNNT1、TNNI2、ITGA4、ITGA11、ITGB4等基因参与与肌肉发育相关的调控通路如肌钙蛋白复合物、肌丝、粘附斑、ECM-受体相互作用、PI3K-Akt信号通路等。根据lncRNA与mRNA的位置关系进行cis靶基因预测，总共筛选到37464个靶基因，有10个差异表达mRNAs被差异表达lncRNA靶向，其中NDUFB2、BRAF、METTL7B和ITGA7参与粘着斑以及肌动蛋白细胞骨架的调控，METTL7B和ITGA7还参与PI3K-Akt信号通路，lncRNA TCONS＿00214300靶向METTL7B和ITGA7。同时，8个差异表达mRNAs和lncRNAs的RT-PCR结果显示，8个基因的表达水平与转录组测序的表达趋势相似，说明测序结果可靠。结果显示，发现了影响雷州山羊胎儿肌肉发育的mRNA与lncRNA，发现了一些差异表达lncRNA和mRNA可能存在调控关系，对了解雷州山羊胎儿肌肉发育的分子调控机制提供了新的参考，也为雷州山羊分子选育种提供了理论借鉴。

目的：利用小鼠心房成纤维细胞探讨机械敏感离子通道Piezo1在调控高血压所致心房纤维化，进而导致房颤中的作用及可能机制。方法：采用确认细节酶消化法分离培养6～8周龄雄性C57BL/6小鼠的原代心房成纤维细胞，并采用课题组自制的加压装置（专利号201420109263.1）建立高血压模型，Western blot比较不同静水压（0、20和40 mmHg）干预下细胞Piezo1、Src/p-Src及纤维化指标I/III型胶原蛋白α1链（Col1A1/3A1）和基质金属蛋白酶2/9(MMP-2/9)蛋白表达水平。高静水压（40 mmHg）干预下的心房成纤维细胞，分别给予不同浓度（1、3和10μmol/L）的Piezo1抑制剂GsMTx4，或转染Piezo1 siRNA质粒降低Piezo1的表达，以及不同浓度（5和10μmol/L）的Src抑制剂PP1，观察细胞中Src/p-Simmune surveillancerc和纤维化相关因子蛋白水平的变化。常压下给予不同浓度（1、3和10μmol/L）的Piezo1特异性激动剂Yoda1，观察心房成纤维细胞中Src/p-Src和纤维化相关因子蛋白水平的变化。结果：随着压力升高，小鼠心房成纤维细胞中Piezo1、Src/p-Src及纤维化指标Col1A1/3A1和MMP-2/9蛋白表达水平显著升高（P<0.05）;GsMTx4/Piezo1 siRNA或PP1处理后，可使高静水压导致的Src/p-Src及纤维化相关因子水平下降（P<0.05）。而细胞给予Pie寻找更多zo1特异性激动剂Yoda1可模拟出高静水压干预的结果（P<0.05）。结论：在小鼠心房成纤维细胞中，机械敏感通道蛋白Piezo1可能通过调控Src/p-Src参与高血压所致的心房纤维化。

目的探讨子痫前期患者血清基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)水平及其在胎盘组织中的表达变化。方法 74例子痫前期患者作为研究对象,其中重度39例、轻度35例;同时选取正常足月妊娠产妇30例作为对照组,应用酶联免疫吸附法测定三组血清MMP-9、NGAL水平,应用RT-PCR测定三组胎盘组织中MMP-9mRNA及NGAL mRNA水平。结果轻度子痫前期组、重Infected total joint prosthetics度子痫前期组血清MMP-9、NGAL水平均明显高于对照组(t=3.127、2.846、3.508、3.284,均P<0.05),胎盘组织中MMP-9 mRNA、NGAL mRNA水平均明显低于对照组(t=-2.842、-2.728、-3.532、-3.276,均P<0.05);重度子痫前期患者血清MMP-DS-3201说明书9、NGAL水平显著高于轻度子痫前期患者(t=2.732、2.741,均P<0.05),重度子痫前期组胎盘组织中MMP-9 mRNA、NGAL mRNA水平明显低于轻度子痫前期组(t=-2.681、-2.587,均P<0.05);子痫前期血清MMP-9水平与NGAL水平呈正相关(r=0.606,P<0.05),胎盘组织中MMP-9 mRNA表达水平与NGAL mRNA表达水平呈正相关(r=0.532,P<0.05)。结论子痫前期患者血清MMP-9、NGAL水平显著升高,胎盘www.selleck.cn/products/MLN8237组织MMP-9 mRNA、NGAL mRNA水平显著下降,提示两者可能参与子痫的发病过程。

目的 分析亲子病房收治模式下,家庭聚集性感染Omicron变异株的儿童及其家属的临床特点及转归。方法 回顾性收集上海市第六人民医院新型冠状病毒肺炎(coronavirus disease 2019,COVID-19)定点医院于2022年4月8日至5月10日收治确诊的感染Omicron变异株患儿190例及其家属190例的临床资料,进行分析总结。结果 儿童组和成人组均以轻型为主,儿童组轻型比例高于成人组(P<0.05);2组临床表现均以上呼吸道症状为主,儿童组发热、腹痛腹泻、喘息发生率高于成人组(P<0.05),鼻塞流涕咳嗽、咽干咽痒咽痛发生率低于成人组(P<0.05);成人组治疗连花清瘟颗粒/小儿豉翘清热颗粒、中药汤剂、重组人干扰素α2b喷雾剂、止咳化痰药、奈玛特韦/利托那韦片使用率均高于儿童组(P<0.05);儿童组疫苗接种率(30.5%)较成人组(71.1%)低(P<0.001),而儿童组严重MDV3100急性呼吸综合征冠状病毒2 (severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARSCoV-2)核酸阳性持续时间短于成人组(P<0.05)。2组临床轻型者SARgenetic sequencingS-CoV-2核酸阳性持续时间短于普通型者(P<0.05)。2组有基础疾病者SARS-CoV-2核酸阳性持续时间长于无基础疾病者(P<0.05)。结论 家庭聚集性Omicron变异PLX3397作用株感染儿童和成人的临床分型均以轻型为主。尽管儿童疫苗接种率较低,但在亲子病房收治模式中,疾病恢复较快,SARS-CoV-2核酸阳性持续时间短于成人。[中国当代儿科杂志,2022,24 (10):1085-1091]

目的探讨体位干预联合链酶蛋白酶在无痛胃镜精查中胃黏膜清洁效果中的应用价值。方Dolutegravir化学结构法选取2016年7月至2017年7月在消化内镜中心行无痛胃镜精查的200例患者,根据随机数字表法分为试验组和对照组各100例,试验组胃镜精查前先服用链霉蛋白酶加二甲硅油散及利多卡因胶浆,再行体位干预(右侧卧位5 min-平卧5 min-左侧卧位5 min)待检,对照组精查前服用二甲硅油散及利多卡因胶浆,后左侧卧位于检查床15 min待检。比较2组患者在放大内镜白光下及窄带成像下的上消化道黏膜视野清晰度、胃镜精查操作时间。结果试验组内镜白光下黏膜视野清晰度A、B、C、D级分别占72.0%(72/100)、20.0%(20/100)、6.0%(6/100)、2.0%(2/100),优于对照组的32.0%(32/100)、30.0%(30/100)、13.0%(13/100)、25.0%(25/100),差异有统计学意义(X~2=39.54,P<0.05)。试验组放大内镜联合窄带成像技术下微血管视野清晰度评分1、2、3、4分分别有0、6、29、65例,优于对照组的11、31、28、30例,2组比较差异有统计Biomagnification factor学意义(Z=-6.07,P<0.05)。试验组检查时间为(10.64±3.83)min,低于对照组的(11.67±4.89)min,差异有统计学意义(t=1.978,P<0.05)。结论服用链霉蛋白酶作为祛黏液剂联合体位干JNJ-42756493供应商预,对无痛胃镜精查中上消化道黏膜视野清晰度效果明显,祛泡祛黏液效果全面,能有效缩短精查时间,值得临床推广应用。

膳食纤维(DiDermato oncologyetary Fiber, DF)具有多种生理活性功能，应用前景广阔，其中水溶性膳食纤维(Soluble Dietary Fiber, Glutaminase抑制剂SDF)功能优于水不溶性膳食纤维(Insoluble Dietary Fiber, IDF).为提高陕北狗头红枣SDF得率，采用超声波-酶耦合法，在单因素试验基础上通过响应面优化提取工艺，并对提取的红枣SDF的结构表征、理化性质及抗氧化特性进行分析.结果显示，最佳提取工艺关键参数为纤维素酶添加量1 300 U/g,酶解pH 7.0,酶解温度60℃,超声功率100 W,此条件下红枣SDF得率为21.37±0.35%.红枣SDF的持水力https://www.selleck.cn/products/incb28060.html为4.8±0.8 g/g、持油力为1.48±0.1 g/g、膨胀力为2.3±0.1 mL/g、阳离子交换能力为1.23±0.1 mmol/g、葡萄糖吸附率为16.8±0.15 mmol/g、胆固醇吸附率为8.12±0.18 mg/g(pH=2)和10.35±0.19 mg/g(pH=7).红枣SDF具有类似蜂巢的疏松多孔网状结构特征，推测含有糖类、木聚糖、半纤维素、纤维素、木质素等成分，符合膳食纤维结构特征.红枣SDF在1～7 mg/mL范围内，抗氧化活性与浓度正相关，DPPH和ABTS自由基清除率均达到90%以上.研究结果提高了红枣SDF得率，并揭示红枣SDF具有较好的理化性质及抗氧化活性，为陕北狗头红枣膳食纤维制备和产业化应用提供了参考.

目的 观察caulophyllogenin（Cau）对非酒精性脂肪性肝炎（NASH）模型小鼠的改善作用及相关机制。方法 使用小剂量链脲佐菌素结合高脂饮食诱导建立小鼠NASH模型，分为NASH组，罗格列酮组，Cau 25、50、100 mg·kg~(-1)组，Cau（100 mg·kg~(-1)）+T00709https://www.selleck.cn/products/PD-0332991.html07组和T0070907组，并设正常对照组。检测各组小鼠血清天冬氨酸转氨酶（AST）和丙氨酸转氨酶（ALT）水平评估肝功能，ELISA法检测血清白细胞介素（IL）-1β、IL-6、转化生长因子（TGF）-β1和肿瘤坏死因子（TNF）-α水平，油红O染色评估小鼠肝脂质沉积情况，Masson染色评估小鼠肝纤维化情况，Western blot法检selleckchem GDC-0973测肝组织中过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）、组蛋白H3赖氨酸27位点三甲基化（H3K27me3）、组蛋白（histone）H3、核因子（NF）-κB p65、磷酸化p65（p-p65）和TGF-β1蛋白表达水平。结果 与正常对照组相比，NASH组血清ALT、AST、TGF-β1、TNF-α、IL-1β和IL-6水平显著升高（P<0.05）。与NASH组相比，Cau各剂量组血清ALT、AST、TGF-β1、TNF-α、IL-1β和IL-6水平均显著降低（P<0.05），呈剂量依赖性趋势；Cau 100 mg·kg~(-1)与罗格列酮作用相当，但能够被T0070907显著逆转（P<0.05）。与正常对照组相比，NASH组肝组织脂质沉积和胶原纤维显著增加，PPARγ、H3K27me3、p-p65和TGF-β1蛋白表达水平上调（P<0.05）。与NASH组相比，Cau 100 mg·kg~(-1)组肝组织脂质沉积和胶原纤维减少，PPARγ表达上调，H3K27me3、p-p65和TGF-β1表达下调（P<0.05）。与Cau 100 mg·kg~(-1)组相比，Hepatocyte nuclear factorCau+T0070907组小鼠肝组织脂质沉积和纤维化水平增加（P<0.05），PPARγ和H3K27me3蛋白表达无显著差异（P>0.05），p-p65和TGF-β1蛋白表达上调（P<0.05）。结论 Cau能够显著改善NASH模型小鼠肝脏脂质沉积，抑制肝纤维化，减少炎症因子释放，其作用机制可能与激动PPARγ/NF-κB信号通路有关。

目的 探讨基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase 9,MMP-9)沉默对星形胶质细胞缺氧缺糖后水通道蛋白4(aquaporin,AQP4)表达的影响及其调节机制。方法 取出生后2 d的SD大鼠大脑皮层进行星形胶质细胞纯化培养,通过缺氧缺糖处理建立缺血细胞模型,实验分为正常组、阴性对照组和MMP-9沉默组。比色法测定细胞和上清液的乳酸脱氢酶(LDH)漏出率,利用慢病毒转染沉默MMP-9,并通过实时荧光定量RT-PCR和Western blot法分别检测星形胶质细胞AQP4和MMP-9的表达变化,Western WPB biogenesisblot法检测细胞PKA、PKC、PKG、CaMKⅡ蛋白含量。结果 细胞经缺氧缺糖处理后,LDH漏出率与正常组相比明显增高(t＝13.35,P0.01)；MMP-9沉默组星形胶质细胞MMP-9 mRNA(0.412±0.297)表达较阴性对照组(1.118±0.240)显著下调(t＝－4.964,P0.05)；伴随MMP-9表达的降低,MMP-9沉默组AQP4 mRNA(1.002±0.082)较阴性对照组(1.442±0.066 )明显下调(t＝－9.886,P0.01)；MM购买EnasidenibP-9沉默组AQP4蛋白(0.643±0.036)较阴性对照组(1.000±0.069)也明显下调(t＝－11.073,P0.01)；MMP-9沉默组的星形胶质细胞PKC蛋白表达(0.198±0.110)较阴性对照组(0.980±0.232)明显减低(t＝－7.218,P0.01),但蛋白激酶PKA、PKG、CaMKⅡ表达均差异无统计学意义(t分别为0.875、0selleckchem.818、0.933,均P0.05)。结论 缺氧缺糖导致星形胶质细胞通透性增高,基因MMP-9沉默后可介导AQP4表达下调,MMP-9可能是通过调控PKC的活性来调节AQP4的表达。

目的 了解南京市社区居民代谢综合征流行现况及其影响因素。方法 2020—2021年采用多阶段分层整群随机抽样的方法抽取南京市18岁以上常住居民进行慢性病及其危险因素监测项目，其中问卷调查包括社会人口学特征，行为危险因素以及慢性病患病情况；身体测量包括身高体重、腰围及血压；采用生化分析仪检测空腹血糖血脂。采用SPSS20.0软件进行χ~2检验和广义线性混合模型即多NN2211价格水平模型分析。结果 52 883名社区居民的代谢综合征患病率为24.0%，患病人数为12 677。代谢综合征患病率随年龄的增加呈上升趋势（χ~2趋势=1 997.522,P<0.001），男性患病率为29.3%，高于女性19.1%。文化程度为FG-4592纯度小学及以下人群的患病率为29.7%；每日果蔬摄入量≥400 g人群的患病率为22.9%。五种组分中血压组分以及中心性肥胖的患病率最高，分别为52.2%,36.8%。广义线性混合模型分析结果表明女性、更高的文化程度、摄入较多的果蔬和充足的体力活动为代谢综合征的保护性因素；吸烟、年龄、已婚/同居或离异等为代谢综合征的危险orthopedic medicine因素。结论 南京市社区居民代谢综合征患病率较高，应关注男性、年龄更高以及文化程度较低人群，制定相应的防治措施并早期干预。

完整的血管内皮细胞对血管的正常功能至关重要。由于化学暴露或物理损伤(如血管成形术或支架植入)会导致血管损伤,原有内皮细胞的迁移和增殖是损伤修复的必要条件。在应激刺激或细胞受损后HMGB1会被释放到细胞外,作为损伤相关分子模式,参与炎症反应,迁移,增殖以及组织再生。HMGB1可以BAY 73-4506分子量作为促血管生成因子,通过刺激血管内皮细胞的萌发和迁移来促进血管生成进而促进损伤的修复。VEGFA以及FGF-2可以参与血管内皮的增殖,迁移以及血管化。本文针对HMGB1在血管内皮修复中对细胞迁移作用进行实验研究,主要研究内容和结论如下:(1)从脐静脉中分离HUVECs。采用胶原酶灌注消化法进行HUVECs的分离,通过细胞形态观察、细胞增殖活性检测、细胞成管能力检测以及细胞特异性children with medical complexity蛋白检测等手段对实验细胞进行鉴定。本研究成功从脐静脉中分离提取出原代细胞,细胞由起始的梭形或多边形增长为融合的卵石样;生长曲线呈“S”曲线生长,表明细胞具有良好的活性;在基质胶上细胞融合60%-80%时,形成管腔结构,具有形成血管的能力。吞噬荧光标记的乙酰低密度脂蛋白、胞内内皮细胞特征蛋白VWF以及CD31KD025使用方法,鉴定提取的细胞呈阳性,表明本研究方法提取的细胞为人脐静脉内皮细胞。(2)研究不同浓度HMGB1对HUVECs增殖以及迁移的影响。体外构建HMGB1浓度梯度,CCK-8法测定HUVECs的增殖能力、划痕创面愈合实验以及Transwell迁移小室实验测定HUVECs的迁移能力。细胞增殖实验结果显示不同浓度HMGB1对HUVECs的增殖影响差异较小。细胞划痕结果显示,创面愈合率和细胞迁移率随着HMGB1浓度的增加而逐渐增加,且Transwell小室实验显示穿过小室的细胞数量随HMGB1浓度的增加而增多。(3)研究不同浓度HMGB1对HUVECs的VEGFA和FGF-2分泌、基因以及蛋白的影响。体外构建HMGB1浓度梯度,RT-q PCR、Western Blot以及ELISA测定HUVECs中VEGFA和FGF-2的基因、蛋白以及分泌表达的影响。HUVECs胞外蛋白分泌检测结果显示,培养液中VEGFA的含量各组间变化较小,差异无统计学意义。长时间高浓度作用HUVECs时,细胞内的VEGFA基因与蛋白表达与对照组比较降低,差异具有统计学意义。各浓度HMGB1作用HUVECs均可引起细胞内FGF-2基因与蛋白表达的升高,差异有统计学意义。同一浓度HMGB1作用下48 h与12 h以及24 h相比,细胞内FGF-2基因与蛋白表达稍有降低。仅两组高浓度的HMGB1作用时,胞外FGF-2的水平会升高。本研究通过优化的酶灌注消化法,可成功提取HUVECs。HMGB1对HUVECs的增殖影响较小,不同浓度HMGB1对HUVECs的迁移能力均有促进作用,且呈浓度和时间依赖性,为寻找血管损伤后具有促进修复作用的新治疗靶点提供实验依据。